보고서 정보
주관연구기관 |
식품의약품안전청 Korea Food & Drug Administration |
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
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발행년월 | 2012-12 |
과제시작연도 |
2012 |
주관부처 |
식품의약품안전청 Korea Food & Drug Administration |
등록번호 |
TRKO201300028843 |
과제고유번호 |
1475006916 |
사업명 |
식품등안전관리 |
DB 구축일자 |
2013-09-28
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키워드 |
유전자분석.가짜식품.Genetic analysis.Economically motivated Adulteration Food.
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DOI |
https://doi.org/10.23000/TRKO201300028843 |
초록
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○ 전문가 자문회의, 국내 • 외 식품정보, 언론매체 등을 통하여 가짜식품으로 제조·유통사례가 높을 것으로 예상되는 식품유형을 일차적으로 선정하였다. 그리고 선정된 식품유형에 따라 시험항목을 작성하고 시험법을 개발하였다. 최종목표가 가공식품을 대상으로 한 가짜식품 판별이므로 제조공정 중 열처리, 산처리, 고압조건 등을 고려하여 비교적 안정성이 높은 유전자분석법을 개발하였다.
○ 식품원료 총 45종에 대한 종 특이 프라이머를 개발하였으며 상호 유사종에 대한 비 특이적 밴드의 생성유무를 관찰하기 위하여 동물성 및 식물성 원료로 구
○ 전문가 자문회의, 국내 • 외 식품정보, 언론매체 등을 통하여 가짜식품으로 제조·유통사례가 높을 것으로 예상되는 식품유형을 일차적으로 선정하였다. 그리고 선정된 식품유형에 따라 시험항목을 작성하고 시험법을 개발하였다. 최종목표가 가공식품을 대상으로 한 가짜식품 판별이므로 제조공정 중 열처리, 산처리, 고압조건 등을 고려하여 비교적 안정성이 높은 유전자분석법을 개발하였다.
○ 식품원료 총 45종에 대한 종 특이 프라이머를 개발하였으며 상호 유사종에 대한 비 특이적 밴드의 생성유무를 관찰하기 위하여 동물성 및 식물성 원료로 구분하여 진행하였다. 첫째, 동물성원료는 미토콘드리아 DNA에 존재하는 12S, 16S, CYTB, COI, COII, NADH 유전자 등에서 대상종의 염기서열 정보를 검색하여 확인한 후, ClustalW2-Multiple Sequence Alignment를 이용하여 염기서열 정보를 비교·분석하여 종 특이적인 영역을 포함하는 염기서열에서 프라이머를 설계하였고 유전자은행에 정보가 없는 경우에는 직접 염기서열을 결정 후 설계하였다. 대상원료인 캥거루, 거위, 잉어(향어포함), 붕어, 미꾸라지, 미꾸리, 가물치, 꽁치, 고등어, 다금바리, 자바리, 능성어, 연어, 송어, 다랑어류, 새치류, 기름갈치꼬치, 흑갈치꼬치, 게, 새우, 전복, 백합, 소라, 주꾸미, 낙지에 대하여 각각 170, 103, 173, 176, 155, 155, 203, 152, 211, 136, 181, 123, 219, 231, 149, 367, 178, 238, 174, 231, 141, 192, 161, 212, 217bp 의 증폭산물을 확인하였으며 유사종에 대한 비 특이적 밴드는 나타나지 않았다. 둘째, 식물성원료는 SSR, GTM, SNP 등을 대상으로 하였으며 프라이머 설계방법은 동일하게 적용하였다. 대상원료인 고구마, 타피오카, 검정콩, 땅콩, 참깨, 들깨, 올리브, 아몬드, 해바라기, 복숭아, 딸기, 앵두, 포도, 배추, 파(쪽파 포함), 토마토, 호박, 생강, 당근, 태국칡에 대하여 각각 105, 121, 297, 120, 220, 150, 103, 103, 104, 174, 164, 236, 104, 173, 136, 132, 101, 113, 194, 216bp의 증폭산물을 확인하였다.
