초록 ▼

${\bigcirc}$ 1998년 인체 락토페린 게놈 유전자가 삽입된 형질전환생쥐에서 인체 락토페린이 대량생산(리터당 6.6 g 수준)됨으로써, 형질전환동물에서의 인체락토페린 대량생산 가능성을 확인함 (특허등록: 국내특허 제0281303).
${\bigcirc}$ 자손의 형질전환젖소를 확보하기 위하여 보람이 정액으로 인공수정을 실시하였으며 3 마리의 형질전환송아지 (암컷 2, 수컷 1)를 생산하였음 (1999).
${\bigcirc}$ 체세포 복제기술에 의한 국내

${\bigcirc}$ 1998년 인체 락토페린 게놈 유전자가 삽입된 형질전환생쥐에서 인체 락토페린이 대량생산(리터당 6.6 g 수준)됨으로써, 형질전환동물에서의 인체락토페린 대량생산 가능성을 확인함 (특허등록: 국내특허 제0281303).
${\bigcirc}$ 자손의 형질전환젖소를 확보하기 위하여 보람이 정액으로 인공수정을 실시하였으며 3 마리의 형질전환송아지 (암컷 2, 수컷 1)를 생산하였음 (1999).
${\bigcirc}$ 체세포 복제기술에 의한 국내 최초 형질전환복제송아지를 생산하였음 (1999년 12월).
${\bigcirc}$ 보람이 자손의 우유 중으로 인체 락토페린이 리터 당 4∼10㎎ 수준으로 생산되고 있음을 확인하였음 (2000년 10월).
${\bigcirc}$ 형질전환젖소에서 생산된 우유로부터 인체 락토페린을 순수 분리정제하였으며, 정제된 인체 락토페린은 항균활성이 있는 것으로 확인됨 (2002년 7월).
${\bigcirc}$ 이상과 같이 본 연구를 통하여 인체 락토페린 유전자의 클로닝, 유선조직 특이적 발현벡터의 제작, 체외수정란의 생산시스템 구축, 발현벡터의 수정란내 도입 및 체외배양, 수정란 이식, 형질전환젖소의 개발, 형질전환젖소의 우유 중으로 인체 락토페린의 생산, 형질전환우유에서 인체 락토페린의 순수 분리정제 및 항균 활성 검증 등 일련의 모든 공정에 기반기술을 성공적으로 확립하였음.

Abstract ▼

1. Selection of transgenic embryos after artificial insemination with ‘BORAM’ sperm for mass production of its progeny
- Artificial insemination for production of the first generation (B107. B109) of the BOLAM
- Artificial insemination for production of the second generation of BOLAM
- Veri

1. Selection of transgenic embryos after artificial insemination with ‘BORAM’ sperm for mass production of its progeny
- Artificial insemination for production of the first generation (B107. B109) of the BOLAM
- Artificial insemination for production of the second generation of BOLAM
- Verification of lactoferrin expression
- Artificial insemination for the third generation of BOLAM’s progeny
- Management of transgenic founder and its derived new-born claves
2. Production of cloned calves by somatic cell nuclear transfer
- Nuclear transfer for cloning BOLAM
- Mass production of cloned embryos with somatic nuclei carrying human lactoferrin gene
- Transfer of bovine cloned embryos to recipients
3. Posterity verification of transgenic mice producing human lactoferrin
- Transmission rate of pBGL2 transgene between successive generations in the transgenic mice
- Constant expression of human proteins in the milk of transgenic mice
4. Establishment of method for separation and purification of human lactoferrin
- Purification of human lactoferrin from transgenic milk
- Examination of hLF activity purified from transgenic milk
5. Results and Discussion
Major achievements during the last four years are followings.

목차 Contents

• 제 1 장 서론 ... 20
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 30
• 제 1 절 외국의 경우 ... 30
• 제 2 절 국내의 경우 ... 37
• 제 3 장 연구개발 수행 내용 및 결과 ... 40
• 제 1 절 보람 자손의 대량증식을 위한 인공수정, 선별 및 검정 ... 40
• 가. 제 1세대 형질전환 젖소의 번식을 위한 인공수정 ... 41
• 나. 제 2세대 형질전환 젖소의 번식을 위한 인공수정 ... 43
• 다. 제 3세대 형질전환 젖소의 번식을 위한 인공수정 ... 49
• 제 2 절 체세포 핵치환을 통한 복제 젖소 생산 ... 51
• 가. 보람의 복제를 위한 체세포 핵치환 ... 51
• 나. 인체 락토페린 유전자가 도입된 체세포를 이용한 복제 수정란 생산 ... 55
• 다. 복제 수정란의 이식 ... 64
• 제 3 절 인체 락토페린을 생산하는 형질전환 생쥐의 후대검정 ... 67
• 가. pBGL2 유전자가 삽입된 형질전환 생쥐의 후대검정 ... 72
• 나. 형질전환 생쥐의 유즙으로 인체 lactoferrin의 지속적인 생산 ... 76
• 제 4 절 락토페린의 정제 ... 79
• 가. 보람의 유즙으로부터 락토페린의 분리·정제 ... 81
• 나. 인체 락토페린의 분리·정제 기술 확립 ... 83
• 제 4 장 연구개발 목표의 달성도 및 대외 기여도 ... 88
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 90
• 제 6 장 참고문헌 ... 94
• 위탁과제 Ⅰ ... 130
• 위탁과제 Ⅱ ... 188