초록 ▼

본 발명은 형질 전환된 대장균으로부터 사람 인터페론 베타를 고순도,고수율로 정제하는 방법에 관한 것이다.인터페론 베타가 임상적 목적으로 사용되기 위해서는 해로운 물질이 완전히 제거되도록 정제해야만 하므로 본 발명은 형질 전환된 대장균을 초음파 처리,크로마토그래피등의 방법을 통해 사람 인터페론 베타를 완전 정제하고자 하였다.사람 인터페론 베타를 대장균으로부터 정제하기 위해, 유전자 재조합 대장균을 완충용액에 용해시켜 초음파 처리로 파쇄시킨 후 그 파쇄물을 원심분리하여 침전물을 완충용액으로 용해시키고 10배 희석시켜 다시 원심분리 시킨

본 발명은 형질 전환된 대장균으로부터 사람 인터페론 베타를 고순도,고수율로 정제하는 방법에 관한 것이다.인터페론 베타가 임상적 목적으로 사용되기 위해서는 해로운 물질이 완전히 제거되도록 정제해야만 하므로 본 발명은 형질 전환된 대장균을 초음파 처리,크로마토그래피등의 방법을 통해 사람 인터페론 베타를 완전 정제하고자 하였다.사람 인터페론 베타를 대장균으로부터 정제하기 위해, 유전자 재조합 대장균을 완충용액에 용해시켜 초음파 처리로 파쇄시킨 후 그 파쇄물을 원심분리하여 침전물을 완충용액으로 용해시키고 10배 희석시켜 다시 원심분리 시킨 다음, 얻어진 상충액을 글루 세파르오즈 CL-6B컬럼에 통과시켜 얻는 활성분획을 겔 여과 컬럼을 장착한 고성능 액체 크로마토그래피한다. 이러한 방법을 통하면 재조합 사람 인터페론 베타를 완전 정제 할 수 있다.

대표청구항 ▼

유전자 재조합 대장균을 0.1M 트리스-C1 완충용액(ph 8.5)으로 녹이고 파쇄한 다음 원심분리하여 침점물을 취하고, 상기 완충용액으로 세척한 다음 다시 원심분리하여 침전물을 취하고 50mM 암모니움 아세테이트 완충용액(pH 5.6)으로 용해시킨 후, 50mM 인산염 완충용액으로 희석시킨 다음, 원심분리하고 상충액을 블루 세파로오즈 CL-6B 컬럼에 통과시킨 후, 단백질을 추출분획하고 활성 획분만을 취하여 고성능 액체크로마토그래피 시스템으로 겔여과하여 정제함을 특징으로 하는 유전자 재조합 대장균으로 부터 사람 IFN-β의 정제방

유전자 재조합 대장균을 0.1M 트리스-C1 완충용액(ph 8.5)으로 녹이고 파쇄한 다음 원심분리하여 침점물을 취하고, 상기 완충용액으로 세척한 다음 다시 원심분리하여 침전물을 취하고 50mM 암모니움 아세테이트 완충용액(pH 5.6)으로 용해시킨 후, 50mM 인산염 완충용액으로 희석시킨 다음, 원심분리하고 상충액을 블루 세파로오즈 CL-6B 컬럼에 통과시킨 후, 단백질을 추출분획하고 활성 획분만을 취하여 고성능 액체크로마토그래피 시스템으로 겔여과하여 정제함을 특징으로 하는 유전자 재조합 대장균으로 부터 사람 IFN-β의 정제방법.