초록 ▼

유전자치료는 난치성 유전질환, 암 에에즈 및 당뇨병 등 일반질환의 치료까지 그 잠재력이 막대하나 예기치 못한 부작용을 초래할수 있으므로 임상투여 이전에 이들의 특성이 철저하게 규명되어야 하고 , 최종제제뿐만 아니라 제조과정 중에서 품질관리와 품질시험이 수행되어야한다. 최근 우리나레서도 유전자치료에 대한 여구가 활발히 이루어짐에 따라 유전자치료제에 개발자들이 참조할수 있는 유전자치료제의 품질관리 및 평가를 위한 지침 마련과 적절한 품질평가 시험방법의 수립이 시급하게 요구되어, 본 연구에서는 "유전자치료제의 품질평가 지침(안) 작성"과

유전자치료는 난치성 유전질환, 암 에에즈 및 당뇨병 등 일반질환의 치료까지 그 잠재력이 막대하나 예기치 못한 부작용을 초래할수 있으므로 임상투여 이전에 이들의 특성이 철저하게 규명되어야 하고 , 최종제제뿐만 아니라 제조과정 중에서 품질관리와 품질시험이 수행되어야한다. 최근 우리나레서도 유전자치료에 대한 여구가 활발히 이루어짐에 따라 유전자치료제에 개발자들이 참조할수 있는 유전자치료제의 품질관리 및 평가를 위한 지침 마련과 적절한 품질평가 시험방법의 수립이 시급하게 요구되어, 본 연구에서는 "유전자치료제의 품질평가 지침(안) 작성"과 유전자치료제의 품질평가를 위한 시험방법을 연구하도자 하였다. 유전자치료가 활발히 이루어지고 있는 미국, 유럽, 일본 등의 선진국의 관련 지침 및 관련 자료들을 수집, 검토, 비교하여 유전자 도입된 체세포 , 바이러스 벡터, 플라스미드 벡터드의 비바이러스 벡터 유전자료제에 적용되는 기준 및 시험방법을 설정하고, "유전자치료제의 품질평가 지침(안)"을 작성하였다. 또한 유전자치료제의 품질관리 및 품질평가를 위하여 수행되어야 하는 적절한 시험방법을 수립하기 위하여, 선진국의 공정서, WHO, ICH등에서 권장하고 있는 시험방법들에 대하여 양성 대조군 및 음성 대조군을 사용하여 품질시험을 수행하였다. 세균 및 진균을 측정하는 무균시험, 마이코폴라스마 부정시험, 레트로바이러스 측정을 위한 extended XC-plaque 시험, 외래서 바이러스 시험으로 일상적으로 수행된는 in vitro 및 in vivo시험, 세포의 종을 확인하기 위한 동종효소(isozyme)시험을 수행하였다. 특히 레트로바이러스 벡터의 품질평가에서 문제가 되고 있는 복제가능 바이러스(RCR)시험을 Mus dunni 세포에서 증폭 후 PG4S+L-focus 형성시험으로 측정하였고, 아데노바이러스 벡터에 대해서는 아데노바이러스 역가시험 및 복제가능 아데노바이러스(RCA) 시험을 수행하였다.유전자치료는 첨단과학기술이 요구되기 때문에 평가기관에서도 아직 과학적 이론에 근거하면서도 우리나라 실정에 맞는 평가기준 및 시험방법 습득이 미흡한 상태로 이상의 연구는 평가기관의 유전자치료제 품질평가 기반기술 구축 및 유전자치료제 개발자에 도움을 주어 유전자치료제 개발을 앞당기는 데 기여할 것이다.

