초록 ▼

1차년도 : GVHD를 유발하는 T-세포 이동 관련 인자의 규명
(1) GVHD + Tumor 마우스 모델 제작
○마우스를 sublethal 상태로 전처치 하고, 골수세포이식을 해서 착생을 유도하고, GVHD를 유발하기 위해 조직적합형이 맞지 않는 T세포를 주입한후 donor cell의 착생을 골수, 흉선 및 비장에서 확인하였다.
(2) GVHD관련 표적장기의 케모카인 및 사이토카인 분석
○표적장기 조직으로부터 DNA분리하여 GVHD 관련 표적장기의 케모카인, Cytokine 분석하였더니 간, 장, 피부의 세

1차년도 : GVHD를 유발하는 T-세포 이동 관련 인자의 규명
(1) GVHD + Tumor 마우스 모델 제작
○마우스를 sublethal 상태로 전처치 하고, 골수세포이식을 해서 착생을 유도하고, GVHD를 유발하기 위해 조직적합형이 맞지 않는 T세포를 주입한후 donor cell의 착생을 골수, 흉선 및 비장에서 확인하였다.
(2) GVHD관련 표적장기의 케모카인 및 사이토카인 분석
○표적장기 조직으로부터 DNA분리하여 GVHD 관련 표적장기의 케모카인, Cytokine 분석하였더니 간, 장, 피부의 세 장기에서 공통적으로 증가한 싸이토카인으로는 G-CSF 와 IL-23, 케모카인은 KC와 MIP-2로 나타났다.
(3) GVHD 관련 T-세포 수용체 분석
○GVHD 관련 대표 T-세포 수용체는 KC 및 CXCL2 (MIP-2)의 공통 수용체인 CXCR2로 정하고 실제 T-세포 발현을 확인하였다.
2차 년도: T-세포 이동 억제 시 GVHD 및 GVL 평가기술 개발
(1) GVL 평가법 개발
○유세포 분석에서 골수와 말초혈 모두에서 암표지자인 CD19+/B220+ 세포가 A20 세포 주입후 발현이 증가하였고 또한 real-time PCR 방법으로 역시 또다른 암표지자인 BCL2 유전자도 같은 양상을 보여 간단하고 정확한 GVL 평가법을 확립하였다.
(2) GVHD 평가법 개발
○유세포 분석으로 표적장기의 GFP T-세포 이동량 측정하였도, 조직학적으로 GVHD정도를 점수화하여 객관적으로 비교 하였으며 또한 Kaplan- Meier생존율 및 육안적 점수에 의한 GVHD 평가 기준을 확립하였다.
3차년도 : T-세포의 선별 이동 억제에 의한 GVHD 감소 및 GVL 유지 효과 확인
(1) GVHD 유발 케모카인 (MIP-2) 및 T-세포 대표수용체 (CXCR2)의 차단후 GVHD 억제 효과
① 관련 사이토카인 감소 효과
○MIP-2 단독으로 차단한 경우에서 차단하지 않은 경우에 비해 대표사이토카인인 MIP-2, KC, IL-23 및 G-CSF 모두 감소하였고 이중 MIP-2와 KC 가 가장 현저하게 감소하였다.
○또한 MIP-2, CXCR2 모두 차단하였을 때는 단독으로 차단하였을 때보다 더욱 모든 사이토카인, 케모카인이 감소하는 양상을 보였다.
② 조직학적 점수 및 생존율
○CXCR2/MIP-2 (CXCL2)의 차단 후 조직학적 점수가 감소되는 효과를 확인하였다.
(2) GVHD 유발 케모카인 (MIP-2) 및 T-세포 수용체 (CXCR2)의 차단후 GVL 유지 효과
○CXCR2와 MIP2 차단에 의해 암세포의 양이 감소되었는데 두 후보물질 모두를 차단하는 경우가 효과가 우수하였다.
○즉, CXCL2/CXCR2 축의 차단에 의해 GVHD 약화의 효과가 있지만 동시에 GVL의 약화를 초래하지는 않아 두 면역반응의 차별화에 성공하였음.

목차 Contents

• 일반연구자지원사업 최종(결과)보고서 ... 1
• 목 차 ... 2
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 3
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 4
• 1. 연구과제의 개요 ... 4
• 2. 국내·외 기술개발 현황 ... 4
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 5
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 6
• 5. 연구결과의 활용 계획 ... 6
• Ⅲ. 연구성과 ... 7