초록 ▼

o 콜리스틴의 기기분석(HPLC) 조건 확립
1) 칼럼은 XTerra RP8(3.9150mm, 5), 이동상은 ACN

o 콜리스틴의 기기분석(HPLC) 조건 확립
1) 칼럼은 XTerra RP8(3.9150mm, 5), 이동상은 ACN/0.03M -0.03M in DW (14:86. pH 2.6 with triethylamine), 파장은 206nm, 칼럼온도 30의 조건에서 분석결과가 가장 좋았음.
2) 확립 기기분석법은 capacity factor(K'>2), tailing factor(T<2) 및 theoretical plates(N2,000) 등이 양호하였음.
o 확립 기기 분석법의 정확성, 정밀성, 직선성 등 검증
1) 콜리스틴의 정량곡선은 12,000~18,000 IU/ml의 농도구간에서 상관계수(r)가 0.9999이상으로 우수한 직선성(linearity)을 보였음.
2) 확립된 기기분석법은 spiramycin, amoxicillin 및 ampicillin과의 간섭없이 colistin만을 확실하게 분리하는 특이성을 보였음. 3) 확립된 기기분석법의 정확성(accuracy)은 98.0~101.3로 우수하였음. 4) 확립 분석법의 시험내(intra-assay) %RSD 값은 0.47~0.91이었으며 시험간(inter-assay) %RSD 값은 1.06~1.82로써 높은 정밀성(precision)을 보였음.
o 콜리스틴의 미생물학적 분석법 (bioassay) 개선
1) Bordetella bronchiseptica ATCC 4617 균주가 E.coli ATCC 10536 균주 보다 콜리스틴의 감수성 및 억제환의 명확성이 높고 보다 나은 정밀성과 정확성을 보였음(p>0.05)
o 확립 기기분석법 및 미생물학적 분석법간의 상관성 검증
1) 콜리스틴 표준품에 대한 두가지 분석법간에는 양호한 상관성이 인정되었음(r > 0.998, p>0.21).
2) 콜리스틴 시판원료 및 제품에 대한 두 분석법간에도 유의한 차가 없었음(p>0.05).
o 확립 분석법의 실험실간 비교시험
1) 콜리스틴 제품에 대한 3개 실험실간 반복성의 값의 범위는 0.38~1.73%, 재현성 RSDR 값은 3.19~5.29%로 높은 정밀성을 보였음

Abstract ▼

in Korea in combination with spiramycin, amoxicillin and ampicillin.Unfortunately the microbiological method lacks selectivity and sensitivity for the quantitation of colsitin. Previously reported LC methods also have not fully separated colistin A and B, the two major components with other antibiot

in Korea in combination with spiramycin, amoxicillin and ampicillin.Unfortunately the microbiological method lacks selectivity and sensitivity for the quantitation of colsitin. Previously reported LC methods also have not fully separated colistin A and B, the two major components with other antibiotics mentioned above in combined products. A selective and sensitive high-performance liquid chromatographic (HPLC) method has been developed for the separation and quantitation of colistin inveterinary pharmaceuticals. The method uses a XTerra RP8 (5, 3.9150mm I.D.) maintained at 30. The mobile phase comprises acetonitrile and 0.03M　phosphoric acid-0.03M sodium sulfate buffer(14/86, v/v) adjusted to pH 2.6 by means of triethylamine. Detection is as by UV at 206nm. In the method validation study, high coefficients of determination (r > 0.9999) are obtained for calibration curves with concentrations ranging from 12,000 to ~18,000IU/ml (n=5). Accuracy is within 2% and the RSD(%) of Intra-assay and inter-assay are ranged from 0.47 to 0.91 and from1.06 to 1.82, respectively. For the correlation test, 5 different dilutions of reference standard are measured by liquid chromatography and bioassay using strains of Bordetella bronchiseptica ATCC 4617. The coefficient of correlation(r) between liquid chromatography and bioassay is 0.998 and the significant differences between their values are not shown(p>0.21). In the interlaboratory study, the developed HPLC method for colistin sulfate shows good repeatability (RSDr < 1.73%) and reproducibility ( 5.29%).

목차 Contents

• 수의과학기술개발연구사업 연구과제 최종보고서 ... 1
• I. 연구배경 및 목표 ... 3
• II. 재료 및 방법 ... 3
• 1. 표준품 및 시약 ... 3
• 2. 표준용액 및 시료의 조제 ... 3
• 3. 분석기기 ... 4
• 4. 미생물학적분석법 개선을 위한 공시균주 및 시험방법 ... 4
• 5. 최적기기분석 조건 확립 ... 4
• 6. 개선된 기기분석법과 미생물학적 분석법의 상관성 조사 ... 4
• 7. 실험실간 비교실험 ... 4
• III. 연구결과 ... 4
• 1. 콜리스틴의 최적 기기분석조건 확립 ... 4
• 2. 개발기기분석법의 유효성 검증 (Analytical method validation) ... 5
• 3. 콜리스틴의 미생물학적 분석법(원통평판법) 개선 ... 7
• 4. 개선된 기기분석법과 미생물학적 분석법의 상관성 검증 ... 8
• 5. 확립기기분석법의 실험실간 비교실험 ... 10
• IV. 고찰 ... 11
• V. 결론 ... 12
• VI. 참고문헌 ... 13
• VII. 연구결과 활용 ... 14
• 1. 정책반영 1건 ... 14
• VIII. 영문초록 ... 15