○ 그리고 고추다대기를 혼합한 불량고춧가루 판별법 및 식육추출가공품의 사용원료 판별법을 마련하였다. 그러나 식용유지류에 대한 사용원료 확인을 위한 유전자추출법을 검토하였으나 재현성이 부족하여 시험법으로 사용하기에는 한계가 있었다.
○ 본 연구를 통하여 개발한 식품원료판별법은 지침서를 제작하여 관련기관에 배포함으로써 가짜식품 유통 근절 및 소비자 권인보호에 크게 기대할 것으로 기대된다.
Abstract
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Items were primarily selected which is expected to be regarded as highly adulterated or distributed from the expert consultants, domestic and foreign food information. Then according to the categories of selected items, the assay method was developed. The final purpose of this study is identifying t
Items were primarily selected which is expected to be regarded as highly adulterated or distributed from the expert consultants, domestic and foreign food information. Then according to the categories of selected items, the assay method was developed. The final purpose of this study is identifying the adulterated material in processed foods so genetic analysis method has been developed by consideration condition of food manufacturing process such as heating, acid treatment, pressurizing etc. Species-specific primers of totally 45 for raw food materials were developed. To investigate the generation of non-specific bands between similar species, raw materials were separated to animal and vegetable types. Firstly, in case of animal raw material, nucleotide sequence information of the target species was previously searched to the 12S, 16S, CYTB, COI, COII, NADH genes in mitochondrial DNA(mtDNA). The primers were designed from the nucleotide sequences including species specific region using ClustalW2-Multiple Sequence Alignment and if there is no information in the gene bank, nucleotide sequence was selected and determined directly. The amplicon size for kangaroo, goose, carp(including leather carp), crucian carp, chinese weatherfish, oriental weatherfish, snakehead, pacific saury, mackerel, sawedged perch, kelp grouper, true bass, salmon, trout, tuna, marlin, oilfish, escolar, crab, shrimp, abalone, hard clam, spiny turban shell, webfoot octopus, and long-legged octopus were confirmed 170, 103, 173, 176, 155, 155, 203, 152, 211, 136, 181, 123, 219, 231, 149, 367, 178, 238, 174, 231, 141, 192, 161, 212 and 217bp respectively. And any specific bands were not detected among similar species. Secondly, in case of vegetable raw materials, SSR, GTM, and SNP genes were selected as a target gene for identification. Also, the amplicon size for sweet potato, tapioca, soybean, peanut, sesame, perilla, olive, almond, sunflower, peach, strawberry, cherry, grape, cabbage, spring onion(including shallots), tomato, zucchini, ginger, carrot, thai kuzu were confirmed 105, 121, 297, 120, 220, 150, 103, 103, 104, 174, 164, 236, 104, 173, 136, 132, 101, 113, 194, and 216bp, respectively. In addition, detection method for faulty red pepper containing seasoned red-pepper sauce and raw material used in meat extract products were developed. However, method for identify raw materials in edible oils were not possible.
