보고서 정보
주관연구기관 |
농림수산검역검사본부 |
연구책임자 |
이희수
|
참여연구자 |
임숙경
,
조윤상
,
강현미
,
김종완
,
임춘태
,
김재학
,
김종만
,
주이석
|
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2004-12 |
과제시작연도 |
2004 |
주관부처 |
농림부 |
사업 관리 기관 |
농림기술관리센터 Agricultural Research & Development Promotion Center |
등록번호 |
TRKO201300008722 |
과제고유번호 |
1380000732 |
사업명 |
수의과학검역원(수의과학기술개발) |
DB 구축일자 |
2013-05-20
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키워드 |
장출혈성대장균.베로톡신.돼지살모넬라감염증.OMP혼합백신.Healthy animal.O serotypes.Verotoxin producing E. coli.Salmonella.OMPvaccine.DT104.Multidrug resistance.
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초록
▼
□ 세부과제명: 가축유래 장출혈성 대장균 분포조사
1. 장출혈성대장균 분포조사 및 검출기법 확립
가. 장출혈성대장균(EHEC) 9종(비매품 위주)에 대한 고역가(2,560~20,480) 토기항 혈청을 생산하였음.
나. Mutiplex PCR를 이용한 EHEC 특이유전자검출법을 확립하였음(VT1,VT2,eaeA 및 ehxA 동시검출)
다. '02~'03 2년간 가축분변 1,013건(한우 283, 젖소 169, 돼지 455, 개 및 고양이 106)으로부터 병원성대장균 O1등 37종 385주(38.0%) 분리하였음.
□ 세부과제명: 가축유래 장출혈성 대장균 분포조사
1. 장출혈성대장균 분포조사 및 검출기법 확립
가. 장출혈성대장균(EHEC) 9종(비매품 위주)에 대한 고역가(2,560~20,480) 토기항 혈청을 생산하였음.
나. Mutiplex PCR를 이용한 EHEC 특이유전자검출법을 확립하였음(VT1,VT2,eaeA 및 ehxA 동시검출)
다. '02~'03 2년간 가축분변 1,013건(한우 283, 젖소 169, 돼지 455, 개 및 고양이 106)으로부터 병원성대장균 O1등 37종 385주(38.0%) 분리하였음. 축종별로는 돼지 178주(39.1%), 한우 101주(35.7%), 젖소 62주(36.7%) 및 개등 44주(41.5%)로 나타내었음.
라. 병원성대장균분리주 385주(ʻ02~ʻ03년)에 대한 베로톡신유전자 검사결과 18종 61 주(15.8%)가 양성으로 나타내었음. 축종별분포는 젖소 O111등 8종 16주 (25.8%), 한우 O1등 8종 19주(18.8%), 돼지 10종 25주(14.0%) 및 개등 O25 1주로 나타내었음.
마. '04년 가축분변 599건(소 287, 돼지 312)으로부터 베로톡신유전자 양성 VTEC O26등 15종 60주(10.0%) 분리함. 축종별분포는 한우 O5등 13종 39주(17.0%), 젖소 O6등 3종 7주(12.1%) 및 돼지 O8등 2종 14주(4.5%) 순이었음.
2. 장출혈성대장균 분리주의 생물, 유전학적 특성조사
가. '02~'04 VTEC분리주 121주에 대한 특이유전자 검사결과 Vt1 40주(33.1%), Vt2 45주(37.2) 및 Vt1+Vt2이 36주(29.7%)로 고른 분포를 나타내었음. 축종별로는 한우의 경우 고른 분포를, 젖소의 경우 Vt1(65.3%)이, 돼지의 경우는 Vt2(59.0%)가 주를 이루었음. 이들 균주의 eaeA(부착인자), ehxA(출혈성인자) 및 eaeA+ehxA의 양성율은 각각 9.1%, 12.4% 및 4.1%로 비교적 낮게 나타났음.
나. VTEC 분리주(91주)에 대한 베로톡신 생성시험에서 40주(44.0%)가 양성으로 나타났으며, 한우가 43주중 28주(65.1%), 젖소 22주중 9주(40.9%) 및 돼지 26주 중 3주(11.5%)의 순으로 축종간에 큰 차이를 나타내었음.
