초록 ▼

• 본 과제에서는 새로운 히스톤 H2AX methylation 확인하고 이를 매개하는 효소 및 cofactor의 동정하여 이들의 생물적 의의를 조사함으로써 새로운 DNA 손상 및 세포주기, 세포사멸 및 발암의 기작을 규명함. 더 나아가 더 나아가 항암제와 같은 신물질을 개발할 수 있는 토대를 마련하고자 함.
• 히스톤 H2AX의 메틸화를 Immunoprecipitation/western blot analysis 방법으로 확인함. 또한, mass spectrometry 방법을 사용하여 H2AX의 6번째 lysine이 dimeth

• 본 과제에서는 새로운 히스톤 H2AX methylation 확인하고 이를 매개하는 효소 및 cofactor의 동정하여 이들의 생물적 의의를 조사함으로써 새로운 DNA 손상 및 세포주기, 세포사멸 및 발암의 기작을 규명함. 더 나아가 더 나아가 항암제와 같은 신물질을 개발할 수 있는 토대를 마련하고자 함.
• 히스톤 H2AX의 메틸화를 Immunoprecipitation/western blot analysis 방법으로 확인함. 또한, mass spectrometry 방법을 사용하여 H2AX의 6번째 lysine이 dimethylation되었음을 밝힘.
• H2AX(K6A) 돌연변이의 경우 DNA 손상에 의한 H2AX S139 인산화rrk 변하지 않았으나 야생형 H2AX의 경우보다 H2AX 인산화가 오랫동안 지속되었음. 즉, DNA 복구가 지연됨.
• H2AX K6 me2에 대한 항체를 제작하였으나 H2AX 특이적이지 못함. 이는 H2A가 H2AX와 아미노산 서열 homology가 매우 높고 H2A K6도 dimethylation되는 것으로 사료됨.
• 히스톤 H2AX의 결합 단백질을 immunoprecipitation/ mass spectrometry를 수행함. SET7/9 메틸화 효소와 Jmjd3 탈메틸화 효소를 동정함.
• DNA 손상에 비의존적인 SET7/9 메틸화효소와 H2AX간의 결합을 확인함. in vitro methylation을 수행하여 SET7/9의 H2AX 메틸화활성 확인함.
• RNA간섭을 이용하여 SET7/9 녹다운하였을 때 DNA 손상에 의한 H2AX 인산화가 오랫동안 지속됨을 확인함. 이러한 결과는 H2AX (K6A)의 결과와 일치하며 SET7/9이 DNA 손상보다는 복구에 중요함을 암시함.
• H2O2나 저산소 처리와 같은 세포 손상원에 의해 발현이 증가하는 Jmjd3 탈메틸화 효소의 기능을 연구함. RNA 간섭과 ChIP 방법등을 통해 IL-6, iNOS, MMP9등과 같은 면역, 세포사멸 관련 유전자의 발현을 조절한다는 사실을 밝힘.
• 연구 결과는 교신저자로 본 과제를 사사하여 2012년 “Journal of Neurochemistry” 에 게재 예정임 (online published). 또한 1편의 SCI 논문이 준비중임 (in revision).
• 추가 연구를 통해 히스톤 H2AX 메틸화 및 메틸화 효소의 생물학적 의미를 연구하여 1편의 SCI 논문을 더 투고할 예정이며 DNA 손상에 의존적인 Jmjd3의 기능을 수행중임.

목차 Contents

• 일반연구자지원사업 최종(결과)보고서 ... 1
• 목차 ... 3
• I. 연구결과 요약문 ... 4
• II. 연구내용 및 결과 ... 5
• 1. 연구과제의 개요 ... 5
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 5
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 6
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 9
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 9
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 9
• III. 연구성과 ... 10