초록 ▼

본 과제의 목표는 HSV 벡터의 세포전달 관련기전과 항체제작기술을 접목시켜 암 특이적 전달이 가능한 바이러스 벡터를 제작하고자 함. 이를 위해 바이러스의 숙주세포 감염기작에 관여하는 HSV 표면단백질과 암세포 리셉터의 항체절편을 이용한 Bi-specific adapter 제작을 통한 새로운 암세포 특이적 유전자전달 가능성을 제시하고, 궁극적으로 oncolytic HSV를 이용한 새로운 암 특이적 항암유전자 치료기술을 개발하고자 함.
HSV 벡터를 이용한 암 특이적 표적화를 다음과 같이 연구함.
- 재조합 HSV glyco

본 과제의 목표는 HSV 벡터의 세포전달 관련기전과 항체제작기술을 접목시켜 암 특이적 전달이 가능한 바이러스 벡터를 제작하고자 함. 이를 위해 바이러스의 숙주세포 감염기작에 관여하는 HSV 표면단백질과 암세포 리셉터의 항체절편을 이용한 Bi-specific adapter 제작을 통한 새로운 암세포 특이적 유전자전달 가능성을 제시하고, 궁극적으로 oncolytic HSV를 이용한 새로운 암 특이적 항암유전자 치료기술을 개발하고자 함.
HSV 벡터를 이용한 암 특이적 표적화를 다음과 같이 연구함.
- 재조합 HSV glycoproteinD (gD) 리셉터에 의한 전달체 개발 : HSV 벡터를 이용한 암 표적 지향적 유전자 치료제의 개발 전단계로서 HSV gD에 바인딩하는 수용체를 재조합 단백질로 제작하고 그를 이용하여 HSV-저항성 세포주내로 HSV의 전달 가능성을 연구함. 재조합 gD 리셉터에 의해 80% 이상의 HSV-저항성 세포주내로 HSV 전달효율을 확인함
- 암세포 표적 bi-specific adapter를 이용한 HSV 전달체 개발 : 각종 암세포 표면에 특이적으로 발현되는 세포 표면 수용체인 암배아성항원(CEA)를 표적하기 위해서 암배아성항원에 결합하는 항체의 scFv을 재조합 HSV gD 리셉터에 퓨전시킨 hi-specific adapter를 제작함. 제작된 어뎁터를 이용하여 암배아성항원을 발현하는 HSV-저항성 세포주내로 HSV를 특이적으로 전달 가능케 하는 결과를 보이며 그 효율 또한 전체세포의 70~80% 정도를 차지하는 것을 확인함.
- 표적항원에 대한 scFv를 HSV GlycoproteinC (gC)에 삽입하는 표적화 허피스바이러스 제작 : bi-specific adapter의 효능을 증대시키기 위해 CEA scFv를 바이러스의 gC의 heparan sulfate 바인딩 부위에 삽입하여 표적항원에 특이적으로 결합할 수 있는 표적화 바이러스를 제작
암 특이적 HSV 전달물질의 개발을 통해 다른 종류의 암 특이적 표면물질에 대한 어뎁터의 개발로 향후 HSV retargeting 응용 가능성 시사함.

Abstract ▼

To determine whether the gD-binding region of HveA/HVEM is sufficient for HSV infection, we constructed a set of truncated, soluble forms of the receptor and examined the effects of these molecules on virus entry into resistant CHO-K1 cells and susceptible derivatives. To redirect the tropism of HSV

To determine whether the gD-binding region of HveA/HVEM is sufficient for HSV infection, we constructed a set of truncated, soluble forms of the receptor and examined the effects of these molecules on virus entry into resistant CHO-K1 cells and susceptible derivatives. To redirect the tropism of HSV, we also have generated a soluble bi-specific adapter protein comprising the gD-binding domain of HveA fused to a single-chain antibody recognizing the human CEA. And we have demonstrated that an adapter protein enabled HSV entry into gD-receptor-deficient cells expressing the CEA. HSV was engineered to encode different chimeric proteins composed of truncated forms of gC and CEA scFv.

목차 Contents

• 표지...1
• 제출문...2
• 보고서 초록...3
• 요약문...4
• SUMMARY...7
• 목차...11
• 제 1 장 연구개발과제의 개요...12
• 제 1 절 연구개발의 목적...12
• 제 2 절 연구개발의 필요성...12
• 제 3 절 연구개발의 범위...13
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황...14
• 제 1 절 국외 기술개발현황...14
• 제 2 절 국내 기술개발현황...15
• 제 3 절 연구결과가 국내ㆍ외 기술개발현황에서 차지하는 위치...16
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과...17
• 제 1 절 연구내용...17
• 제 2 절 연구결과...18
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...28
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획...29
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...30
• 제 7 장 참고문헌...31