초록 ▼

5. 최종 연구결과 요약
1. 정제된 백신(146S)의 돼지에서의 면역원성(안전성) 시험 및 공격접종시험
-2종의 국내 분리주 (안동 및 양주지역 분리주)를 이용한 백신주를 이용하여 정제항원으로 백신을 제작
- 두당 2, 5, 20 ug으로 접종하였으며, 항체반응은 항원량이 증가 될수록 항체 형성율이 증가되는 추이를 보였고,
- 2 및 5 ug 접종군에서는 66.6% (2/3)의 방어가 확인되었으며, 20 ug 접종군(3/3)에서는 모두 임상적으로 방어되었음.
2. 백신주의 면역학적 교차 상관성 조사

5. 최종 연구결과 요약
1. 정제된 백신(146S)의 돼지에서의 면역원성(안전성) 시험 및 공격접종시험
-2종의 국내 분리주 (안동 및 양주지역 분리주)를 이용한 백신주를 이용하여 정제항원으로 백신을 제작
- 두당 2, 5, 20 ug으로 접종하였으며, 항체반응은 항원량이 증가 될수록 항체 형성율이 증가되는 추이를 보였고,
- 2 및 5 ug 접종군에서는 66.6% (2/3)의 방어가 확인되었으며, 20 ug 접종군(3/3)에서는 모두 임상적으로 방어되었음.
2. 백신주의 면역학적 교차 상관성 조사
- 국내분리 백신주(O/Andong/SKR/2010)를 이용한 백신은 ME-SA topotype과의 상관성이 인정되었고, Cathay topotype과는 상관성이 낮았음.
- O manisa 접종된 돼지에서 O-SEA(O/Andong/SKR/2010)가 O-ME-SA (O/SKR/2002)보다 더욱 면역학적 상관성이 높게 분석되었음
3. 계대에 따른 백신 종독주 염기서열의 변화와 유전자 마커확인
- 두개의 후보백신 바이러스(AD-P, YJ-P)에서 807aa (VP1)에서 glutamic acid (E)에서 lysine(K)으로 BHK21 세포 계대를 통해 아미노산이 똑 같이 변경됨.
- 두개의 백신 후보바이러스는 RFLP 분석에서 low passage number에서 2개의 작은 분절(0.71, 0.69kb)로 구분되나, high passage number에서 절단되지 않는 1개 (1.4kb) 분절만 확인 가능.
4. 시제백신의 항원량 결정을 위한 면역 및 방어능 시험
- 15 ug 및 10 ug 접종군에서는 100%로 모두 방어하였으며, 10 및 7.5 ug 에서는 모두 방어하였으나 일부 공격바이러스 접종 부위에 병변이 보임.
- 접종 항원은 7.5 ug/ dose 이상 (약 10ug) 의 항원이 백신으로 적절한 항원농도로 확인됨.
5. 이종 바이러스 (O-ME-SA topotype) 접종을 통한 방어능 확인
- 10 ug 항원이 들어간 ISA206 접종돼지의 중화방어항체 등의 면역형성은 높지 않았음
- 그러나, 공격접종 결과 O/SKR/2002 (ME-SA topotype) 바이러스의 공격접종을 통해 모두 방어됨을 확인하였음
- O Manisa 시중백신 접종후 항체형성은 SEA topotype에서 O manisa보다 좀 낮게 형성되었으나, 오히려 O/SKR/2002 (ME-SA topotype)보다 높게 형성됨
6 아쥬반트별 면역원성 및 방어능 조사
- 10ug 항원( O/Andong/SKR 90p)이 포함된 아쥬반트 Carbigen, Emusigen D를 접종한 돼지군과 ISA 201 및 206 아쥬반트를 면역원성 및 방어능을 비교하였음.
- Carbigen의 경우 면역형성과 방어능이 낮았으며, Emulsigen D단독 처리군 보다는 Emulsigen D와 Aluminium hydroxide을 혼합 접종군에서 면역원성 및 방어능에서 좋은 결과를 보였음.
- ISA201과 206은 비슷한 항체 형성율을 보였으나 ISA201에서는 모두 방어되었으나, ISA206에서는 1두가 방어되지 않았다. ISA201에서 1-2주만에 형성되는 항체 형성율은 비교적 느리게 형성되었으나 3주 이후에는 가장 높은 항체 형성율을 보였음.
- Emulsigen D와 Aluminium hydroxide을 혼합 접종군과 ISA201 아쥬반트가 효과적으로 방어됨이 확인됨
7. 오일 백신의 안정성 확인
- 시험백신을 6개월 보존 후 현미경 확인하여 항원의 W/O/W 형으로 안정하게 보존되는 것을 확인함
8. 시험 오일백신의 야외주와 감별진단을 위한 백신접종후 NSP 항체검출
- 시제 백신(15ug, ISA206)을 돼지 5두에 3회 접종하여 NSP ELISA (cedi)를 실시하여 양성항체를 가진 개체는 검출되지 않음

