초록 ▼

본 연구의 최종 목표는 한국인 당뇨병 환자들의 임상적 및 유전학적 특성에서 서구인과 다른 특성 및 병태생리를 규명하며, 한국인의 특징으로 생각되는 인슐린분비능 저하의 유전적 원인을 조사하는데 있으며 본 연구는 역학적 연구 및 유전자 변이 연구를 포함한다
1) 역학적 연구: 602명의 대상자들을 체질량지수 (Body mass index, BMI) 25 kg/m2 을 기준으로 비만 및 비비만군으로 나누어 나이, 성별, 키, 체중, 체질량지수, 혈압, 콜레스테롤, 중성지방, 고밀도콜레스테롤, 당화혈색소 등을 측정하였다. 그리고 75

본 연구의 최종 목표는 한국인 당뇨병 환자들의 임상적 및 유전학적 특성에서 서구인과 다른 특성 및 병태생리를 규명하며, 한국인의 특징으로 생각되는 인슐린분비능 저하의 유전적 원인을 조사하는데 있으며 본 연구는 역학적 연구 및 유전자 변이 연구를 포함한다
1) 역학적 연구: 602명의 대상자들을 체질량지수 (Body mass index, BMI) 25 kg/m2 을 기준으로 비만 및 비비만군으로 나누어 나이, 성별, 키, 체중, 체질량지수, 혈압, 콜레스테롤, 중성지방, 고밀도콜레스테롤, 당화혈색소 등을 측정하였다. 그리고 75g 경구 당부하검사를 시행하여 정상대조군, impaired fasting glucose (IFG), impaired glucose tolerance (IGT), IFG + IGT, diabetes mellitus (DM) 으로 나누어 Homeostasis Model Assessment (HOMA) 와 Quantitative insulin sensitivity check index (QUICKI) 방법을 이용한 인슐린 저항성 및 Insulinogenic Index 방법을 이용한 인슐린 분비능을 계산하였다. 측정하고 계산한 모든 결과를 서로 비교하고 통계를 냈다.
2) 유전자변이 연구: 300여명의 정상인과 1000명의 당뇨병환자의 유전자와 EBV를 이용하여 immortalized cell line들을 확보하였으며 Target SNP는 이들 두 유전자의 5‘ UTR과 각각의 exon 및 intron 1 에 존재하는 SNP를 Public site (NCBI, TSC, jSNP, GeneSNP)에 있는 SNP database를 바탕으로 확보하였다. 전체 156개의 SNP중 한국인 특이 SNP를 찾기 위해 300명의 정상인으로부터 얻은 DNA를 pooling한후 각각의 SNP에 대해 allelotyping을 시행하였다. Genotyping을 위한 target SNP를 찾기 위해 나이와 성별에 대해 정상인과 대조되는300명의 당뇨병 환자의 DNA를 pooling하여 다시 allelotyping을 시행하였다.
3) 화학유전학적 연구: 당뇨 관련 유전자의 발굴 연구 과정에서 p62 유전자가 당뇨와 당뇨의 원인 기전 중 하나인 비만 발생의 중요 유전인자임을 확인하여 이를 중심으로 새로운 당뇨 발병기전을 연구하고 이를 검색체계화하여 당뇨관련 표현형 변화를 유도하는 저분자 화합물을 도출하여 그들의 표적 유전자를 유추하고 또한 당뇨 치료 목적의 신약 선구물질로서의 타당성을 연구하고자 하였다.
1) 비비만군에서 IGT나 IFG로의 진행은 인슐린 저항성의 악화 및 인슐린 분비능의 감소에 의해 나타나지만 IFG + IGT로의 진행은 인슐린 분비능 장애의 악화에 기인하며 최종적인 당뇨병의 발생은 인슐린 저항성의 악화 및 인슐린 분비능의 감소때문으로 사료된다. 비비만군에서와는 달리 비만군에서 IGT나 IFG로의 진행은 인슐린 저항성의 악화 및 인슐린 분비능의 감소에 의해 나타나지만 IFG + IGT로의 진행은 인슐린 저항성의 악화에 의하며 최종적인 당뇨병의 발생은 인슐린 저항성에 대한 상대적 인슐린 분비능 감소의 악화 때문으로 사료된다.
2) 다섯 군데의 SNP sites의 유전자 다양성이 당뇨병과 관련이 있는지를 Chi-square test를 이용해 분석을 했지만 당뇨병환자와 정상대조군사이에 각각의 genotype의 빈도와 allele frequency 에는 유의한 차이를 발견할 수 없었으나 당뇨병에 관련된 유전다양성과의 관련성은 아직 genotyping이 끝나지 않은 SNP sites의 genotype의 결과와 haplotype을 얻은 이후에야 이 두 유전자의 유전다양성과 당뇨병과의 연관성에 대한 최종 결론을 내릴 수 있을 것이며 현재 이에 대한 연구가 진행중이다
3) 새로운 당뇨/비만 유발 유전자 p62를 발굴하였으며 p62 knockout mice를 제작하여 이 mice에서 당뇨/비만이 발생함을 확인하여 새로운 질병모델동물을 제시하였으며 당뇨/비만 발생기전을 밝혔으며 또한 당뇨의 근본적 원인 중 하나인 식욕조절을 위한 검색체계를 확립하였고 p62 비활성에 의한 당뇨/비만 치료제 개발을 위한 검색체계를 확립하였다. 이후 위의 검색체계를 이용하여 확립한 천연화합물 은행으로부터 효능 성분 2 종을 도출하였다.

