초록 ▼

본 발명은 디프테리아 톡소이드 백신의 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 디프테리아 균주(CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE)의 배양조건을 최적화하여 디프테리아 톡신(DIPHTHERIA TOXIN)을 생산한 후 이를 황산암모늄 처리 및 이온교환 크로마토그래피를 이용하여 정제 및 무독화시킴으로써, 고순도의 디프테리아 톡신을 다량으로 간단히 생산한 후 정제할 수 있어, 안정성 및 면역성이 우수한 고순도의 디프테리아 톡소이드 백신을 대량으로 용이하게 얻을 수 있는 개선된 디프테리아 톡소이드 백신의 제조방법에 관한 것

본 발명은 디프테리아 톡소이드 백신의 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 디프테리아 균주(CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE)의 배양조건을 최적화하여 디프테리아 톡신(DIPHTHERIA TOXIN)을 생산한 후 이를 황산암모늄 처리 및 이온교환 크로마토그래피를 이용하여 정제 및 무독화시킴으로써, 고순도의 디프테리아 톡신을 다량으로 간단히 생산한 후 정제할 수 있어, 안정성 및 면역성이 우수한 고순도의 디프테리아 톡소이드 백신을 대량으로 용이하게 얻을 수 있는 개선된 디프테리아 톡소이드 백신의 제조방법에 관한 것이다.

대표청구항 ▼

디프테리아 톡소이드 백신의 제조방법에 있어서,디프테리아 균주(CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE)를 배지에 분주하고 공기와 산소의 혼합물을 0.1 ∼ 1 VVM으로 발효조에 공급하여 발효조의 용존산소량이 10 ∼ 50 % 공기포화도를 유지하면서 24 ∼ 72 시간동안 배양하되, 배양 시작 후 10 ∼ 30 시간에 말토스를 1 ∼ 30 G/ℓ농도로 추가하면서 배양하여 디프테리아 톡신 배양액을 얻는 단계;상기 디프테리아 톡신 배양액을 원심분리한 상청액을 한외여과(ULTRAFILTRATION) 후 투석여과(DIAFILTRA

디프테리아 톡소이드 백신의 제조방법에 있어서,디프테리아 균주(CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE)를 배지에 분주하고 공기와 산소의 혼합물을 0.1 ∼ 1 VVM으로 발효조에 공급하여 발효조의 용존산소량이 10 ∼ 50 % 공기포화도를 유지하면서 24 ∼ 72 시간동안 배양하되, 배양 시작 후 10 ∼ 30 시간에 말토스를 1 ∼ 30 G/ℓ농도로 추가하면서 배양하여 디프테리아 톡신 배양액을 얻는 단계;상기 디프테리아 톡신 배양액을 원심분리한 상청액을 한외여과(ULTRAFILTRATION) 후 투석여과(DIAFILTRATION)하여 농축시키는 단계; 상기 농축된 디프테리아 톡신을 황산암모늄으로 첨전 처리한 후 전도도 5 ∼ 8 MS/㎝인 인산염 완충액으로 투석하여 조정제시키는 단계; 상기 조정제된 디프테리아 톡신을 전도도 5ㅇ∼ 8 MS/㎝인 인산염 완충액으로 평형화시킨 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 정제시키는 단계; 및상기 정제된 디프테리아 톡신을 무독화시키는 단계를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 디프테리아 톡소이드 백신의 제조방법.