초록 ▼

본 과제의 최종 연구개발 목표는 패혈증치료효과와 강심작용이 입증된 부자성분인 higenamine 유도체인 CKD-712의 전임상 연구를 통해 IND filing 및 엄상시험에 진입하는 것이었다. 궁극적으로는 임상개발을 완료하여 패혈증치료제로 국내시장에 발매하고， 해외에 기술수출을 추진하여 원료 또는 완제품을 수출하는데 목적이 있다.
상기 목표를 달성하기 위하여 2단계로 나누어 산학 공동연구를 추진하였다. 1 단계로 부자성분인 tetrahyclroisoquinoline계 화합물(higenamine) 의 구조를 바탕으로 한 유도체

본 과제의 최종 연구개발 목표는 패혈증치료효과와 강심작용이 입증된 부자성분인 higenamine 유도체인 CKD-712의 전임상 연구를 통해 IND filing 및 엄상시험에 진입하는 것이었다. 궁극적으로는 임상개발을 완료하여 패혈증치료제로 국내시장에 발매하고， 해외에 기술수출을 추진하여 원료 또는 완제품을 수출하는데 목적이 있다.
상기 목표를 달성하기 위하여 2단계로 나누어 산학 공동연구를 추진하였다. 1 단계로 부자성분인 tetrahyclroisoquinoline계 화합물(higenamine) 의 구조를 바탕으로 한 유도체연구로부터 약효가 강화되고 독성이 개선되어 개발후보주로 선정된 CKD-712의 in vitro, in vivo 약효평가를 통해 항패혈증효과가 매우 우수함을 입증하였다. 2단계는 CKD-712의 전임상 평가를 수행하여 IND filing을 하고 허가를 받는 것이었다. CKD-712의 전임상 평가를 위해 표준품 제조，규격설정，공정개발 및 시료합성을 하였고 IND 허가에 필요한 물리화학적 성질규명，작용기전규명 in vitro, in vivo 약효평가，일반약리，랫트 및 Dog에서의 약물동태(흡수，분포，대사，배설)，독성(급성，2주，4주 Rat, Dog 반복투여，유전，면역，4주 반복투여 TK)을 수행하여 완료하였다. 전임상 연구 결과， CKD-712는 패혈증 관련 factor인 NF-kB의 활성화 및 iNOS 발현을 강하게 억제하였고 염증마커인 TNF-a, IL-6도 억제하였다. 또한 혈액응고마커인 PT, APTT, fibrinogen level을 현저히 개선시켰다. 아울러 혈소판웅집저해，혈전생성억제효과도 강했으며 패혈증시 나타나는 혈압 및 혈관수축력저하 및 심박수 저하 방어효과가 강하게 나타났다. 그리고 패혈증시 나타냐는 치명적인 장기손상(간，신장 등)에 대한 방어작용도 동물모댈시험에서 입증되었다. 아울러 CKD-712는 마우스에서 최대 생존율 92% 로，패혈증 유발전 및 유발 후 투여시에도 개선효과가 강하게 나타나，패혈증치료제는 결국에는 후유장애 없이 생존율을 개선하는 것이 목적이기 때문에 이러한 점에서 희망적이라 사료된다. 급성독성시험에서 CKD←712의 LD50은 랫트에서 118 mg/kg으로 높게 나타났으며，혈중 반감기가 0.6h, 그리고 linear PK 특성을 나타내었다. 그리고 전입상 시료를 원할히 공급하기 위해 시료합성법 및 공정을 획기적으로 개선하여 라세미체에서 광학활성체를 얻는 optical resolution, 탈메틸화반응 개선 등 6단계 대량합성법을 확립，경제성을 크게 높였다.
그 동안의 전임상연구결과，유일한 패혈증치료제인 Xigris (Activated protein C, Lilly) 의 문제점으로 단가가 매우 고가이고 치명적인 출혈을 유발하는데 비해 CKD-712는 small molecule로 제조원가가 저렴하고 출혈의 부작용을 일으키지 않을 것으로 예상되며， 항응고， 항염증， 혈전용해，항혈전，강심작용을 복합적으로 나타내는 multifunctional drug으로 패혈증치료효과가 우수할 것으로 판단된다. 이러한 결과로부터 CKD-712의 개발가치 및 경쟁력이 있을 것으로 판단하여 IND fiIing을 완료하고 엄상 1상 진입을 위해 2005년 6월 1일에 IND 신청을 할 예정으로 현재 임상프로토콜 확정단계에 있다. IND 승인이 나면 조속한 임상개발로 제품화가 가능할 것으로 생각된다.