Abstract ▼

The final goal of this study is that elucidate the clinical and genetic characteristics of korean diabetic patients and evaluate the genetic cause of decreased insulin secretory capacity. This study include epidemiologic and genetic variability study.
1) Epidemiologic study We divided 602 subject

The final goal of this study is that elucidate the clinical and genetic characteristics of korean diabetic patients and evaluate the genetic cause of decreased insulin secretory capacity. This study include epidemiologic and genetic variability study.
1) Epidemiologic study We divided 602 subjects as obese and non-obese group by body mass index criteria(25 kg/m2), and measured age, sex, height, weight, body mass index, blood pressure, total cholesterol, triglyceride, HDL, and HbA1C each other. And we carried oral glucose tolerance test, each groups were divided into a subgroup of impaired fasting glucose(IFG), impaired glucose tolerance(IGT), IFG + IGT, diabetes mellitus(DM). Then we measured insulin resistance by homeostasis model assessment(HOMA) and insulin secretory capacity by insulinogenic index. All measured and calculated data are varified by statistical analysis.
2) Genetic variability study Immotalized cell lines were available by use of 300 normal and 1000 diabetic subjects and got the target SNP in exon and intron 1 that based on public site( NCBI, TSC, jSNP, GeneSNP). To find the Korean specific SNP, allotyping was done in DNA pool of 300 normal subjects, and then to find the target SNP, allotyping was done in DNA pool of 300 diabetic subjects.
3) Chemical study We examined the p62 gene as a induced gene of diabetes and obesity, and will discover the another pathogenesis of type 2 diabetes. Then we will make the searching protocol by p62 gene inactivation, extract two natural effective substrate that are concerning to the p62 pathway.
1) In non-obese subjects, progression to the IFG or IGT and then finally, development of diabetes are due to the worsening of insulin resistance and diminution of insulin secretory capacity. In obese subjects, differ from non-obese subjects, progression to the IFG or IGT is due to the worsening of insulin resistance anddiminution of insulin secretory capacity, but development of diabetes is due to the relative diminution of insulin secretory capacity in relation to the insulin resistance.
2) There are no differences between target SNP of normal and diabetic subjects in frequency of genotype and allele. The final results postponed until obtaining the unfinished genotyping, and this study is well advanced.
3) We found the P62, the induced gene of diabetes and obesity, and also found the another pathogenesis of diabetes by p62 inactivation. We established the p62 searching protocol, then we extracted two natural effective substrate that are concerning to the
p62 pathway.

목차 Contents

• Ⅰ. 연구계획 요약문 ...3
• 1. 국문요약문 ...3
• Ⅱ. 연구결과 요약문 ...4
• 1. 국문요약문 ...4
• 2. 영문요약문 ...5
• Ⅲ. 연구내용 ...6
• 1. 서론 ...6
• 2. 연구방법 및 이론 ...14
• 3. 결과 및 고찰 ...23
• 4. 결론 ...42
• 5. 인용문헌 ...44