보고서 정보
주관연구기관 |
농림수산검역검사본부 |
연구책임자 |
강민수
|
참여연구자 |
정병열
,
김애란
,
이강무
,
조성준
,
김민철
,
허문
,
정우석
,
권준헌
|
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2008-12 |
과제시작연도 |
2008 |
주관부처 |
농림수산식품부 |
연구관리전문기관 |
국립수의과학검역원 National Veterinary Research and Quarantine Service |
등록번호 |
TRKO201200010278 |
과제고유번호 |
1545000556 |
사업명 |
수의과학기술개발연구 |
DB 구축일자 |
2013-04-18
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키워드 |
가금티푸스.Salmonella Gallinarum.Fowl Typhoid.SG 9R.
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초록
▼
◦세부과제명: 국내 가금티푸스 발생실태 조사
- 2000년부터 2008년 11월말까지 AIMS에 등재된 가금티푸스 발생건수는 총 928건으로 2002년을 정점으로 지속적인 감소추세에 있음
- AIMS에 역학조사자료가 등록된 가금티푸스 발생 576농장중 계종별 발생비율은 육계 42.7%, 백세미 25.7%, 산란계 15.6%, 토종닭 14.9%, 종계 1.0%순으로 육계와 백세미에서 발생비율이 높았음
- 육용계의 경우, 주로 어린 닭에서 가금티푸스가 발생하였으며, 육계는 90.7%, 백세미는 56.8%, 토종닭은 31
◦세부과제명: 국내 가금티푸스 발생실태 조사
- 2000년부터 2008년 11월말까지 AIMS에 등재된 가금티푸스 발생건수는 총 928건으로 2002년을 정점으로 지속적인 감소추세에 있음
- AIMS에 역학조사자료가 등록된 가금티푸스 발생 576농장중 계종별 발생비율은 육계 42.7%, 백세미 25.7%, 산란계 15.6%, 토종닭 14.9%, 종계 1.0%순으로 육계와 백세미에서 발생비율이 높았음
- 육용계의 경우, 주로 어린 닭에서 가금티푸스가 발생하였으며, 육계는 90.7%, 백세미는 56.8%, 토종닭은 31.8%가 2주령이하의 닭에서 발생하여 난계대전염에 의한 발생이 상대적으로 많은 것으로 추정되었음
- 종계에서의 야외발생사례를 조사 분석한 결과 가금티푸스 생균백신 접종 미등록 종계장에서의 야외감염 발생과 이의 난계대 전염 사례를 확인하였음
◦세부과제명: 국내 가금티푸스 분리균의 특성분석 및 감별기술 개선
- 2000년부터 2007년까지 분리된 SG 야외분리주(142주)와 SG 표준균주(ATCC 9184)를 검사하여, 생물학적성상(Salmonella D group 항혈청과의 반응, rhamnose 분해능), PFGE 패턴(X baI , BlnI) 등을 이용한 SG 야외감염주와 생균백신주의 감별법을 확립하였음
- SG 분리균주의 PFGE 패턴을 분석한 결과 X baI에 의해 분리주간의 90%미만 유연성을 보이는 6개 그룹으로 나눌 수 있었으며 각 그룹과 분리년도와는 큰 상관관계가 없었음.
- 2002년부터 2007년까지의 분리주 105주에 대한 항생제 내성(MIC) 양상을 분석한 결과, 대분분의 분리주(94.3%)가 nalidixic acid에 내성을 보였으며 enrofloxacin에도 내성 또는 중간 내성이었고, 63.8%의 분리주가 세가지이상의 항생제에 내성을 나타내었음
- Nalidixic acid에 내성인 분리주중 선별한 42주에서 gyrA 유전자의 83번 또는 87번 codon에 변이가 일어난 것을 확인하였으며, sulfonamide에 내성인 분리주 57주에서 3가지 다른형태의 class 1 integron이 존재함을 확인하였음
◦세부과제명: 실험실내 가금티푸스 백신접종과 감염과의 상관성 연구
- 분리균주의 병원성 실험을 위해 PFGE 패턴 및 분리년도를 고려하여 5개 균주를 선발하여 1주령의 병아리에서 가장 병원성이 높은 분리균주를 선발(SG06Q110)하였으며, 1주령 종계병아리에서 SG06Q110의 LD50은 약 1.4X104CFU/수, 43주령 성계에서는 약 1.5X106CFU/수 이었으나, 6주령의 육성계에서는 최고 접종량인 1.9X106 CFU/수에서 17%의 폐사율만 보여병아리나 성계에 비하여 상대적으로 감수성이 낮았음
- 백신접종 육용종계 시험군에서는 약 1주후부터 약 80%내외의 백신항체 양성율을 보였으며, Salmonella D군 ELISA, 추백리진단액 평판응집반응의 순으로 양성율이 높게 나타났고, 2차 백신접종후에는 추백리진단액 평판응집반응에서도 20%이상의 높은 양성율을 보였음
- 백신접종 및 공격접종한 시험군에서는 2차 백신접종 4주후에 공격접종한 시험군에서 공격접종전에 비해 ELISA 및 추백리진단액 평판응집반응에서 높은 양성율(약 40% 이상)을 보였으나, 2차 백신접종 16주후에 공격접종한 시험군에서는 양성율이 20%내외 였음
- 실험실적으로 72주령 갈색산란계에서 가금티푸스 생균백신접종후 SG를 공격접종하여 공격균주의 난계대 전파양상을 조사한 결과, 부화후 2주령까지의 병아리의 76.3%, 부화중지란의 33.3%에서 SG가 분리되어 난계대 전파가 확인되었음
- 실험실적으로 육용종계에 대해 가금티푸스 생균백신을 2회 (6주와 18주 또는 18주와 30주) 접종한 후 SG를 공격접종하여 공격균주의 난계대 전파양상을 조사하였으나, 시험기간중 난계대가 확인되지 않았으며 무백신 대조군에서도 난계대가 거의 확인되지 않아 육용종계는 백신접종 유무와 상관없이 전반적으로 난계대 전파율이 낮은 것으로 추정되었음.
