보고서 정보
주관연구기관 |
전남대학교 산학협력단 Chonnam National University |
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
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발행년월 | 2010-11 |
과제시작연도 |
2010 |
주관부처 |
농림축산식품부 Ministry of Agriculture, Food and Rural Affairs(MAFRA) |
등록번호 |
TRKO201400000555 |
과제고유번호 |
1545002388 |
사업명 |
수의과학기술개발연구 |
DB 구축일자 |
2014-08-16
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키워드 |
소.돼지.혈청형 A 로타바이러스.병원성.경제적 손실.인수공통전염병.Bovine.Porcine.Group A rotaviruses.Pathogenesis.Economic loss.Zoonosis.
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DOI |
https://doi.org/10.23000/TRKO201400000555 |
초록
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본 연구의 목표는 첫째로 최근 국내 송아지 설사분변에서 분리된 재조합 A형 로타바이러스를 초유를 먹지 않은 송아지에 접종하였고, 이종 A형 로타바이러스는 송아지와 자돈에 각각 접종한 후, 병리학, 바이러스학, 분자생물학적 기법 등을 이용하여 소화기 친화성 여부를 분석하는 등 이들 바이러스의 병원성을 확인하고, 둘째 국내 자돈 설사분변에서 분리된 재조합 및 동종 A형 로타바이러스를 초유를 먹이지 않은 자돈에 접종한 후, 소에서 검사한 바와 같이 바이러스의 병원성을 규명하여 궁극적으로 백신 및 치료제 개발과 방역대책 및 공중보건학적 기
본 연구의 목표는 첫째로 최근 국내 송아지 설사분변에서 분리된 재조합 A형 로타바이러스를 초유를 먹지 않은 송아지에 접종하였고, 이종 A형 로타바이러스는 송아지와 자돈에 각각 접종한 후, 병리학, 바이러스학, 분자생물학적 기법 등을 이용하여 소화기 친화성 여부를 분석하는 등 이들 바이러스의 병원성을 확인하고, 둘째 국내 자돈 설사분변에서 분리된 재조합 및 동종 A형 로타바이러스를 초유를 먹이지 않은 자돈에 접종한 후, 소에서 검사한 바와 같이 바이러스의 병원성을 규명하여 궁극적으로 백신 및 치료제 개발과 방역대책 및 공중보건학적 기초자료 등으로 활용하는데 있다.
소 혈청형 A 로타바이러스 경우 분리주 중에서 재조합(G6P[7] genotype) 및 이종(G5P[7]) 로타바이러스의 병원성을 확인하기 위해 이들 바이러스를 초유를 먹이지 않은 송아지 혹은 자돈에 경구투여하였다. 그 결과 소 혈청형 A 재조합 및 이종 로타바이러스가 투여된 송아지나 자돈은 모두 접종 1일령부터 실험 종료 때 까지 설사를 보였다. 분변을 통한 접종바이러스의 배출을 검사하기 위하여 RT-PCR을 수행한 결과 바이러스가 접종 1일령부터 실험 종료 시점까지 관찰되었다. 또한 접종된 송아지 소장의 형태학적 변화를 검사하기 위해 경시적으로 부검하여, 소장 각 부위를 대상으로 병리조직학적 검사를 수행한 결과, 재조합 및 이종 로타바이러스를 접종한 송아지 및 자돈 소장에 나타난 공통적인 특징은 다양한 융모상피세포의 탈락, 이로 인한 융모의 위축과 융합, 음와 상피세포의 증식, 융모고유층의 림프구 침윤 및 충혈 등이 있었다. 그리고 접종된 송아지 및 자돈에서 로타바이러스의 조직 내 항원 소재를 파악하기 위하여, 로타바이러스 VP6 단백질에 특이적인 단클론 항체를 만들어 면역형광조직염색을 실시한 결과 접종 바이러스와 상관없이 로타바이러스 항원은 융모의 첨단 부위가 보존된 감염 초기에 채취한 융모 첨단 부위 상피세포에서만 국한적으로 관찰되었다.