다. 또한 VTEC 분리주의 베로톡신 생성능은 배양조건에 따라 차이를 보여 TSB에 mitomycin C를 첨가시 양성율 증가와 생성역가 상승효과를 확인함. 혈청형별 톡신생성능은 한우의 경우 O55, O112ac, O15 및 O153 등이, 젖소는 O1, O6 및 O111 등이, 돼지는 O159에서 64배이상의 높은 역가를 나타내었음.
라. VTEC(118주) 분리주에 대한 약제내성율은 TC(56.8%), AM(33.9%), K(25.4%) 및 SXT(15.3%)의 순으로 높게 나타났으며, AMC, CF등 5종에 대해서는 100%의 감수성을 보였음. 축종간에는 돼지, 한우의 순으로 내성율이 높게 나타났으며, 노플로삭신 등 퀴놀론계 약제의 경우, 한우 및 돼지에서 각각 2주(3.4%) 및 1주(2.7%) 분리되었음.
마. VTEC 분리주에 대한 PFGE 분석결과 크게 12가지의 gene cluster를 형성하였으며, 혈청형 및 축종에 구분 없이 다양한 유형으로 나타났음.
Abstract
▼
Most of verotoxin-producing Escherichia coli (VTEC) are known to EHEC and are an important cause of gastrointestinal disease in humans and domestic animals. It has been recognized that VTEC causing human disease may belong to broad range of O serogroups. In this study, we investigated the prevalence
Most of verotoxin-producing Escherichia coli (VTEC) are known to EHEC and are an important cause of gastrointestinal disease in humans and domestic animals. It has been recognized that VTEC causing human disease may belong to broad range of O serogroups. In this study, we investigated the prevalence of Escherichia coli O serotypes isolated from healthy animals for 2 years from 2002 to 2003, and then we examined the characteristics of VTEC virulence genes from animal in 2004. 385E. coli of different 37 O serotypes were isolated from 1,013 samples.
The most prevalent O serotypes in each animal were as follows: in Korean native cattle, O28ac 14 (4.9%), and O1 11 (3.9%); in dairy cattle, O8 8 (4.7%), and O4 6 (3.6%); in pigs, O8 42 (9.2%), O4 14 (3.1%). VTEC were 61 strains (15.8%) of 18 different O serogroups from 385 O serotype isolates. And in 2004 the prevalence rates of VTEC in animals were estimated to be 17.0% in Korean native cattle, 12.1% in dairy cattle, 4.5% in pigs, respectively. Of 121 strains of VTEC isolated from 2002 to 2004, multiplex PCR showed that 33.1% of strains had VT1 gene, 37.23% VT2 genes, and 29.7% both VT1 and VT2 genes. And also the virulence genes of ehxA (enteroaemolysin), eaeA (intimin), and ehxA+eaeA were detected in 12.4%, 9.1%, and 4.1%, respectively. This study showed that there were various O serotypes of VTEC in helthly animals, which may be a reservoir of VTEC in human. But the VTEC isolated from animals in this study were no O157, 86.8% were eaeA-negative and 83.5% were ehxA-negative. These characteristics demonstrated that most VTEC distributed in domestic animals of Korea may be less pathogenic.
목차 Contents
- 수의과학기술개발연구사업 연구과제 최종보고서 ... 1
- I. 연구배경 및 목표 ... 5
- 1. 연구배경 ... 5
- 2. 연구최종목표 ... 6
- 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 6
- II. 재료 및 방법 ... 7
- 1. 재 료 ... 7
- 2. 연구전략 및 방법 ... 7
- III. 연구결과 ... 8
- 1. 가축유래 장출혈성대장균(EHEC) 분포조사 ... 8
- 2. 돼지 살모넬라균 방제에 관한 연구 ... 19
- IV. 고찰 ... 33
- IV. 결론 ... 35
- 1. 세부연구과제명: 가축유래 장출혈성대장균 분포조사 ... 35
- 2. 세부연구과제명: 돼지살모넬라균 방제에 관한 연구 ... 36
- VI. 참고문헌 ... 38
- 가. 가축유래 장출혈성대장균 분포조사 ... 38
- 나. 돼지 살모넬라균 방제에 관한 연구 ... 39
- VI. 연구결과 활용 ... 40
- 1. 특허출원 2건 ... 40
- 2. 학회논문발표 4건 ... 40
- 3. 전문지투고 1건 ... 40
- 4. 통상실시권계약체결 1건 ... 40
- VIII. 영문초록 ... 41
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