초록 ▼

연구목적
○국내 항생제 내성 연구 표준화를 위한 시험법 확립
○식품ㆍ환경 분야 및 임상ㆍ의약 분야 연구결과 연계성 및 해석을 위한 표준시험법 필요
연구내용 및 범위
○1차년도 항생제 내성률 모니터링 결과를 토대로 조사대상 항생제 및 내성균 세부선정
○검체ㆍ균주별 세균 분리ㆍ동정법과 내성균 시험법 확립
○내성 경향 및 전파경로 조사법 확립
○제외국의 항생제 내성균 검사방법 및 표준화 방법 연구
기대효과 및 활용분야
○부처간 표준화 및 일원화된 항생제 내성균 시험방법을 확립하여 분야간 내

연구목적
○국내 항생제 내성 연구 표준화를 위한 시험법 확립
○식품ㆍ환경 분야 및 임상ㆍ의약 분야 연구결과 연계성 및 해석을 위한 표준시험법 필요
연구내용 및 범위
○1차년도 항생제 내성률 모니터링 결과를 토대로 조사대상 항생제 및 내성균 세부선정
○검체ㆍ균주별 세균 분리ㆍ동정법과 내성균 시험법 확립
○내성 경향 및 전파경로 조사법 확립
○제외국의 항생제 내성균 검사방법 및 표준화 방법 연구
기대효과 및 활용분야
○부처간 표준화 및 일원화된 항생제 내성균 시험방법을 확립하여 분야간 내성률의 경향 및 전파경로 해석이 가능하도록 체계화 수립
○최신 검사법 도입 (NCCLS, ISO, 논문) 및 보급을 통한 효율적 연구 수행
○수립된 방법은 국제표준으로 제시 (ISO TC212 : susceptibility testing, ISO TC34 SC9: food Product, food microbioloy)

Abstract ▼

Purpose
○ Standardization of methods for antimicrobial resistance surveillance in Korea
○ Harmonization of testing methods for antimicrobial resistance In clinical environment, agriculture, foods, and environment, fishery and foods
Research Area
○ Determine the species and antimicrobial

Purpose
○ Standardization of methods for antimicrobial resistance surveillance in Korea
○ Harmonization of testing methods for antimicrobial resistance In clinical environment, agriculture, foods, and environment, fishery and foods
Research Area
○ Determine the species and antimicrobial agents to be used for the surveillance
○ Harmonize the methods for the isolation, identification, and antimicrobial susceptibility testing
○ Determine the techniques to study the epidemiology of antimicrobial resistance
○ Study the methods used In other countries and standardized document of international organizations
Expected effect in the future
○ Set up the surveillance system for antimicrobial resistance based on the harmonization among various Government ministries
○ Provide the international documents for antimicrobial resistance study to researchers in related fields
○ Submit the methods to the international organizations (ISO TC212: susceptibility testing, ISO TC34 SC9: food product, food microbiology)

