초록 ▼

세포내에서 일어나는 여러 대사기작은 특정 조절단백질들에 의해 정교하게 조절되어진다 이러한 조절단백질들은 발현 (gene expression), 전사후 변형 (post-translational modification) 및 분해 (proteolysis)에 의해 그 활성이 조절되어 진다 단백질분해에 의한 조절기작은 진핵세포에서 ubiquitin-proteasome system에 의해 수행되어 진다 진핵세포에서 단백질분해의 필요조건인 ubiquitination은 E1, E2, E3 ubiquitination system에 의해 야기되며,

세포내에서 일어나는 여러 대사기작은 특정 조절단백질들에 의해 정교하게 조절되어진다 이러한 조절단백질들은 발현 (gene expression), 전사후 변형 (post-translational modification) 및 분해 (proteolysis)에 의해 그 활성이 조절되어 진다 단백질분해에 의한 조절기작은 진핵세포에서 ubiquitin-proteasome system에 의해 수행되어 진다 진핵세포에서 단백질분해의 필요조건인 ubiquitination은 E1, E2, E3 ubiquitination system에 의해 야기되며, 이들 중 E3 ub ligase에 의해 기질특이성이 결정되어진다 Ubiquitin ligase에 의해 활성이 조절되는 기질단백질들을 동정하여 특정 ligase와 기질단백질 사이의 연관성을 구축하고 이들의 세포내 기능을 분석하여 단백질 운명시스템의 유기적 연관성을 systematic하게 구축, 세포내 특정 대사 경로에 미치는 조절 기능을 규명하는 것이 본 연구의 목적이다 본 연구를 통하여 human SCF type E3 ligase와 non-SCF type ligase인 Chfr의 기질단백질들 및 상호작용 단백질들을 동정 , 분석하였다 또한, 동물세포에서 단백질 상호작용을 분석하기 위한 방법으로 affinity purification과 mass spectrometry가 결합된 다양한 분석 방법을 개발, 확립하였고, 단백질들 사이의 상호작용을 분석하기 위한 기초적 방법을 제시 하였으며,단백질 분해와 같은 특정한system에 적용하여 효과적으로 기질단백질들을 분석할 수 있는 기술을 확립하였다

Abstract ▼

Protein degradation is a commonly employed mechanism used to control protein abundance, which plays a critical role in the regulation of diverse cellular processes In the eukaryotic cytosol, proteolysis is typically triggered by the assembly of a substrate-linked ubiquitin chain, which targets the p

Protein degradation is a commonly employed mechanism used to control protein abundance, which plays a critical role in the regulation of diverse cellular processes In the eukaryotic cytosol, proteolysis is typically triggered by the assembly of a substrate-linked ubiquitin chain, which targets the protein for degradation by the 26S proteasome Ubiquitin is activated for transfer to substrate through the ATP-dependent formation of a thioester bond with the ubiquitin-activating enzyme, E1 Ubiquitin is subsequently transfered to a member of a family of ubiquitin conjugating (E2) enzymes Finally, thioesterified ubiquitin is transferred from E2 enzyme to a lysine residue of the target protein, either directly or with the assistance of a ubiquitin ligase (E3) E3s bind directly to substrate, suggesting that they provide specificity in ubiquitination reactions Since E3s dictate the specificity of ubiquitination reactions, it seems likely that protein degradation in vivo is controlled by regulating E3 activity or E3-substrate interaction
Protein interactions are crucial for the regulation of many biological activities of cells The analysis of such interactions is providing to determine the function of uncharacterized proteins and the genes that encode them The immunoaffinity purification in combination withmass spectrometry has become one of the most rapid and powerful tools to study protein-protein interactions A number of studies in ubiquitination-mediated proteolysis have begun to elucidate the cellular regulatory mechanisms Ubiquitination of proteins requires a multienzyme system The ubiquitin ligase, a key component of ubiquitination processes, controls both the timing and specificity of substrate ubiquitination
As a results for using proteomic approach, we uncovered a battery of substrate proteins for SCF or Chfr ub-ligase in human, and established novel technique for identifying the specific substrate proteins of proteolytic system

목차 Contents

• 제 1 장 연구개발과제의 개요...8
• 제1절 단백질 상호작용 분석 연구의 중요성...8
• 제2절 Proteomic 분석에 있어 SEAM의 중요성...8
• 제3절 연구개발의 목적...9
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황...11
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과...12
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...17
• 1. 연구개발목표...17
• 2. 연구개발목표의 달성도...17
• 3. 관련분야에의 기여도...17
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획...19
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...20
• 제 7 장 참고문헌...22