초록 ▼

본 연구에서는 tyrosinase의 효소 활성을 억제하는 기능이 있는 미백 물질의 효과를 평가하기 위한 in vitro dopa 자동산화 시험법을 확립하기 위하여 human tyrosinase를 발현·정제하였으며, 효소의 활성 측정에 사용되는 도파크롬의 생성량 측정을 위한 제반 시험 조건을 검토하여 기능성 시험법의 표준 프로토콜을 확립하였다. 특히 본 연구에서는 억제 활성 검색에 사용하는 효소로 mushroom tyrosinase와 human tyrosinase를 사용하여 억제활성을 조사하고 비교·검토함으로써 유력한 시험법을 확립하

본 연구에서는 tyrosinase의 효소 활성을 억제하는 기능이 있는 미백 물질의 효과를 평가하기 위한 in vitro dopa 자동산화 시험법을 확립하기 위하여 human tyrosinase를 발현·정제하였으며, 효소의 활성 측정에 사용되는 도파크롬의 생성량 측정을 위한 제반 시험 조건을 검토하여 기능성 시험법의 표준 프로토콜을 확립하였다. 특히 본 연구에서는 억제 활성 검색에 사용하는 효소로 mushroom tyrosinase와 human tyrosinase를 사용하여 억제활성을 조사하고 비교·검토함으로써 유력한 시험법을 확립하였다.

Abstract ▼

Most women want to have whiter skin. To satisfy this desire many cosmetic companies have been developing whitening cosmetics. Until now, there is no method to evaluate whitening cosmetics with a view to their inhibitory activity on tyrosinase and dopa autooxidation, especially in our country. The ai

Most women want to have whiter skin. To satisfy this desire many cosmetic companies have been developing whitening cosmetics. Until now, there is no method to evaluate whitening cosmetics with a view to their inhibitory activity on tyrosinase and dopa autooxidation, especially in our country. The aim of this study was to develope the method of the functional test of the skin whitening cosmetics using in vitro dopa autooxidation test.
Tyrosinase (EC 1.14.18.1) is a copper-containing metalloprotein that is responsible for the biosynthesis of melanins. For above mentioned our purpose, we constructed an expression plasmid, pET-hTyr, containing the entire coding sequence except the signal sequence of a human tyrosinase and over-expressed in Escherichia coli. The expressed enzyme was purified by DEAE-Sephacel and immobilized metal column chromatography. The enzyme retained its catalytic function with both hydroxylation activity and oxidation activity.

목차 Contents

• 표지 ...1
• 최종보고서 ...3
• 제출문 ...6
• 요약문 ...7
• SUMMARY ...9
• 제1장 서론 ...10
• 제2장 국내.외 기술개발 현황 ...11
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ...13
• 1절. 제조합 Human tyrosinase의 발현계 작성과 대량발현 및 정제 ...13
• 2절. Dopa oxidase 활성 측정 조건의 검토 ...19
• 3절. 시험대상 물질의 dopa oxidase 활성에 미치는 영향 ...26
• 4절. 평가방법의 Validation과 기능성 시험법의 표준 프로토콜 확립 ...36
• 제4장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도 ...37
• 제5장 연구개발결과의 활용성과 및 계획 ...38
• 가. 계량적 성과 ...38
• 나. 성관내용기술 ...38
• 다. 활용계획 ...38
• 제6장 기타 중요변경사항 ...38
• 제7장 참고문헌 ...39
• 연구과제 요약서 ...41