목차 Contents

• 표지 ...1
• 용역연구개발사업 연구결과보고서 ...2
• 제출문 ...3
• 연구결과보고서 요약문 ...4
• Project Summary ...5
• 목차 ...6
• 제 1 장 서론...7
• 가. 연구의 필요성 ...7
• 나. 연구의 목적 ...8
• 제 2 장 국내ㆍ외 기술개발 현황...9
• 제 3 장 연구개발 수행 내용 및 결과...12
• 목차 ...13
• 1. 용어의 정의 ...18
• 2. 국가 항생제 안전 사용 관리 사업의 대상 세균과 항생제 ...20
• 3. 검체수집시 고려사항 ...25
• 3.1 검제수집장소 ...25
• 3.2 검체 수(sample size) ...25
• 3.3 검체대상(sample source) ...25
• 3.4 검체종류 ...26
• 4. 세균의 분리 및 동정법 ...26
• 4.1 Aeromonas ...26
• 4.2 Bacillus cereus ...26
• 4.3 Campylobacter ...27
• 4.4 Clostridium perfringens ...40
• 4.5 장알균(Enterococci) ...40
• 4.6 Escherichia coli ...42
• 4.7 Diarrheagenic Escherichia coli ...46
• 4.8 Listeria ...51
• 4.9 Salmonella ...54
• 4.10 Shigella ...60
• 4.11 황색포도알균(Staphylococcus aureus) ...64
• 4.12 Vibrio ...67
• 4.13 Vibrio parahaemolyticus ...69
• 4.14 Yersinia enterocolitica 와 Yersinia pseudotuberculosis ...74
• 부록 I 배지조성 ...82
• 5. 항균제 디스크 감수성 검사의 표준실시 방법 ...123
• 5.1 서론 ...123
• 5.2 감수성 검사 실시에 있어서 고려사항들 ...123
• 5.3 통상검사와 결과보고를 위한 항균제 디스크의 선택 ...124
• 5.3.1 검사결과의 보고 ...124
• 5.3.2 항균제의 일반명 ...124
• 5.3.3 선택지침 ...126
• 5.3.4 통상적인 항균제 검사 및 선택적인 항균제 검사의 보고 지침 ...126
• 5.4 디스크 확산 검사에 필요한 시약 ...127
• 5.4.1 Mueller-Hinton 우무배지 ...127
• 5.4.2 항균제 디스크의 보관 ...129
• 5.4.3 접종을 위한 혼탁도 기준 ...129
• 5.5 접종액의 준비 ...130
• 5.5.1 배양 방법 ...130
• 5.5.2 집락의 직접 부유법 ...130
• 5.5.3 우무배지에 균의 접종 ...130
• 5.5.4 균이 접종된 우무평판배지에 디스크 놓기 ...131
• 5.6 평판배지의 판독 및 결과해석 ...131
• 5.7 배양이 까다롭거나 문재시 되는 세균 ...132
• 5.7.1 Haemophilus 균종 ...132
• 5.7.2 Neisseria gonorrhoeae ...133
• 5.7.3 Streptococcus pneumoniae 균과 그 외의 Streptococcus 균종 ...134
• 5.7.4 내성 포도알균의 검색 ...135
• 5.7.5 내성 Enterococcus의 검색 ...136
• 5.7.6 광범위 β-Lactamase를 산생하는 그람음성 세균의 검색 ...137
• 5.8 β-plactamase 검사 ...137
• 5.8.1 목적 ...137
• 5.8.2 β-lactamase 검사의 선택 ...137
• 5.9 디스크 확산법 결과의 해석 ...138
• 5.9.1 억제대 해석의 기준 ...138
• 5.9.2 해석의 범주 ...138
• 5.10 정도관리 절차 ...139
• 5.10.1 목적 ...139
• 5.10.2 정도관리를 위한 참조균주 ...139
• 5.10.3 정도관리 균주의 보존 ...140
• 5.10.4 억제대의 정도관리 ...140
• 5.11 디스크 확산법의 한계점 ...143
• 5.11.1 여러 가지 균종에 따른 적용 ...143
• 5.11.2 잘못된 결과들 ...143
• 5.11.3 내성의 출현 ...143
• 5.11.4 정도 관리 확인의 방법 ...143
• 부록 II 디스크 확산법 해석기준 ...145
• 6. 산소성 세균 (Aerobic bacteria)의 항균제 감수성 검사-희석법 ...205
• 6.1 개요 ...205
• 6.1.1 범위 ...205
• 6.1.2 개념 ...205
• 6.2 항균제 감수성 검사 수행을 위한 주의사항 ...206
• 6.3 항균제 ...207
• 6.3.1 구입과 보관 ...207
• 6.3.2 항균제 분말의 계량 ...207
• 6.3.3 항균제 보존용액 준비 ...209
• 6.3.4 검사하고자 하는 항균제 농도의 수 ...209
• 6.4 통상적인 검사와 보고를 위한 항균제의 선택 ...207
• 6.4.1 검사 결과의 보고 ...210
• 6.4.2 항균제의 일반명 ...210
