초록 ▼

대장암 발암 과정에서 발현이 증가되어 암 활성을 조절하는 세포 표면 수용체 syndecan-2의 절단(shedding)과 절단된 조각에 의한 새로운 암 활성 조절기전을 규명하였음. 대장암 세포주에서 syndecan-2 조각이 절단되어 분비되었으며, syndecan-2의 절단은 MMP-7에 의해 매개되며, 절단 부위는 N148/L149 아미노산 사이인 것으로 확인되었음. 돌연변이체를 이용한 실험 결과 이 부위가 절단이 되지 않으면 syndecan-2에 의한 대장암 활성 조절 기능이 현저히 저해되는 것을 확인함으로써 syndecan-2

대장암 발암 과정에서 발현이 증가되어 암 활성을 조절하는 세포 표면 수용체 syndecan-2의 절단(shedding)과 절단된 조각에 의한 새로운 암 활성 조절기전을 규명하였음. 대장암 세포주에서 syndecan-2 조각이 절단되어 분비되었으며, syndecan-2의 절단은 MMP-7에 의해 매개되며, 절단 부위는 N148/L149 아미노산 사이인 것으로 확인되었음. 돌연변이체를 이용한 실험 결과 이 부위가 절단이 되지 않으면 syndecan-2에 의한 대장암 활성 조절 기능이 현저히 저해되는 것을 확인함으로써 syndecan-2 절단이 대장암 활성 조절의 주요한 기전임을 확인함. 실제로 절단된 syndecan-2 조각은 대장암 세포의 증식, 이동, anchorage-independent 성장 등과 같은 대장암 활성을 증가시켰음. 또한 비오 틴화된 세포표면 단백질을 이용한 실험 결과 98, 73, 그리고 64 kDa의 단백질이 잘린 syndecan-2 조각과 결합하는 것으로 확인되어 이들이 절단된 syndecan-2 조각의 수용체일 가능성이 매우 높음. 이러한 결과들은 수용체 syndecan-2가 세포 표면에서 MMP-7에 의해 절단되고 절단된 조각은 새로운 암활성 조절 인자로 대장암 활성을 조절함을 시사함.

Abstract ▼

Although elevated syndecan-2 expression is known to be crucial for the tumorigenic activity in colon carcinoma cells, how syndecan-2 regulates colon cancer is unclear. Therefore, we investigated whether shedding of syndecan-2 might play a role in syndecan-2-mediated colon cacner cell activities. Wes

Although elevated syndecan-2 expression is known to be crucial for the tumorigenic activity in colon carcinoma cells, how syndecan-2 regulates colon cancer is unclear. Therefore, we investigated whether shedding of syndecan-2 might play a role in syndecan-2-mediated colon cacner cell activities. Western blotting showed that soluble form of syndecan-2 was detected in the conditioned media from various human colon cancer cells, suggesting constitutive shedding of syndecan-2 in colon cancer cells. MMP-7, but not MMP-2 or MMP-9, enhanced shedding of syndecan-2 into HT-29 conditioned medium, suggesting that MMP-7 mediates syndecan-2 shedding. MMP-7 cleaved recombinant syndecan-2 in the N-terminus at Leucine 149 residue in vitro, confirming that MMP-7 directly mediates shedding of syndecan-2 from colon cancer cells. The substitution of Asn148-Leu149 with Ser148-Ser149 significantly reduced MMP-7-mediated syndecan-2 shedding and subsequently syndecan-2-induced cancer cell migration. In addition, shed syndecan-2 ectodomain per se enhanced colon cancer cell migration, together with increased overall tyrosine phosphorylation and anchorage independence growth on soft agar. Furthermore, overexpression of syndecan-2 enhanced migration and metastatic potential of mouse melanoma cells in mice, but this effect was diminished in Ser148-Ser149 syndecan-2 mutant. Our results also showed that soluble shed syndecan-2 directly interact with 93, 73 and 64 kDa proteins at the cell surface. Taken together, these data suggest that MMP-7 mediates syndecan-2 shedding and shed syndecan-2 plays an important role in the regulation of colon cancer cell.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 3
• 보고서 요약서 ... 4
• 요약문 ... 5
• SUMMARY ... 7
• 연구 성과 실적 및 향후 계획 ... 8
• 참여연구원 현황표 ... 12
• II. 총괄연구과제 연구결과 ... 13
• 1. 연구개발과제의 배경 및 필요성 ... 14
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 17
• 3. 연구개발과제의 추진체계 ... 17
• 4. 연구개발수행 내용 및 결과 ... 18
• 5. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 27
• 6. 향후 연구성과 추진 계획 ... 28
• 7. 연구개발결과의 파급효과 ... 28
• 8. 연구개발결과의 활용계획 ... 29
• 9. 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 29
• 10. 참고문헌 ... 30
• IV. 첨부서류 ... 32
• 끝페이지 ... 33