Abstract ▼

Foot-and-mouth disease (FMD) is a highly contagious infectious disease, and the use of vaccines is known to be effective for its prevention. In 2010/2011, there was an epidemic of the South East Asia (SEA) topotype in East Asian countries. We adapted the SEA topotype virus isolated in November 2010

Foot-and-mouth disease (FMD) is a highly contagious infectious disease, and the use of vaccines is known to be effective for its prevention. In 2010/2011, there was an epidemic of the South East Asia (SEA) topotype in East Asian countries. We adapted the SEA topotype virus isolated in November 2010 in Korea in cells to analyze the characteristics of the virus, and evaluate the possibility as a vaccine. After cell culture adaptation, the FMDV particle 146S was purified to develop an inactivated oil vaccine for SEA or other topotypes. To measure its immunogenicity, pigs were inoculated with the experimental vaccine at different concentrations of the antigen. The results indicated that the groups immunized with at least 7.5μg antigen were protected from homologous challenge. The immunized pigs could protect to heterologous virus (ME-SA topotype) challenge. The genetic variations between the two field isolates and the adapted vaccine strains were identified in six amino acids by complete genome sequencing.

목차 Contents

• 연구과제 최종결과보고서 ... 1
• I. 연구배경 및 목표 ... 3
• 1. 연구배경 ... 3
• 2. 연구최종목표 ... 4
• 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 4
• II. 연구방법 및 수행전략 ... 5
• 1. 재 료 ... 5
• 2. 연구전략 및 방법 ... 5
• III. 연구결과 ... 6
• 1. 국내 발생 구제역 바이러스 (2010년 4월, 11월 발생)의 증식성 분석 ... 6
• 2. 구제역 백신후보 바이러스의 계대에 따른 바이러스 역가의 변화 ... 7
• 3. 국내 분리 구제역바이러스를 이용한 시제백신의 방어능 시험 ... 7
• 4. 백신주의 면역학적 교차상관성 조사 ... 8
• 5. 계대에 따른 백신 종독주 염기서열의 변화와 유전자 마커확인 ... 9
• 6. 시제백신의 항원량 결정을 위한 방어능 시험 ... 11
• 7. 시제백신의 이종바이러스에 대한 방어능 시험 ... 14
• 8. 시혐백신의 아쥬반트 별 면역성 및 방어능 시험 ... 17
• 9. 시혐 오일백신의 안정성(보존성) 확인 ... 22
• 10. 시험 오일백신의 야외주와 감별진단을 위한 백신접종후 NSP 항체검출 ... 22
• IV. 연구결과요약 ... 23
• 1. 정제된 백신(146S)의 돼지에서의 면역원성(안전성) 시험 및 공격접종시험 ... 23
• 2. 백신주의 면역학적 교차 상관성 조사 ... 23
• 3. 계대에 따른 백신 종독주 염기서열의 변화와 유전자 마커확인 ... 23
• 4. 시제백신의 항원량 결정을 위한 면역 및 방어능 시험 ... 23
• 5. 이종 바이러스 (O-ME-SA topotype) 접종을 통한 방어능 확인 ... 23
• 6 아쥬반트별 면역원성 및 방어능 조사 ... 24
• 7. 오일 백신의 안정성 확인 ... 24
• 8. 시험 오일백신의 야외주와 감별진단을 위한 백신접종후 NSP 항체검출 ... 24
• V. 고 찰 ... 24
• VI. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 26
• VII. 연구사업 추진상 문제점 및 건의사항 ... 27
• VIII. 주요연구과제 변경사항 ... 27
• IX. 참고자료 ... 27
• X. 영문초록 ... 28
• 끝페이지 ... 29