돼지 혈청형 A 재조합 (G8P[7]) 및 동종 (G5P[7]) 로타바이러스는 소 혈청형 A 로타바이러스 병원성을 확인하기위해 수행한 것과 같은 방법으로 조사한 결과, 재조합 로타바이러스를 접종한 자돈에서는 경미한 설사증상이 관찰되었다. 조직학적으로도 경미한 융모의 위축과 음와의 증식 만이 확인되었다. 분변을 통한 바이러스의 배출과 융모 상피세포에서의 항원의 소재는 각각 오직 감염초기에 채취한 분변 및 소장에서만 관찰되었다. 이와는 반대로 G5P[7] 동종 로타바이러스를 접종한 자돈에서는 설사 및 분변을 통한 바이러스 배출이 감염 1일령부터 실험종료 시까지 확인되었다. 뵹라조직학적인 특징적인 병변은 심한 융모상피세포의 탈락을 비롯 융모의 위축과 융합, 음와 상피세포의 증식, 융모 고유층의 림프구 침윤 및 충혈 등이 있었다. 로타바이러스 항원 양성 세포도 융모의 첨단부위가 보존된 융모상피세포에서 잘 관찰되었다.
Abstract
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The study aimed to determine the enteric virulence of heterologous and reassortant Korean bovine rotavirus strains in the colostrum-deprive (Col-D) calves or piglets, and to confirm the enteric virulence of homologous andd reassortant Korean porcine rotavirus strains in the colostrum-deprived piglet
The study aimed to determine the enteric virulence of heterologous and reassortant Korean bovine rotavirus strains in the colostrum-deprive (Col-D) calves or piglets, and to confirm the enteric virulence of homologous andd reassortant Korean porcine rotavirus strains in the colostrum-deprived piglets by pathological, virological, and molecular biological methods, and eventually to apply these data for developing the vaccines and therapeutic drugs as well as to establish surveillance system and policy of public health against bovine or porcine rotaviruses.
After the inoculation of each reassortant (G6P[7]) and heterologous (G5P[7]) bovine rotavirus strain into Col-D calves or piglets, diarrhea and fecal virus shedding were observed in each calf and piglet at post-inoculation day (PID) 1 and kept to the termination of experiment. The villi of small intestine sampled sequentially from each virus-inoculated calf and piglet showed characteristic desquamation of villous epithelium, villous atrophy and fusion, crypt hyperplasia, lymphoid cell infiltration and congestion of lamina propria. By indirect immunofluorescence assay (IFA) with antibody specific to VP6 protein of rotavirus, regardless of virus strains, antigen-positive cells were detected in the tip of villi of the small intestine sampled early from virus-inoculated animals.
After inoculation of a reassortant (G8P[7]) porcine strain into Col-D piglets, this strain induced mild diarrhea. Histologically, mild villous atrophy with crypt hyperplasia was observed. From the sequentially sampled feces and small intestine, viral RNA and antigen-positive cells were detected during the early infection time by RT-PCR and IFA, respectively. In contrast, a homologous strain, G5P[7], induced severe diarrhea from PID 1 which lasted to the termination of experiment, and istologically, severe villous changes including the desquamation of villous epithelium, villous atrophy and fusion, crypt hyperplasia, lymphoid cell infiltration and congestion of lamina propria. Fecal virus shedding was observed from PID 1 and lasted to the termination of experiment. Viral antigen was detected in the villous epithelium of small intestine taken from the piglets.
목차 Contents
- 용역연구사업 연구결과보고서 ... 1
- 표지 ... 2
- 제출문 ... 4
- 목 차 ... 5
- Ⅰ. 연구결과보고서 요약문 ... 6
- 한글요약문 ... 6
- Summary ... 7
- Ⅱ. 총괄연구개발과제 연구결과 ... 8
- 제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 8
- 제2장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ... 30
- 제3장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ... 33
- 제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 46
- 제5장 총괄연구개발과제의 연구성과 ... 47
- 제6장 기타 중요변경사항 ... 49
- 제7장 참고문헌 ... 49
- 제8장 첨부서류 ... 57
- 총괄연구과제 요약 ... 88
- 끝페이지 ... 90
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