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NTIS 바로가기국가/구분 | 한국(KR)/공개특허 |
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국제특허분류(IPC8판) |
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출원번호 | 10-1992-0005629 (1992-04-01) |
공개번호 | 10-1993-0021786 (1993-11-23) |
DOI | http://doi.org/10.8080/1019920005629 |
발명자 / 주소 | |
출원인 / 주소 |
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대리인 / 주소 |
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심사청구여부 | 있음 (1997-03-27) |
심사진행상태 | 원결정유지(심사전치) |
법적상태 | 거절 |
본 발명은 유전자조작을 이용하여 사람의 프로인슐인 융합단백질을 생산하는 데 있어서 프로인슐린 융합단백질의 안정성과 발현율을 증가시키는 방법에 관한 것이다.먼저 사람 프로인슐인 유전자를 cDNA 클로닝 방법으로 대장균 숙주의 클로닝하였다. 이 플라스미스를 발현백터인 pEX2에 도입(pEX2-PI)하고, 융합단백질 유전자 중 베타 갈락토시다제 유전자 부분을 줄였다(pKB49).이를 벡터를 대장균 pop2136 형질전환하여 발현한 결고, 발현시간과 발현율을 각각 4시간과 25%로 동일하였으나 베타 갈라토시다제 유전자가 줄어든 pKB49의
사람 프로인슐린 융합단백질 유전자를 대장균에서 발현시켜 사람 프로인슐린 융합단백질을 대량 생산함에 있어서, 사람 프로인슐린 융합단백질의 베타 갈락토시다제 유전자부분의 크기가 줄어든 유전자와 파지람다 PR 프로모우터를 함유한 대장균발현 벡터에 삽입하여 제조하는 발현벡터 PKB49로 대장규능 형질전환 시킨후 형질 전환된 대장균을 배양하여, 사람 프로인슐린 융합단백질을 생산함을 특징으로 하는 사람 프로인슐린 융합단백질의 제조방법.
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