초록 ▼

- FADD-DED에 의하여 유도되는 대장균 사멸 시 이와 함께 변화되는 단백질체를 분석함으로써 대장균의 사멸과 관련된 단백질을 찾고 이를 항생제 표적으로 발굴하고자 함.
- 2D gel electrophoresis 및 mass 분석을 통하여 동정된 단백질 중 사멸을 유도하지 않는 mutant FADD-DED와 WT를 비교하여 발현이 유도되기 전 발현 량은 유사하나 유도에 의하여 변화의 차이가 큰 단백질 151종의 단백질 중 94종을 동정하였음.
- 이 중 대장균에 필수적인 단백질이라 알려지거나, 알려지지 않은 16종의

- FADD-DED에 의하여 유도되는 대장균 사멸 시 이와 함께 변화되는 단백질체를 분석함으로써 대장균의 사멸과 관련된 단백질을 찾고 이를 항생제 표적으로 발굴하고자 함.
- 2D gel electrophoresis 및 mass 분석을 통하여 동정된 단백질 중 사멸을 유도하지 않는 mutant FADD-DED와 WT를 비교하여 발현이 유도되기 전 발현 량은 유사하나 유도에 의하여 변화의 차이가 큰 단백질 151종의 단백질 중 94종을 동정하였음.
- 이 중 대장균에 필수적인 단백질이라 알려지거나, 알려지지 않은 16종의 단백질을
FADD-DED와 발현시켜 사멸방지 효과를 조사하였음.
- 발현 시 사멸을 방지하는 효과가 큰 두 단백질(histone like DNA binding protein,
H-NS; FKBP-type peptidyl prolyl isomerase, slyD)을 FADD-DED가 유도하는 i)사멸에 직접 관여하거나, ii) FADD-DED에 의하여 유도되는 물질에 영향을 주어 사멸을 저해 하는 것으로 생각함.
- H-NS를 과발현하였을 때 대장균의 성장이 저해되며, slyD를 과발현 하였을 때 성장이 촉진됨. 두 단백질의 발현을 억제하기 위하여 anti-sense RNA나 dominant negative expression 조절을 위하여 C- 또는 N-말단을 발현하였을 때 각각의 효과는 크지 않았으나 H-NS C-말단과 slyD N-말단을 동시에 발현할 시 미생물이 사멸됨을 관찰함.
- 대장균 모델의 직접적인 항생제 표적으로써의 가능성은 적은 것으로 판단됨.
- 그러나 항생제 내성을 극복하는데 기존의 항생제와 더불어 이용할 수 있는 표적으로써 연구를 진행할 필요가 있다고 생각됨.
- H-NS는 Salmonella와 같은 미생물에는 저해 시 미생물이 생존하지 못하는 것으로 보고 되어 있음.
- Membrane fraction에 FADD-DED가 존재할 시 만 미생물의 사멸을 유도하는 것을 보여 FADD-DED가 전자전달계에 영향을 주어 ROS를 생성시킬 가능성이 있음을 보여주고 있어 사멸 경로 규명 가능성이 커짐

Abstract ▼

Heavy use of antibiotics lets microbes find genetic and biochemical pathway to get resistance to antibiotics. Presently every anti-microbial agent has serious problems of drug-resistant pathogens. The purpose of this work is to discover novel targets related to bacterial apoptosis for antibiotics.

Heavy use of antibiotics lets microbes find genetic and biochemical pathway to get resistance to antibiotics. Presently every anti-microbial agent has serious problems of drug-resistant pathogens. The purpose of this work is to discover novel targets related to bacterial apoptosis for antibiotics.
- Previously we found the death effector domain of FADD (FADD-DED), a mammalian apoptosis-related protein, induces apoptosis in E. coli by increasing cellular reactive oxygen species.