Abstract ▼

Gene therapy has an enormous potential for the treatment of fatal hereditary diseases, cancers, AIDS, as well as ordinary diseases such as diabetes. However, gene therapy products should be completely characterized and assessed before administration because of the unexpected adverse effects. The fin

Gene therapy has an enormous potential for the treatment of fatal hereditary diseases, cancers, AIDS, as well as ordinary diseases such as diabetes. However, gene therapy products should be completely characterized and assessed before administration because of the unexpected adverse effects. The final gene therapy product to be administered, as well as the production process and materials used, should be subjected to quality control testing. It becomes necessary to developed the guidance for the quality control and assessment of gene therapy products to support the investigators of gene therapy products as the research on the gene therapy grows rapidly in our country." Draft guidance for the assessment of quality of gene therapy products" which covers the genetically modified somatic cells and viral and non-viral vectors, was prepared by studying the related guidelines of developed countries such as America, Europe and Japan.In order to establish the appropriate test methods of quality control, quality control testings were performed using positive and negative controls with the test methods recommended by the monographs of developed countries, WHO and ICH. These include sterility test for bacteria and fungi, test for mycoplasma, extended XC-plaque assay for retrovirus, in vitro and in vivo tests for adventitious viruses, and isozyme test for cell identity. Especially, test for replication competent retrovirus was performed be PG4 S+L-focus forming assay after amplification on Mus cells. For adenoviral vector and test for replication competent adenovirus were performed. Specifications and test methods for gene therapy products are not yet established in our regulatory authority due to the requirement of high biotechnology and latest information to assess the quality of gene therapy products. The results of this study will support the regulatory authority to establish the basis for quality assessment and investigators to control the quality of gene therapy products, contributing to accelerating the development of gene therapy products.

목차 Contents

• 총괄연구개발과제 연구결과 ... 7
• 1. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 7
• 2. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 결과 ... 10
• 3. 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 10
• 4. 총괄연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 13
• 5. 총괄연구개발과제의 활용계획 ... 13
• 제1부연구개발과제 연구결과 ... 14
• 1. 제1부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 15
• 2. 제1부연구개발과제이 연구대상 및 방법 ... 16
• 3. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ... 18
• (1) 유전자치료제의 품질평가 지침(안) ... 18
• (2) 유전자치료제의 품질관리 시험 ... 29
• 1. 외래성 바이러스 부정시험 ... 29
• 2. 무균시험(?) ... 39
• 3. 마이코플라스마(Mycoplasma) 부정시험(?) ... 41
• 4. 동종효소 분석법(?) ... 51
• 5. 레트로바이러스 시험 ... 54
• 가. Extended XC plaque assay(?) ... 54
• 나. PG-4 S+L- focus forming assay(?) ... 58
• (3) 사람 체세포치료 및 유전자치료에 대한 FDA 지침 ... 65
• (4) 레트로바이러스 벡터를 기본으로 하는 유전자치료제 및 레트로바이러스 벡터를 사용하는 임상환자의 환자 추적조사에서 복제 가능 레트로바이러스 시험에 대한 추가지침 ... 86
• (5) EMEA 유전자치료제의 품질, 전임상 및 임상적 측면에 관한 지침 ... 95
• (6) EMEA 유전자 변형된 체세포 및 벡터의 생산에서 유전자치료제의 품질 측면 ... 130
• (7) EMEA 유전자치료제의 안전성 연구 ... 140
• (8) 일본 후생성 유전자치료용 의약품의 품질 및 안전성 확보에 관한 지침 ... 148
• (9) Guidance for Human Somatic Cell Therapy and Gene Therapy ... 170
• (10) Supplemental Guidance on Testing for Replication Competent Retrovirus in Retroviral Vector Based Gene Therapy Products and During Follow-up of Patients in Clinical Trials Using Retroviral Vectors ... 197
• (11) Note for Guidance on the Quality, Preclinical and Clinical Aspects of Gene Transfer Medicinal Products ... 210
• (12) Gene Therapy Quality Aspects in the Production of Vectors and Genetically Modified Somatic Cells ... 243
• (13) Safety Studies for Gene Therapy Products ... 252
• (14) 유전자 치료용 의약품の품질급び안전성の보호に관すろ지침ついて(통지) ... 260
• 4. 제1세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 275
• 5. 제1세부연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 277
• 6. 제1세부연구개발과제의 활용계획 ... 277
• 7. 참고문헌 ... 278
• 제2세부연구개발과제 연구결과 ... 281
• 1. 제2세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 282
• 2. 제2세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 283
• 3. 제2세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 283
• 4. 제2세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 287
• 5. 제2세부연구개발과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 288
• 6. 제2세부연구개발과제의 활용계획 ... 288
• 7. 참고문헌 ... 289