Abstract ▼

The ultimate aim of this project is to complete the prec1inical study of a new antiseptic agent derived from higenamine, CKD-712, for performing c1inical study to launch in Korean market and to license out the final product or material to global markets.
To achieve the goal, we had performed rese

The ultimate aim of this project is to complete the prec1inical study of a new antiseptic agent derived from higenamine, CKD-712, for performing c1inical study to launch in Korean market and to license out the final product or material to global markets.
To achieve the goal, we had performed research in partnership with universities by planning the two-step objects.
At the first stage, it was found that the preclinical candidate CKD-712, selected among tetrahydroisoquinoline analogs，is superior as an antiseptic agent through the in vitro and in vivo evaluation. And the second phase was to perform the preclinical research for the initiation of clinical study via govemment's approval.
To get an approval of IND, routine preclinical studies including physicochemistry, efficacy, mode of action, safety pharmacology, ADME, single and repeated toxicities, genotoxicity and immunotoxicity studies were conducted and completed successfully.
In results, CKD-712 suppressed the expression of TNF-a and iNOS genes by inhibiting NF-kB translocation into nudeus, resulting in recovery of plasma levels of inflammatory markers (TNF-a and IL-6). And it also recovered coagulatory markers (PT, APTT and fibrinogen) and fibrinolytic markers (D-dimer and PAI-l). In addition, CKD-712 showed not only anti-platelet activity but also cardiotonic effect. As the results, CKD-712 showed potent improving activities of organ dysfunction (liver, kidney etc.) in animal models and the survival rate was significantly increased in the CKD-712 treated group (max 92%). Furthermore, the treatment of CKD-712 after inducing sepsis also showed strong anti-septic activities. CKD-712 showed LD50 118 mg/kg in acute toxicity, half-life in blood 0.6 hr and linear PK.
And the methods for mass production of CKD-712 including separation of optically active form from racemic and demethylation was developed to provide for performing preclinical studies.
From the results of predinical studies, it is suggested that CKD-712 showing an anti-inflarnmatory, anti-coagulatory, fibrinolytic, anti-thrombotic and cardiotonic activity, is a promising antiseptic agent. And CKD-712 has advantage over Xigris. Xigris is only drug for treating sepsis up to the date but it is not only very expensive but also induces serious bleeding, whereas CKD-712 is small molecule and expected not to induce serious bleeding. Based on the solid preclinical results, CKD-712 is expected to be compectitive in the anti-sepsis market and thus CKD-712 now is about to apply for the IND in June, 2005

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 3
• 목차 ... 4
• 요약문 ... 6
• SUMMARY ... 7
• 총괄연구개발과제 연구결과 ... 8
• 1. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 8
• 2. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 결과 ... 17
• 3. 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 53
• 4. 사업화 목표 달성도 및 계획 ... 56
• 5. 총괄연구개발과제의 연구성과 ... 62
• 6. 연구개발결과의 파급효과 ... 99
• 7. 참여연구원 편성표(총괄) ... 100
• 8. 첨부서류 ... 103
• 제1세부연구개발과제 연구결과 ... 170
• 1. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 171
• 2. 제1세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 174
• 3. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 179
• 4. 제1세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 184
• 6. 참고문헌 ... 184
• 제3세부연구개발과제 연구결과 ... 185
• 1. 제3세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 186
• 2. 제3세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 188
• 3. 제3세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 199
• 4. 제3세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 221
• 6. 참고문헌 ... 223
• 제4세부연구개발과제 연구결과 ... 226
• 1. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 227
• 2. 제4세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 228
• 3. 제4세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 231
• 4. 제4세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 238
• 5. 참고문헌 ... 239
• 최종보고서 비공개 승인요청서 ... 241