초록 ▼

B형간염백신의 in vitro 역가시험법으로서 대부분의 제조사와 각 국의 국가검정기관은 상용 ELISA kit인 Abbott사의 Auszyme kit를 사용하였다. 그러나 2007년 이후 Auszyme kit가 단종된 이후, 각 국의 제조사와 국가검정기관 사이에 시험법에 대한 차이가 다시 발생되었다. 시험법에 대한 차이가 발생함에 따라 한 국가에서는 적합했던 백신이 다른 국가에서는 부적합으로 판정되는 문제가 발생하자 국제적으로 표준화된 시험법에 대한 필요성이 지속적으로 제기 되었다. 이에 WHO에서는 많은 제조사 및 국가검정기관에서

B형간염백신의 in vitro 역가시험법으로서 대부분의 제조사와 각 국의 국가검정기관은 상용 ELISA kit인 Abbott사의 Auszyme kit를 사용하였다. 그러나 2007년 이후 Auszyme kit가 단종된 이후, 각 국의 제조사와 국가검정기관 사이에 시험법에 대한 차이가 다시 발생되었다. 시험법에 대한 차이가 발생함에 따라 한 국가에서는 적합했던 백신이 다른 국가에서는 부적합으로 판정되는 문제가 발생하자 국제적으로 표준화된 시험법에 대한 필요성이 지속적으로 제기 되었다. 이에 WHO에서는 많은 제조사 및 국가검정기관에서 관심을 표명한 inhibition ELISA 시험법으로의 표준화를 위한 사전타당성 연구를 진행하였다.
국내 B형간염백신은 백신 제품 중 주요 수출품목의 하나로서 국제적 움직임에 동조하고 국내 품질관리 시험기관의 시험법에 대한 차이를 극복하기 위해서 inhibition ELISA 시험법으로의 표준화 가능성 및 국가검정시험법으로 대체 가능성을 평가하고자 하였다. 이 신규 시험법(inhibition ELISA)은 국내 B형간염백신에는 아직 적용된 적이 없기 때문에 ICH 가이드라인을 따르는 시험법 밸리데이션을 통해 직선성, 범위, 특이성, 정밀성, 정확성에 대한 검증을 실시하였고, 모든 검증항목이 규정된 기준을 만족함을 확인하였다. 따라서 국내 B형간염백신에도 적합한 시험법을 확립하였다.
또한 시험법 표준화를 위한 가장 중요한 항목인 시험기관 간의 재현성을 확인하고자 하였다. 시험기관 간의 재현성을 확인하기 위해서 국내 제조사 각각의 B형간염백신 상용제품 40개 로트에 대한 국가검정센터와 각 제조사 간의 비교시험을 실시하였다. 그 결과 제조사와 국가검정센터 사이의 높은 재현성을 확인하였다. 그리고 기존 국가검정시험법(ECLIA)과 신규 시험법(inhibition ELISA) 사이의 상관성 분석을 위해 각 제조사의 B형간염백신 상용로트 및 임의로 역가를 떨어 뜨린 제품을 포함하여 두 시험법 사이의 비교시험을 실시하였고, 피어슨 상관계수를 산출하였다. 그 결과 두 시험법 사이의 높은 상관성을 확인하였다.
이로써 새롭게 확립된 시험법(inhibition ELISA)에 대한 표준작업지침서(SOP)를 마련하였고, 추후 생물학적제제기준및시험방법의 고시 제정을 통해 국가검정시험법으로 활용가능하게 되었으며, B형간염백신의 수출에도 기여할 수 있을 것이다.

Abstract ▼

As a common in vitro potency assay, the commercial ELISA kit (Auszyme kit from Abbott laboratory) has been used by most of manufacturers and National Control Laboratories (NCLs). However, since the Auszyme kit was not available any longer in 2007, individual manufacturers and NCLs have developed and

As a common in vitro potency assay, the commercial ELISA kit (Auszyme kit from Abbott laboratory) has been used by most of manufacturers and National Control Laboratories (NCLs). However, since the Auszyme kit was not available any longer in 2007, individual manufacturers and NCLs have developed and validated different methods depending on their product-specificity and the ease of use. These different methods have produced the issues that a Hepatitis B (HB) vaccine was passed for lot release in one country, but failed in another country. And the needs for standardization of in vitro assay have been raised. WHO has performed the feasibility study on standardization into an in vitro potency assay based on an inhibition ELISA in which many manufacturers and NCLs were interested.
In this study, we intended to check the suitability of in vitro potency assay based on an inhibition ELISA method as an official test for release of Korean HB vaccine and the possibility for standardization of in vitro potency tests between manufacturers and a NCL. Because the test method of Korean HB vaccine needed to be harmonized on international trends as an important vaccine for export and overcome the difference between manufacturers and a NCL. The method validation study was conducted on this new ELISA according to ICH guideline, because this inhibition ELISA method has not yet applied to Korean HB vaccines. All validation parameters including accuracy, precision, specificity, linearity and range satisfied the defined validity. Moreover, the results from the assay of NCL by inhibition ELISA for 40 commercial lots of Korean HB vaccines were compared with those performed by manufacturers using the same method to check the inter-laboratory reproducibility for standardization. This inhibition ELISA produced high reproducibility for Korean HB vaccines. We also performed the correlation study between our current in vitro method and the new method for the different types of vaccine, including batches with reduced activity and normal commercial batches. The results showed the ability to discriminate between lower and normal potency vaccines because of high correlation between both in vitro methods.
Hence, SOP for the new inhibition ELISA was prepared. This new method will be used for release of Korean HB vaccines as a official test and also contribute to the export for the HB vaccines.

목차 Contents

• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 1
• 표지 ... 2
• 요약문 ... 4
• Summary ... 5
• 목차 ... 6
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 7
• 제1절 연구개발과제의 목표 ... 7
• 제2절 연구개발과제의 필요성 ... 7
• 제2장 연구개발과제의 국내 • 외 연구개발 현황 ... 9
• 제1절 국내 연구 실적 ... 9
• 제2절 국외 연구 실적 ... 9
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 10
• 제1절 연구개발의 내용 ... 10
• 제2절 연구개발의 결과 ... 16
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 29
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 32
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 33
• 제1절 활용성과 ... 33
• 제2절 활용계획 ... 33
• 제7장 참고문헌 ... 35
• 제8장 첨부서류 ... 36