초록 ▼

1. Glycation 반응에 의한 LDL손상에 따른 동맥경화 발생기전.이해를 위한 기초 연구 확립.
2. 산소유리기에 의한 LDL단백질의 변성과정을 확인.
3. 상기 조건에 의한 동맥경화의 예방 억제제 개발.
1. 약용식물 16가지 32종의 추출물을 제조 후 각 추출물의 항산화활성, total flavonoid 함량, polyphenol 함량측정.
2. 32가지 추출물의 글라이케이션 억제능을 [$^14$C] N-formyl-lysine과형광광도기를 이용하여 검색.
3. 검색결과 가장

1. Glycation 반응에 의한 LDL손상에 따른 동맥경화 발생기전.이해를 위한 기초 연구 확립.
2. 산소유리기에 의한 LDL단백질의 변성과정을 확인.
3. 상기 조건에 의한 동맥경화의 예방 억제제 개발.
1. 약용식물 16가지 32종의 추출물을 제조 후 각 추출물의 항산화활성, total flavonoid 함량, polyphenol 함량측정.
2. 32가지 추출물의 글라이케이션 억제능을 [$^14$C] N-formyl-lysine과형광광도기를 이용하여 검색.
3. 검색결과 가장 활성이 우수한 차전초 메탄올 추출물을 선정.
4. 차전초 메탄올 추출물로부터 유기용매 분획, silica gel 60, Diaion HP-20 이온교환수지, Sephadex LH-20, Symmetric C18 column및 HPLC를 이용하여 글라이케이션 억제능을 가진 단일물질 정제.
5. $^1$H-NMR , $^13$C-NMR, H-H COSY, H-C HMQC, CI-MS를 이용한 구조 해석.
6. 차전초 추출물의 LDL 변성억제능 측정.
7. 차전초 추출물의 산화적 스트레스로부터 간보호 활성 측정.
8. 차전초 추출물의 안전성(유전독성) 측정.
1. 32가지 한약재 추출물을 제조후 글라이케이션 억제능을 검색한 결과 어성초 열수 추출물, 목단피 메탄올 추출물, 차전초 메탄올
추출물의 활성을 확인 후 2차 검색과정을 거쳐 차전초 메탄올 추출물을 최종 시료로 선정.
2. 차전초 메탄올 추출물로부터 글라이케이션 억제능을 가진 단일물질(purified PA-1-B-1) 정제.
3. Purified PA-1-B-1는 분자량 789이며, rhamnose를 가지는 polyphenolic glycoside 계 물질임을 확인.
4. Purified PA-1-B-1는 t-BHP(활성산소)에 의한 간손상으로부터 간보호 및 LDL의 글라이케이션 반응에의한 변성을 억제.
5. Purified PA-1-B-1는 유전독성을 일으키지 않는 안전한 물질임을 확인.

Abstract ▼

1. To Establish the basic study to clarify mechanism leading to atherosclerosis due to glycated and modified LDL.
2. To identify modified LDL proteins caused by reactive oxygenspecies.
3. To develop a bioactive agent to prevent atherosclerosis.
1. The extracts from 16 medical plant tissues

1. To Establish the basic study to clarify mechanism leading to atherosclerosis due to glycated and modified LDL.
2. To identify modified LDL proteins caused by reactive oxygenspecies.
3. To develop a bioactive agent to prevent atherosclerosis.
1. The extracts from 16 medical plant tissues was evaluated antioxidative activity, flavonoid content, polyphenol content.
2. The activity of anti-glyaction was assayed with $^14$C N-formyl-lysine and fluorescence from 32 kind extracts and Pantago asiatica was selected.
3. The anti-glycationary compound was isolated and purified by solvent partition, column chromatography (silica gel, ion exchange, sephadex LH-20, symmetric C18).
4. The purified compound was structure analysis throughout $^1$H-NMR, $^13$C-NMR, H-H COSY, H-C HMQC, CI-MS.
5. The purified compound was confirmed hepatoprotection effect, anti-modification of LDL against glycation and genetic toxicity.
1. The potent and significant inhibitory activity were found from medicinal plants tissues which Paeonia suffruticosa
(root , bark), Houttynia cordat (whole), Plantago asiatica (whole plant& seed).
2. Purified anti-glycationary compound (purified PA-1-B-1) was obtained with purification. This compound was assumed to be a phenolic glycoside containing rhamnose and M.W. 789.
3. Purified anti-glycationary compound had hepatoprotection activity against reactive oxygen spices and stability of genotoxicity.

목차 Contents

• I. 연구계획 요약문...4
• 1. 국문요약문...4
• II. 연구결과 요약문...5
• 1. 국문요약문...5
• 2. 영문요약문...6
• III. 연구내용...7
• I. 서론...7
• 1. 연구배경 ...7
• 2. 연구목적 ...8
• 3. 연구범위 ...12
• II. 연구방법 및 이론...13
• 1. 한약재의 구입 ...13
• 2 추출물의 제조 ...13
• 3. 추출물의 특성의 검토 ...14
• 4. N-formyl-lysine 제조...15
• 5 단백질 glycation 억제능 측정 ...18
• 6. 단백질 glycation 저해활성 물질의 추출 및 정제 ...19
• 7. 차전초 추출물로부터 얻은 glycation 저해 활성물질의 구조분석...21
• 8. In vitro LDL의 lipoxidation, glycation과 glycoxidation...21
• 9. Primary culture system을 이용한 차전초 추출물의 간 보호능 측정...24
• 10. 변이원성 및 항 돌연변이원성 실험...25
• III. 결과 및 고찰...27
• 1. 검색용 시료의 추출...27
• 2. 추출 시료의 총 polyphenol 함량 및 flavonoid 함량 측정...29
• 3. 추출 시료의 항산화 활성...33
• 4. 한약재 추출물의 glycation 억제능 측정...36
• 5. 글라이케이션 억제능의 2차 검색...40
• 6. 글라이케이션 억제 활성 물질에 대한 대량 추출 및 정제...43
• 7. PA-1-B 획분의 정제...47
• 8. PA-1-W 획분의 정제...52
• 9. 차전초 추출물로부터 얻은 PA-1-B-1 획분의 글라이케이션 억제능...58
• 10. 차전초 추출물로부터 얻은 PA-1-B-1 획분의 구조분석...61
• 11. 차전초 추출물의 Hep-G2 cell binding activity 측정...73
• 12. 차전초 추출물의 primary culture system에서의 간보호능 측정...80
• 13. 차전초 추출물의 유전독성 측정...83
• IIII. 참고문헌...88