• 6.4.3 항균제 선택의 지침 ...213
• 6.4.4 통상적인 항균제 검사 및 선택적인 항균제 검사의 보고를 위한 지침 ...213
• 6.5 정도관리 절차 ...214
• 6.5.1 목적 ...214
• 6.5.2 정도관리를 위한 참고균주 ...214
• 6.5.3 정도관리 균주의 보존 ...215
• 6.6 항균제 희석법(Broth dilution)을 위한 접종액 준비 ...216
• 6.6.1 접종액 준비를 위한 표준 혼탁도 ...216
• 6.6.2 배양법 ...216
• 6.6.3 집락의 직접 부유법 ...217
• 6.7 우무희석법 ...217
• 6.7.1 시약과 검체 ...217
• 6.7.2 우무희석평판의 준비 ...218
• 6.7.3 균 접종 준비 ...219
• 6.7.4 우무 희석평판배지에 균의 접종 ...220
• 6.7.5 우무배지의 배양 ...220
• 6.7.6 우무희석법에서 종결점(end-point)의 결정 ...221
• 6.8 액체배지 희석 과정(시험관희석법과 미량희석법) ...221
• 6.8.1 Muller-Hinton 액체배지 ...221
• 6.8.2 희석된 항균제의 준비와 보관 ...223
• 6.8.3 액체배지 희석 검사 ...224
• 6.9 배양하기 까다로운 균들 ...225
• 6.9.1 헤모필루스 균종(Haemophilus spp.) ...226
• 6.9.2 임균(Neisseria gonorrhoeae) ...227
• 6.9.3 폐렴사슬알균 (Streptococcus pneumoniae)과 기타 사슬알균 (Streptococcus spp.) ...228
• 6.10 내성이 문제가 되는 균종들 ...229
• 6.10.1 포도알균(Staphylococci) ...229
• 6.10.2 장알균(Enterococci) ...231
• 6.10.3 광범위 β-lactamase (ESBL) 산생 그람음성 막대균 ...232
• 6.11 β-Lactamase 검사 ...233
• 6.11.1 검사목적 ...233
• 6.11.2 β-Lactamase 검사 방법의 종류 선택 ...233
• 6.12 MIC 결과의 보고 ...234
• 6.12.1 감수성 ...234
• 6.12.2 중등도 내성 ...234
• 6.12.3 내성 ...234
• 6.13 정도관리 절차 ...234
• 6.13.1 목적 ...234
• 6.13.2 정도관리 책임능력들 ...235
• 6.13.3 정도관리를 위한 참조균주 ...235
• 6.13.4 정도관리 균주의 보존 ...237
• 6.13.5 배치 또는 로트(lot)의 정도관리 ...238
• 6.13.6 MIC 정도관리 한계 ...239
• 6.13.7 정도관리 검사의 빈도 ...239
• 6.13.8 선별검사를 위한 정도관리 검사의 빈도 ...240
• 6.13.9 교정조치 ...240
• 6.13.10 정도관리 검사가 범위를 벗어났을 때의 환자에 대한 결과 보고 ...242
• 6.13.11 환자 결과의 검증 ...242
• 6.13.12 다른 관리 과정들 ...243
• 6.14 희석검사 방법의 한계 ...243
• 6.14.1 다양한 세균 군에 대한 적응 ...243
• 6.14.2 잘못된 결과 ...244
• 6.14.3 내성의 출현 ...244
• 6.15 선별 검사 ...244
• 부록 III 산소성 세균의 희석법에 의한 MIC 해석 기준 ...245
• 7. 항생제 내성 경향 및 전파경로 조사법 확립 ...310
• 7.1 Plasmid Profile 분석법 ...310
• 7.1.1 Plasmid DNA의 분리 ...310
• 7.2 Plasmid DNA의 전기영동 ...313
• 7.3 PCR(Polymerase Chain Reaction)에 근거한 방법 ...314
• 7.3.1 RAPD(Randomly Amplified Polymorphic DNA) 분석법 ...314
• 7.3.2 REP-PCR (Repetitive Extragenic Palindrome-PCR) ...317
• 7.4 Ribotyping ...318
• 7.5 Pulsed-Field Gel Electrophoresis (PFGE) ...320
• 7.5.1 PFGE의 방법 ...320
• 7.5.2 PFGE용 각종 buffer들 ...325
• 7.6 Multilocus Sequence Typing(mLST) ...326
• 7.6.1 황색포도알균(Staphylococcus aureus) ...327
• 7.6.2 Neisseeria meningitidis ...329
• 8. 결과의 보고 및 보관 ...332
• 9. 외국의 표준화된 방법 자료들 ...333
• 10. 기타 참고문헌 ...341
• 제 4 장 연구개발 목표 달성도 및 대외기여도...345
• 제 5 장 연구개발결과의 활용성과 및 계획...346
• 가. 계량적 성과 ...346
• 나. 성과내용기술 ...346
• 다. 활용계획 ...346
• 제 6 장 기타 중요 변경사항...347
• 참고문헌...348
• 총괄 연구과제 요약...351