초록 ▼

CE를 이용한 peptide분석에 있어서 이들의 분석능력이 peptide의 성질과 관련이 있는지를 알아보는 첫 시도로서 peptide의 친수도와 분석능과의 관계를 알아본다. 이를 위하여 다양한 hydrophobicity를 갖는 peptide를 선택하여 이들의 peak pattern과 이동 속도를 비교하여 hydrophobicity의 변화가 이동속도나 peak의 회복에 영향을 미치는지를 조사한다. 또한 electrolyte의 종류를 바꾸어서 실험을 하여 봄으로써 분석을 위한 최적의 조건을 확립한다.다양한 신호마다 분비되는 neurop

CE를 이용한 peptide분석에 있어서 이들의 분석능력이 peptide의 성질과 관련이 있는지를 알아보는 첫 시도로서 peptide의 친수도와 분석능과의 관계를 알아본다. 이를 위하여 다양한 hydrophobicity를 갖는 peptide를 선택하여 이들의 peak pattern과 이동 속도를 비교하여 hydrophobicity의 변화가 이동속도나 peak의 회복에 영향을 미치는지를 조사한다. 또한 electrolyte의 종류를 바꾸어서 실험을 하여 봄으로써 분석을 위한 최적의 조건을 확립한다.다양한 신호마다 분비되는 neuropeptide의 양과 종류가 다양한 것으로 알려져 있는데 이들은 매우 소량만이 분비되므로 측정이 꽤 어렵다. CE를 이용하면 nmole단위의 시료를 분석할 수 있으므로 CE를 이용한 이들 neuropeptide의 분석법을 확립함은 의미있는 일이다. 이를 위하여 electrolyte의 종류를 변화시켜 가면서 5가지 neuropeptide의 분석조건을 확립한다.아미노산 분석을 위한 단백질 가수분해 방법은 여러가지가 있으며 6N hydrochloric acid를 이용한 방법을 가장 많이 쓰고 있다. 본 센터에서는 이 방법과 vapor-phase hydrolysis를 혼합한 방법을 응용하여 Edman에 의해 개발된 PITC chemistry를 써서 분석하고 있다. 본 과제에서는 산가수분해율을 비롯한 전처리 과정에서의 효율치를 standard 유리아미노산과 sequence를 알고 있는 합성 펩타이드를 시료로 하여 측정하고 아미노산 조성분석의 정량적 분석결과치를 보정하는데 이용하여 현 분석법을 보완하고, 현재 실시하지 못하고 있는 부분정제된 단백질 및 펩타이드의 아미노산 조성분석을 위하여 PVDF membrane에 blot되어 있는 상태나 그로부터 elution한 상태의 시료에서 아미노산 조성 분석을 하는 방법을 본 실험실에 확립하고자 하였다.

Abstract ▼

Moderate hydrophilic peptides are represented good yield in capillary electrophoreis, but if the peptides are more hydrophilic, the yield of chromatogram is very low. In case that we added NaCI as positive charded ion to prevent the absorption of negative charged peptide in the inner surface of the

Moderate hydrophilic peptides are represented good yield in capillary electrophoreis, but if the peptides are more hydrophilic, the yield of chromatogram is very low. In case that we added NaCI as positive charded ion to prevent the absorption of negative charged peptide in the inner surface of the capillary, the recovery of peptide is increased. The 5 kinds of neuropeptise, des-Tyr-r-endorphin, N-acetyl-β-endorphin, β-endorphin, r-endorphin, Arg-vasopressin are separated nicely in capillary electrophoresis using citric acid plus sodium chloride as electrolyte.Amino acid analysis is very useful tool in protein chemistry. Since determination of amino acid composition is one of the first steps in understanding the structure of a protein molecule, accurate and quantitative amino acid analysis at a microscale level is of great importance. There are many procedures for the hydrolysis of proteins for amino acid analysis.Our laboratory performs the most classical method, hydrolysis with 6N constant-boiling hydrochloric acid at 110℃ for 24hours. As some amino acids are damaged under the conditions of hydrolysis, the hydrolysate is not suitable for total amino acid analysis. Therefore tryptophane was measured by a method that involves 4N methanesulfonic acid.Here we attempt to study the nature of the alterations brought about by chemical treatment of a peptide and examine the accuracy of our methods in amino acid composition analysis.

목차 Contents

• 제1장 서론...15
• 제2장 실험재료 및 방법...17
• 제3장 결과 및 고찰...21
• 제1절 합성 peptide의 CE 분석...21
• 제2절 neuropeptide의 분석방법 정립...22
• 제3절 vapor-phase 6N HCL 가수분해법에 의한 아미노산 조성 분석법의 검증...86
• 제4절 부분 정제된 시료의 아미노산 조성분석...90
• References...101