초록 ▼

I. 종양 유래 분비물질 (엑소좀)이 중간엽 기질 세포에 미치는 영향
1) RT-PCR : 종양 세포주들의 세포 배양액을 중간엽 줄기 세포에 주었을 때 세포 내 유전자들의 변화 관찰
II. 중간엽 기질 세포 유래 분비물질 (엑소좀)이 종양 세포에 미치는 영향
1) Cell proliferation assay: 중간엽 기질 세포 배양액을 종양 세포에 주었을 때 그 세포의 생존률(viability) 관찰
2) RT-PCR & Western blot2 : 중간엽 기질 세포 배양액을 종양 세포에 주었을 때 종양 세포

I. 종양 유래 분비물질 (엑소좀)이 중간엽 기질 세포에 미치는 영향
1) RT-PCR : 종양 세포주들의 세포 배양액을 중간엽 줄기 세포에 주었을 때 세포 내 유전자들의 변화 관찰
II. 중간엽 기질 세포 유래 분비물질 (엑소좀)이 종양 세포에 미치는 영향
1) Cell proliferation assay: 중간엽 기질 세포 배양액을 종양 세포에 주었을 때 그 세포의 생존률(viability) 관찰
2) RT-PCR & Western blot2 : 중간엽 기질 세포 배양액을 종양 세포에 주었을 때 종양 세포 내 유전자들의 변화 관찰 :
III. 중간엽 기질 세포의 분자 생물학적 정보 획득
1) microRNA profiling : 4명의 donor로부터 획득한 지방 조직 유래 중간엽 기질 세포 내 microRNA 분석
IV. 종양 유래 엑소좀이 중간엽 기질 세포에 미치는 영향
1) 전자현미경 EM : 엑소좀 분리 기준 확립
2) RT-PCR : 유방암 세포주들로부터 추출한 엑소좀(0 또는 10 ug)을 중간엽 줄기 세포에 주었을 때 세포 내 유전자들의 변화 관찰:
3) RT-PCR : 난소암 세포주들로부터 추출한 엑소좀을 중간엽 줄기 세포에 주었을 때 세포 내 유전자들의 변화 관찰
V. 종양 유래 엑소좀이 중간엽 기질 세포의 생물학적 변화를 유도하는 기전 규명
1) RT-PCR : 종양 엑소좀이 MSCs를 myofibroblast로의 표면적 분화 뿐 아니라, 실제로 종양 성장에 도움을 주는 인자들의 생성도 유도하는가 여부 관찰과 엑소좀 처리 후, myofibroblast의 기능성 인자들에 대한 수행
2) RT-PCR : 종양 엑소좀에 의해 MSCs가 myofibroblast로 분화시키는 경로에 관한 후보 물질 도출과 엑소좀 처리 후, MSCs 상의 세포 표면 단백질 중 대표적 인자에 대한 수행
3) Western blot : 종양 엑소좀에 의해 MSCs가 myofibroblast 로 분화될 때, 분자적 작용기전 규명
엑소좀 처리 후, TGFβ Receptor의 하위 신호전달 경로 중, SMAD 의존성 경로와 SMAD 비의존성 경로 (p38 MAPK, AKT 등)의 활성화 정도를 으로 확인

Abstract ▼

I. Evaluation of Effects of tumor-derived secreted molecules on MSCs
1) RT-PCR : Observation of changes in intracellular gene expression in MSCs that were treated with tumor cell culture supernatant
II. Evaluation of Effects of MSC-derived secreted molecules on tumor cells
1) Cell prolifera

I. Evaluation of Effects of tumor-derived secreted molecules on MSCs
1) RT-PCR : Observation of changes in intracellular gene expression in MSCs that were treated with tumor cell culture supernatant
II. Evaluation of Effects of MSC-derived secreted molecules on tumor cells
1) Cell proliferation assay: Observation of tumor cell viability that were treated with cell culture supernatant of MSCs
2) RT-PCR & Western blot: Observation of changes in intracellular gene expression in tumor cells that were treated with cell culture supernatant of MSCs
III. Acquisition of Molecular biological data for MSCs
1) microRNA profiling: Analysis for miRNAs of Adipose-derived MSCs from 4 different donors
IV. Evaluation of Effects of tumor-derived Exosomes on MSCs
1) Electron Microscopy (EM): Establishment of exosome isolation
2) RT-PCR: Observation of changes in intracellular gene expression in MSCs that were treated with Exosomes (0 or 10 ug) from breast cancer cells
3) RT-PCR: Observation of changes in intracellular gene expression in MSCs that were treated with Exosomes (0 or 10 ug) from ovary cancer cells
V. Identification of molecular mechanisms for induction of by which tumor exosomes induced biological changes of MSCs
1) RT-PCR: Examination for induction of tumor-promoting factor production as well as phenotypical changes in MSCs by tumor exosomes via exosome treatment on MSCs
2) RT-PCR : Investigation of potential surface molecules and differentiation pathways of MSCs into myofibroblast by tumor-derived exosomes
3) Western blot: Identification for activated signaling pathways (SMAD-dependent or SMAD-independent pathways) of the differentiation of MSCs into myofibroblasts by tumor exosomes

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 목차 ... 3
• 연구개발사업 최종연구개발결과보고서 요약문 ... 4
• Project Summary ... 6
• 1. 연구과제의 최종 연구개발 목표 ... 8
• 2. 연구과제의 연구대상 및 방법 ... 8
• 3. 연구과제의 연구개발결과 ... 9
• I. 종양 유래 분비물질 (엑소좀)이 중간엽 기질 세포에 미치는 영향 ... 9
• II. 중간엽 기질 세포 유래 분비물질 (엑소좀)이 종양 세포에 미치는 영향 ... 9
• III. 중간엽 기질 세포의 분자 생물학적 정보 획득 ... 10
• IV. 종양 유래 엑소좀이 중간엽 기질 세포에 미치는 영향 ... 14
• V. 종양 유래 엑소좀이 중간엽 기질 세포의 생물학적 변화를 유도하는 기전 규명 ... 15
• 4. 연구과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 18
• 5. 연구과제의 연구성과 및 목표달성도 ... 19
• (1) 연구성과 총괄 ... 20
• (2) 연구성과 상세내역 ... 22
• (3) 연구개발과제의 목표달성도 ... 26
• 6. 연구과제의 활용계획 ... 27
• (1) 연구종료 3년까지 예상 연구성과 ... 27
• (2) 연구성과의 활용계획 ... 28
• 7. 참고문헌 ... 29
• 8. 첨부서류 ... 34