초록

본 발명은 중합성 대형 망상조직의 킬레이트 수지에 금속이온을 결합시켜 제조한 금속 친화성 수지를 사용하여, 재조합 대장균으로부터 발현된 비활성형 프로인슐린의 활성형으로서의 전환과정 중에 형성되는 프로인슐린-s-설포네이트를 선택적으로 분리ㆍ회수하는 방법에 관한 것이다. 프로인슐린 s-설포네이트의 정제에 본 발명의 방법을 이용하면, 경제적으로 고순도의 프로인슐린 s-설포네이트를 제조할 수 있다.

대표청구항 ▼

폴리히스티딘 표지를 함유하는 융합 펩타이드 프로인슐린의 N-말단에 연결되어 발현된 직쇄 프로인슐린 전구체에 시아노겐 브로마이드를 처리하고, 아황산화 반응시킴으로써 제조된 프로인슐린 S-설포네이트 함유 혼합단백질을 금속이온이 결합된 중합성 대형 망상조직의 킬레이트 수지와 반응시켜, 폴리히스티딘 표지를 포함하는 단백질을 전기 수지에 결합시키는 단계를 포함하는 프로인슐린 S-설포네이트 함유 혼합단백질로부터 프로인슐린 S-설포네이트의 제조방법.제1항에 있어서, 중합성 대형 망상조직의 킬레이트 수직 Diaion CR11 수지인 것을 특징으로

폴리히스티딘 표지를 함유하는 융합 펩타이드 프로인슐린의 N-말단에 연결되어 발현된 직쇄 프로인슐린 전구체에 시아노겐 브로마이드를 처리하고, 아황산화 반응시킴으로써 제조된 프로인슐린 S-설포네이트 함유 혼합단백질을 금속이온이 결합된 중합성 대형 망상조직의 킬레이트 수지와 반응시켜, 폴리히스티딘 표지를 포함하는 단백질을 전기 수지에 결합시키는 단계를 포함하는 프로인슐린 S-설포네이트 함유 혼합단백질로부터 프로인슐린 S-설포네이트의 제조방법.제1항에 있어서, 중합성 대형 망상조직의 킬레이트 수직 Diaion CR11 수지인 것을 특징으로 하는 방법.제1항에 있어서, 프로인슐린 S-설포네이트 함유 혼합단백질과 금속이온이 결합된 중합성 대형 망상조직의 킬레이트 수지와의 반응 pH는 8.5 내지 9.5인 것을 특징으로 하는 방법.제1항에 있어서, 프로인슐린 S-설포네이트는 인간 프로인슐린의 아미노산 서열에 상응하는 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.제1항에 있어서, 프로인슐린 S-설포네이트 함유 혼합단백질을 뱃치법 또는 칼럼법으로 금속이온이 결합된 중합성 대형 망상조직의 킬레이트 수지와 반응시키는 것을 특징으로 하는 방법.폴리히스티딘 표지를 함유하는 융합 펩타이드가 프로인슐린의 N-말단에 연결되어 발현된 직쇄 프로인슐린 전구체 시아노겐 브로마이드를 처리하고, 아황산화 반응시킴으로써 제조된 프로인슐린 S-설포네이트 함유 혼합단백질을 금속이온이 결합된 중합성 대형 망상조직의 킬레이트 수지와 반응시킨 다음, 반응상층액이나 수지 투과액으로부터 프로인슐린 S-설포네이트를 수득하는 단계를 포함하는 방법에 의해 제조된 프로인슐린 S-설포네이트.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.