Raw material identification method(total 45 items) developed in this study would be applied to food safety management for eradication of adulterated food distribution and protection of consumer' s rights
목차 Contents
- 자체연구개발과제 최종보고서 ... 1
- 표 지 ... 2
- 국문 요약문 ... 4
- Summary ... 5
- 목 차 ... 6
- Ⅰ. 연구개발과제 연구결과 ... 9
- 제1장 연구개발과제 개요 ... 9
- 제1절 연구개발과제의 목표 ... 9
- 제2절 연구개발과제의 필요성 ... 9
- 제3절 EMA식품 발생 현황 ... 10
- 제2장 연구개발과제의 국내 • 외 연구개발 현황 ... 13
- 제1절 국내 연구개발 현황 ... 13
- 제2절 국외 연구개발 현황 ... 14
- 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 17
- 제1절 시료전처리, 유전자 추출, 유전자 증폭 및 확인 ... 17
- 1. 시료전처리 ... 17
- 2. 유전자 추출 ... 17
- 3. 유전자 추출 확인 ... 22
- 4. 유전자 증폭 및 확인 ... 23
- 5. 염기서열 결정 및 분석 ... 35
- 제2절 종 특이 프라이머를 이용한 개별 식품원료의 판별법 ... 38
- 1. 대상식품 선정 및 시험법 개발 흐름도 ... 38
- 1) 대상식품 선정 ... 38
- 2) 시료 확보 ... 38
- 3) 시험법 개발 흐름도 ... 38
- 2. 동물성 원료 프라이머 설계 ... 40
- 1) 가축류(캥거루) ... 42
- 2) 가금류(거위) ... 42
- 3) 민물어류[잉어(향어), 붕어, 미구라지, 미꾸리, 가물치) ... 43
- 4) 해양어류(꽁치, 고등어, 다금바리, 자바리, 능성어) ... 46
- 5) 회유어류(연어, 송어) ... 50
- 6) 다랑어류 및 새치류 ... 52
- 7) 심해성 어류(기름갈치꼬치, 흑갈치꼬치) ... 56
- 8) 갑각류(게, 새우) ... 58
- 9) 패류(전복, 백합, 소라) ... 59
- 10) 두족류(주꾸미, 낙지) ... 62
- 3. 식물성 원료 프라이머 설계 ... 67
- 1) 콩류(검정콩) ... 68
- 2) 견과종실류(아몬드, 해바라기) ... 69
- 3) 과실류(앵두, 포도) ... 70
- 4) 채소류[배추, 파] ... 71
- 5) 근채류(생강, 당근) ... 72
- 6) 기타(태국칡) ... 72
- 7) 기타(파 등 11종) ... 73
- 4. 동물성 원료의 유사종간 PCR 결과 ... 76
- 1) 가축류(캥거루) ... 76
- 2) 가금류(거위) ... 76
- 3) 민물어류[잉어(향어), 붕어, 미구라지, 미꾸리, 가물치) ... 77
- 4) 해양어류(꽁치, 고등어, 다금바리, 자바리, 능성어) ... 79
- 5) 회유어류(연어, 송어) ... 82
- 6) 다랑어류 및 새치류(다랑어류, 새치류) ... 83
- 7) 심해성 어류(기름갈치꼬치, 흑갈치꼬치) ... 84
- 8) 갑각류(게, 새우) ... 85
- 9) 패류(전복, 백합, 소라) ... 86
- 10) 두족류(주꾸미, 낙지) ... 87
- 5. 식물성 원료의 유사종간 PCR 결과 ... 89
- 1) 서류(고구마, 타피오카) ... 89
- 2) 콩류(검정콩) ... 90
- 3) 견과종실류(땅콩, 참깨, 들깨, 올리브, 아몬드, 해바라기) ... 90
- 4) 과실류(복숭아, 딸기, 앵두, 포도) ... 93
- 5) 채소류[배추, 파(쪽파 포함), 토마토, 호박] ... 95
- 6) 근채류(생강, 당근) ... 97
- 7) 기타(태국칡) ... 98
- 6. 고추다대기함유 불량고춧가루 판별 ... 99
- 7. 식육추출가공품의 사용원료 판별 ... 102
- 8. 식용유지류에 대한 사용원료 판별 ... 105
- 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 107
- 제1절 동물성 식품원료의 판별법 ... 107
- 제2절 식물성 식품원료의 판별법 ... 108
- 제3절 고추다대기를 혼합한 불량고춧가루 판별법 ... 111
- 제4절 식육추출가공품의 사용원료 판별법 ... 112
- 제5절 식용유지류의 사용원료 판별법 ... 113
- 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 114
- 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 115
- 제1절 활용성과 ... 115
- 제2절 활용계획 ... 115
- 제7장 참고문헌 ... 117
- 제8장 첨부서류 ... 123
- 첨부 1 : 발표논문1(불량고춧가루 판별법) ... 123
- 첨부 2 : 발표논문2(식육추출가공품의 사용원료 판별법) ... 124
- 첨부 3 : 유전자정보 등록1(태국칡의 ITS2) ... 125
- 첨부 4 : 유전자정보 등록2(태국칡의 rpoC1) ... 126
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