초록

클러스터링된 규칙적 간격의 짧은 회문식 반복부 (CRISPR)/CRISPR-연관 (Cas) 9-기반 시스템 관련 조성물, 및 유전자 발현 변경 및 게놈 조작을 위한 상기 CRISPR/Cas9-기반 시스템 관련 조성물의 사용 방법이 본원에 개시된다.또한, 근육, 예컨대 골격근 및 심장 근육에서 유전자 발현 변경 및 게놈 조작을 위한 조성물 및 상기 조성물의 사용 방법이 개시된다.

대표청구항 ▼

Cas9 및 적어도 1개의 가이드 RNA (gRNA)를 포함하는, 디스트로핀 유전자에 결합하는 DNA 표적화 시스템으로서,a) 적어도 1개의 gRNA가 서열 ggggctccaccctcacgagt, gcacaaaagtcaaatcggaa, gatttcaatataagattcgg, gtgagggctccaccctcacga, gaaggattgagggctccaccc, ggctccaccctcacgagtggg 및 gtgagggctccaccctcacga로부터 선택된 폴리뉴클레오티드 서열을 표적화하거나;b) 적어도 1개의 gRNA가 서열 gtacact

Cas9 및 적어도 1개의 가이드 RNA (gRNA)를 포함하는, 디스트로핀 유전자에 결합하는 DNA 표적화 시스템으로서,a) 적어도 1개의 gRNA가 서열 ggggctccaccctcacgagt, gcacaaaagtcaaatcggaa, gatttcaatataagattcgg, gtgagggctccaccctcacga, gaaggattgagggctccaccc, ggctccaccctcacgagtggg 및 gtgagggctccaccctcacga로부터 선택된 폴리뉴클레오티드 서열을 표적화하거나;b) 적어도 1개의 gRNA가 서열 gtacacttttcaaaatgctt를 포함하는 폴리뉴클레오티드 서열을 표적화하거나;c) 적어도 1개의 gRNA가 서열 gtcgctcactcaccctgcaa를 포함하는 폴리뉴클레오티드 서열을 표적화하거나;d) 적어도 1개의 gRNA가 서열 ggatctgtcaaatcgcctgc를 포함하는 폴리뉴클레오티드 서열을 표적화하거나;e) 적어도 1개의 gRNA가 서열 gattggctttgatttcccta, gtgtagagtaagtcagccta 및 gcagttgcctaagaactggt로부터 선택된 폴리뉴클레오티드 서열을 표적화하거나;f) 적어도 1개의 gRNA가 서열 gattggctttgatttcccta, gcagttgcctaagaactggt, gcctactcagactgttactc, ggggctccaccctcacgagt, gccttctttatcccctatcg 및 gttggacagaacttaccgac로부터 선택된 폴리뉴클레오티드 서열을 표적화하거나;g) 적어도 1개의 gRNA가 gattggctttgatttcccta, gcctactcagactgttactc, gcagttgcctaagaactggt, ggggctccaccctcacgagt, gccttctttatcccctatcg, gtgtagagtaagtcagccta, gttggacagaacttaccgac, gtttgcttcgctataaaacg, gtctgaggatggggccgcaa, ggatctgtcaaatcgcctgc, gccaggatggcattgggcag, gctgaatctgcggtggcagg, gttcttttgttcttctagcc, ggaaaagcttgagcaagtca, ggaagagttgcccctgcgcc, gacaaatctccagtggataa, gtgtttctcaggtaaagctc, ggaaggaccatttgacgtta, gaactgctatttcagtttcc, gccagccactcagccagtga, ggtatgcttttctgttaaag, gctcctggactgaccactat, ggaacagaggcgtccccagt, ggaggctagaacaatcatta, gacaagaacaccttcagaac, gggtttctgtgattttcttt, gggccaaagacctccgccag, gttggagaagcattcataaa, gtcgctcactcaccctgcaa, gaaaagagctgatgaaacaa, gtacacttttcaaaatgctt, ggagatgatcatcaagcaga, gctttgaaagagcaataaaa, gcacaaaagtcaaatcggaa, gatttcaatataagattcgg, gcttaagcaatcccgaactc, gaggccaaacctcggcttac, gttcgaaaatttcaggtaag, ggcagaacaggagataacag, ggcggccctcgcccttctct, gtagtgatcgtggatacgag, gtacagccctcggtgtatat, gggaaggaattaagcccgaa, gataaagtccagtgtcgatc, gaaaaccagagcttcggtca, ggagtcttctgggcaggcttaaaggctaacc, gtcgggtgagcatgtctttaatctacctcga, ggtgtcaccagagtaacagt, gtgatcatcaagcagaaggt, gaacttcgaaaatttcaggta, ggaaactcatcaaatatgcgt, gtcatttacactaacacgcat, ggaatgaaactcatcaaatat, gtcatcaatatctttgaagga, gtgttttcataggaaaaatag, gaattggaaaatgtgatggga, gatgatcatcaagcagaaggt, gagatgatcatcaagcagaag, gcattttttctcataccttct, gtcctactcagactgttactc, gacaggttgtgtcaccagagt, gttatcattttttctcatacc, gttgcctaagaactggtggga, gaaacagttgcctaagaactg, gtttcccaccagttcttaggc, gtggctttgatttccctaggg, gtagggaaatcaaagccaatg, ggaccctagggaaatcaaagc, gtgagggctccaccctcacga, gaaggattgagggctccaccc, ggctccaccctcacgagtggg, gtatcccctatcgaggaaacc, ggataaagaaggcctatttca, gaggccttctttatcccctat, gtgagggctccaccctcacga 및 ggataaagaaggcctatttca로부터 선택된 폴리뉴클레오티드 서열을 표적화하는 것인DNA 표적화 시스템.