[논문]산수유 열매과육으로부터 실버세대 피부분비취 개선을 위한 항산화화합물 분리 및 구조분석

강주연; 박미라; 박진주; 김재성; 박상혁; 송원섭; 김수관; 이숙영

산수유 열매과육으로부터 실버세대 피부분비취 개선을 위한 항산화화합물 분리 및 구조분석
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강주연 (전남대학교병원 심장질환특성화연구센터) , 박미라 (조선대학교 구강악안면외과학교실) , 박진주 (조선대학교 치과용정밀장비및부품지역혁신센터) , 김재성 (조선대학교 구강악안면외과학교실) , 박상혁 (조선대학교 구강악안면외과학교실) , 송원섭 (순천대학교 원예학과) , 김수관 (조선대학교 구강악안면외과학교실) , 이숙영 (조선대학교 치과용정밀장비및부품지역혁신센터)

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문제 정의

연구목적은 산수유로부터 추출한 탈취능 소재에 수분·영양 보습성 식물소재가 첨가된 화장료 조성물을 조제하여, 특유한 노인냄새를 개선하고 동시에 건조피부로 인한 가려움증을 해소할 수 있는 고령자 전용 기초화장품을 개발하기 위하여 수행되었다.

제안 방법

3일 후 반응용액에 chloroform 25 ml를 가하여 2~3회 반복 추출한 다음 chloroform 추출액에 acetic acid 25ml과 포화 KI용액 1ml를 가하여 암실에서 5분간 방치한 다음 증류수 50ml를 가하여 1/100N Na2S2O3 용액으로 적정하였다.
추출물 EtOAc 분획으로부터 분리된 7개의 Fraction 중 활성이 가장 높은 분획물 2를 HPLC system, RP-C18 을 이용하여 Compound 5를 분리하였다. 50 % 분획을 HPLC system을 이용하여 Compound 1을 분리 하였고, 60 %에서는 Compound 2 Compound 3, 70 %에서는 Compound 4를 얻을 수 있었으며 총 5가지의 화합물을 동정하였다.
3일 후 반응용액에 chloroform 25 ml를 가하여 2~3회 반복 추출한 다음 chloroform 추출액에 acetic acid 25ml과 포화 KI용액 1ml를 가하여 암실에서 5분간 방치한 다음 증류수 50ml를 가하여 1/100N Na₂S₂O₃ 용액으로 적정하였다. UV-spectrum analysis에 의해 산화된 PA 함량을 과산화물값(peroxide value, POV)으로 측정하므로서 화합물들의 palmitoleic acid에 대한 산화억제력을 분석하였다.
동정된 물질의 항산화 효과를 비교 분석하기 위해 DPPH radical 소거능을 조사하고, 항산화 화합물이 palmitoleic acid(PA)의 산화를 억제하는지 분석하기 위하여 시료를 조제하여 각각의 혼합시료를 37℃에서 3일 동안 반응시켰다. 3일 후 반응용액에 chloroform 25 ml를 가하여 2~3회 반복 추출한 다음 chloroform 추출액에 acetic acid 25ml과 포화 KI용액 1ml를 가하여 암실에서 5분간 방치한 다음 증류수 50ml를 가하여 1/100N Na₂S₂O₃ 용액으로 적정하였다.
본 연구는 구례군 특산식물 10종 중 DPPH radical 소거능과 SOD 및 CAT 활성이 가장 우수한 산수유 열매의 과육 추출물을 재료로 하여 노인피부 분비 불쾌취(2-nonenal)의 원인물질인 palmitoleic acid의 산화를 억제할 수 있는 항산화 화합물을 분리하고, 구조를 분석하였다. 연구목적은 산수유로부터 추출한 탈취능 소재에 수분·영양 보습성 식물소재가 첨가된 화장료 조성물을 조제하여, 특유한 노인냄새를 개선하고 동시에 건조피부로 인한 가려움증을 해소할 수 있는 고령자 전용 기초화장품을 개발하기 위하여 수행되었다.
산수유 분획물 및 화합물의 항산화효과를 분석하기 위하여 palmitoleic acid에 대하여 0.1% BHT와 시료를 0, 10, 30 및 50ul 첨가한 후 50℃에서 7일간 저장하면서 과산화물기를 측정하였는데, 시료를 첨가하지 않은 대조구는 저장 1, 3, 5 및 7일 후에 과산화물기가가 60, 117, 140 및 1 7 meq/kg 이었는데, 0.1% BHT 10ul 첨가시는 9, 23, 30 및 36 meq/kg이었고, 시료를 첨가한 시험구에서는 10ul 첨가했을때 11, 33, 36 및 42 meq/kg, 30ul 첨가했을 때는 8, 22, 27 및 30 meq/kg, 50ul 첨가했을 경우엔 6, 20, 22 및 25 meq/kg로 나타났다.
산수유 열매 과육을 50% Ethyl Alcohol을 용매로 사용하고 digital heating mantle를 이용하여 추출한 다음 그 여액을 rotary evaporator로 감압 농축하는 방법으로 EtOAc, BuOH에 대하여 3회 반복하여 분획물을 조제하였다. 추출물 EtOAc 분획으로부터 분리된 7개의 Fraction 중 활성이 가장 높은 분획물 2를 HPLC system, RP-C18 을 이용하여 Compound 5를 분리하였다.
산수유 열매 과육을 50% Ethyl Alcohol을 용매로 사용하고 digital heating mantle를 이용하여 추출한 다음 그 여액을 rotary evaporator로 감압 농축하는 방법으로 EtOAc, BuOH에 대하여 3회 반복하여 분획물을 조제하였다. 추출물 EtOAc 분획으로부터 분리된 7개의 Fraction 중 활성이 가장 높은 분획물 2를 HPLC system, RP-C18 을 이용하여 Compound 5를 분리하였다. 50 % 분획을 HPLC system을 이용하여 Compound 1을 분리 하였고, 60 %에서는 Compound 2 Compound 3, 70 %에서는 Compound 4를 얻을 수 있었으며 총 5가지의 화합물을 동정하였다.

성능/효과

5종 화합물의 DPPH radical 소거능을 분석한 결과, gallic acid (10.63 ug/ml), cornuside (28.82 ug/ml), (7R)-O-Methyl morroniside (200 ug/ml), (7S)-O-Methyl morroniside (190 ug/ml), 그리고 loganin (258 ug/ml)의 순으로 나타났다 gallic acid와 cornuside 가 가장 높은 활성을 나타냈으며 대조군으로 사용된 합성 비타민인 BHT의 소거능에 비교하여 월등히 높은 항산화 활성을 보여주었다.(Table.

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