초록 ▼

수정란의 성감별은 원하는 성의 새끼를 얻을 수 있기 때문에 가축산업에서 최대 관심사의 하나이다. 수정란을 이용한 성조절은 정자의 경우보다 정확성이 높고 수정란 이식술의 성공율 향상과 함께 실용성도 증가하고 있다.수정란에 대한 성감별의 가장 큰 목표는 성감별 과정중 수정란 세포의 생존성을 유지하고 성감별의 정확성을 최대로 높이면서 성감별 수정란의 이식시 높은 수태율을 얻는 점이다.따라서 본 연구에서는 세계적으로 시도된 바 없는 햄스터 H-Y 항체를 이용한 소 수정란 성감별 방법, 그리고 H-Y 항체사용시 문제점이 되고 있는

수정란의 성감별은 원하는 성의 새끼를 얻을 수 있기 때문에 가축산업에서 최대 관심사의 하나이다. 수정란을 이용한 성조절은 정자의 경우보다 정확성이 높고 수정란 이식술의 성공율 향상과 함께 실용성도 증가하고 있다.수정란에 대한 성감별의 가장 큰 목표는 성감별 과정중 수정란 세포의 생존성을 유지하고 성감별의 정확성을 최대로 높이면서 성감별 수정란의 이식시 높은 수태율을 얻는 점이다.따라서 본 연구에서는 세계적으로 시도된 바 없는 햄스터 H-Y 항체를 이용한 소 수정란 성감별 방법, 그리고 H-Y 항체사용시 문제점이 되고 있는 male 수정란의 생존성에 손상을 주지않는 적정 역가의 사용, 그리고 PCR 방법이 확진 방법으로서의 가능 여부, 실용성과 정확성이 높은 PCR 방법 사용시 수정란의 생존성을 높일 수 있는 생검조건, 그리고 생검된 성감별 수정란의 이식을 통한 수태율을 조사하였다. 그 결과 햄스터 H-Y 항체를 이용하여 한우 및 젖소 체외 수정란에 대한 성감별이 가능하였고 85% 이상의 정확성이 나타났다. 또한 햄스터 H-Y 항체로 성감별시 male 수정란의 재발달율도 40% 이상 나타나H-Y 항체로 성감별시 male 수정란의 사멸이 일어나는 문제점도 해결될 수 있었다.그러나 정확성과 실용성에서 PCR 방법이 더 선택되므로 PCR 방법에 의한 성감별 성공율은 생검율을 10-20%로 한 경우에도 95% 이상을 나타내었고, 생검 수정란의 생존성에서도 80% 이상을 나타내어 PCR 방법의 실용성을 도모할 수 있는 결과를 얻었다고 본다.생검된 수정란의 이식 결과는 수란우 9두중 2두가 수태되어 22.2%의 수태율을 얻었으나 이결과는 생검율 및 생검후 배양조건을 개선할 때 수태율을 더 향상 시킬 수 있으리라 본다.상기 결과를 볼 때 수정란의 생존성을 높이는 성감별 방법은 H-Y 항체를 이용한 방법이 추천 되겠으나 성감별진단 정확성면에서는 PCR 방법이 추천되며 PCR 방법에서 수정란 생검율, 생검후 배양조건, 등을 개선할 때 수태율을 더 향상시킬 수 있으리라 본다.따라서 성감별 진단 정확성이 높은 PCR 방법을 소 수정란 이식을 수행하는 국내 관련기관에 전수하여 이에 관한 숙련된 기술을 구축할 때 농가에서 요구하는 성감별된 소 수정란을 이식하여 산자를 얻음으로써 농가 소득에 크게 기여할 수 있으리라 본다.

Abstract ▼

Sex determination of domestic animal embryos has been one ofthe greatest interests in animal industry, as the farmers can produce the offspringssexed as they want.Sex control of mammalian embryos is much more feasible than that of spermatozoaas the former is more accurate and practicable alo

Sex determination of domestic animal embryos has been one ofthe greatest interests in animal industry, as the farmers can produce the offspringssexed as they want.Sex control of mammalian embryos is much more feasible than that of spermatozoaas the former is more accurate and practicable along with the rapid development ofembryo transfer, especially, in cattle reproduction.The major concern on embryo sexing is how to reduce the damage on embryoniccells during sexing procedure and how to increase the accuracy of sexing and at thesame time the conception rate. Therefore, in this research the sex determination usinghamster H-Y antibodies for Korean Native Cattle and Holstein embryos was performedfor the first time and the appropriate titer of H-Y antibodies which was not detrimentalto the viability of bovine male embryos was examined. The PCR method was alsoperformed to determine if the method would be usable for the confirmation of bovineembryo sexing using hamster H-Y antibodies.As PCR method has been considered as very accurate and practicable for bovineembryo sexing, the conditions which can improve the viability of biopsied bovineembryos such as the grade of biopsy and the culture conditions after biopsy were alsoinvestigated. Finally, the conception rate was investigated in the recipient cattle whichhad been transferred with the biopsied and sexed embryos.The accuracy of sex determination using H-Y antibodies for KNC and Holsteinembryos was more than 85% when confirmed by PCR method.In addition, the rate of redeveloped embryos which were arrested during incubationwith H-Y antibodies and diagnosed as male was more than 40%, indicating that H-Yantibodies used in this experiment can be used for sex determination especially tomaintain the viability of embryos.The rate of success of PCR method for sex determination of bovine embryos wasmore than 95% even when 10 to 20% of embryonic cell was used for PCR and the rateof viability was more than 80% when the rest of biopsied embryos (Inner Cell Masspart) were incubated after biopsy.The conception rate was 22.2%(2 pregnancies of 9 recipients) which wasconsidered still low but expected to be elevated when the conditions of biopsy ofembryos and culture conditions after biopsy are to be improved.These results indicated that the sex determination using H-Y antibodies isrecommended to maintain the viability of bovine embryos, however PCR method will bechoice of method for the accuracy of embryo sexing and that the conception rate will beincreased when the conditions of biopsy and culture conditions after biopsy are improvedfor PCR method.Therefore, when PCR method for sex determination of bovine embryos isdistributed to the relevant organizations for bovine embryo transfer and the techique iswell established, this method will greatly contribute to animal industry by increasing thefarmers' strongly income as the farmers want the sexed offspring for their efficientfarming.

목차 Contents

• 본 문...7
• 1) 서론...7
• 2) 재료 및 방법...9
• 3) 결과...24
• 4) 고찰...43
• 5) 결론...52
• 6) Legends for Figures...55
• 7) 참고문헌...72
• 기타...78
• 1) 연구수행관련 논문발표 목록서...78
• 2) 자체평가서...81