Abstract
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Salmonella enterica serovar Gallinarum (SG) causes a severe systemic disease, fowl typhoid, in chickens, and it has been of economic importance to commercial chicken industries in Korea since 1992. Since a live vaccine based on an attenuated SG 9R strain was introduced in 2001, the number of reporte
Salmonella enterica serovar Gallinarum (SG) causes a severe systemic disease, fowl typhoid, in chickens, and it has been of economic importance to commercial chicken industries in Korea since 1992. Since a live vaccine based on an attenuated SG 9R strain was introduced in 2001, the number of reported cases has decreased substantially although it was applied only to commercial layers. However, there continue to be outbreaks in commercial broiler farms. We characterized recent isolates of SG from chickens in Korea and tested if vaccination of Baeksemi-producing layers and broiler breeders with SG 9R prevent SG from being vertically transmitted to their progeny.
Biochemical reactions of all isolates tested, which were isolated between 2001 and 2007, were consistent with the traditional biochemical characteristics of SG, and the isolates could be differentiated from SG 9R by the test for rhamnose fermentation and PFGE analysis using XbaI or BlnI. In addition, most isolates (94.3%) were resistant to nalidixic acid and resistant or intermediately resistant to a fluoroquinolone, enrofloxacin, and 63.8% of isolates were resistant to three or more antimicrobials. Forty-two nalidixic acid-resistant isolates analyzed showed a substitution of a Ser to a Phe or Tyr at position 83 (71.4%) or a substitution of an Asp to an Asn, Gly, or Tyr at position 87 (28.6%) in the quinolone resistance-determining regions of the gyrA genes. Fifty-seven sulfonamide-resistant isolates analyzed revealed three different class 1 integrons containing an aminoglycoside resistance gene cassette, aadA1 (52.6%), aadB (12.3%), or aadB-aadA1 (12.3%). Only the isolates harboring the integron containing adB-aadA1 had resistance to all three aminoglycosides tested and also showed relatively increased resistance to fluoroquinolones. Epidemiological studies showed that vaccination of broiler breeders with SG 9R didn' t prevent egg transmission of SG. In laboratory trials, Baeksemi-producing layers vaccinated with SG 9R also produced SG-infected eggs and chicks. In serological tests, broiler breeders twice vaccinated with SG 9R showed high rates of positive responses (over 20%) in Salmonella group D ELISA and SP plate agglutination tests.
In conclusion, there has been no significant change in biochemical properties of the recent isolates of SG, and the isolates can be easily differentiated from SG 9R, based on their biochemical properties and PFGE patterns. This study also revealed that the consistent use of antimicrobials in chicken farms despite the introduction of the live vaccine and showed that fluoroquinolone resistance might be epidemiologically linked to multiple aminoglycoside resistance. Most of all, vertical transmission of SG and high serological responses in SG 9R-vaccinated breeders indicate that SG 9R vaccination of breeders can not be a good alternative to the current program of detection and depopulation of infected breeder flocks.
목차 Contents
- 연구과제 최종결과보고서 Final Report (FR) ... 1
- Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 3
- 1. 연구배경 ... 3
- 2. 연구최종목표 ... 4
- 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 4
- Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 5
- 1. 재 료 ... 5
- 2. 연구전략 및 방법 ... 6
- Ⅲ. 연구결과 ... 6
- 가. 제1세부과제명 : 국내 가금티푸스 발생실태 조사 ... 6
- 나. 제2세부과제명 : 국내 가금티푸스 분리균의 특성분석 및 진단기술 개선 ... 9
- 다. 제3세부과제명 : 실험실내 가금티푸스 백신접종과 감염과의 상관성 연구 ... 13
- Ⅳ. 연구결과요약 ... 20
- Ⅴ. 고 찰 ... 21
- Ⅵ. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 22
- Ⅶ. 참고문헌 ... 23
- Ⅷ. 영문초록 ... 24
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