초록 ▼

◯ 연구결과
1. 70057균주의 배양액 추출액을 pH처리, charcoal, 음이온, 양이온, HP2O, MCI, gel column chromatoraphy 및 HPLC 등을 시행하여 α-Glucosidase inhibitor 물질을 분리하여 UV spectrum을 조사하였고 또한 FAB-mass spectrum을 통하여 분자량을 확인하였다.
2. 생약에서의 α-Glucosidase inhibitor 물질분리 정제는 달개비에서 순수한 물질 9 종류를 얻었으나 그 중 α-glucosidase 활성을 저해하는 물질 5종류

◯ 연구결과
1. 70057균주의 배양액 추출액을 pH처리, charcoal, 음이온, 양이온, HP2O, MCI, gel column chromatoraphy 및 HPLC 등을 시행하여 α-Glucosidase inhibitor 물질을 분리하여 UV spectrum을 조사하였고 또한 FAB-mass spectrum을 통하여 분자량을 확인하였다.
2. 생약에서의 α-Glucosidase inhibitor 물질분리 정제는 달개비에서 순수한 물질 9 종류를 얻었으나 그 중 α-glucosidase 활성을 저해하는 물질 5종류 중 4 종류는 이미 국내 특허 출원했으며 나머지 한종류 (GI-12; 6.7mg)를 순수하게 분리 정제하였다.
달개비의 GI-12 물질의 화학구조를 규명하기 위해 ¹H-NMR, ¹³C-NMR, DEPT, Homo-COSY, Hetero-COSY을 통하여 각 탄소의 chemical shift와 proton의 chemical shift‘ coupling constant 등을 관찰하였고， FAB-MS spectrum으로 분자량을, 물리화학적 성질을 기초로 하여 화합물의 성상을 결정 하였다. GI-12 화합물은 분자량 356의 [M+H]⁺ fragrmentation ion이 관찰되었다. 정확한 분자식을 구하기 위해 HRFAB-MS을 통하여 C₁₃H₂₆O₁₀N의 분자식을 얻었다. 기기분석 data을 종합해 본 결과 GI-12는 7-O-β-D-Glucopyranosyl-α-homonojirimycin (Glu-HNJ)으로 동정 하였다.
3. 해당화 200g을 물로 추출하여 α-glucosidase inhibitor 능을 지닌 tannin계 물질 16mg을 순수 분리 정제하였다.
4. l-deoxynojirimycin을 함유한 상백피 추출물(BNM- R), 달개비 메탄올 추출물, 달개비 추출액에서 분리한 CDC 시료 및 상백피를 기본성분으로 하고 항당뇨 효과를 보이는 천연물을 복합 처방하여 시료 조제하였다.
5. 상백피와 달개비추출물의 ICR mouse에 대한 독성시험을 실시한 결과 독성학적인 문제점이 관찰되지 않았다.
6. 동일 시료에 의한 수면에 미치는 영향, 자발 운동량에 미치는 영향, 장관 수송능에 미치는 영향, 위액 분비에 미치는 영향을 조사한 결과 유의성 있는 영향을 미치지 않았다.
7. 달개비 추출물, 상백피 추출물, CDC에 대한 rat에서의 효능시험 결과 정상 rat와 당뇨 rat에 모두 우수한 혈당감소 효과를 나타내었다. 이 결과를 토대로 조제한 2차 시료 결과 제품 개발의 가능성을 나타내었다.

Abstract ▼

α-Glucosidase inhibitors delay carbohydrate absorption and have been proposed as adjunctive therapy for diabetes mellitus. We have isolated IDF-70057 qompounds having potent α-glucosidase inhibitory activities from culture extract of 70057 strain. Their molecular weights were 289 and 245, respective

α-Glucosidase inhibitors delay carbohydrate absorption and have been proposed as adjunctive therapy for diabetes mellitus. We have isolated IDF-70057 qompounds having potent α-glucosidase inhibitory activities from culture extract of 70057 strain. Their molecular weights were 289 and 245, respectively. From the water extract of Commelina communis five compcunds were isolated ; 2,5-dihydroxymethyl 3,4-dihydroxypyrrolidine(GI-1), 1-deoxymannojirimycin(GI-2), 1-deoxynojirimycin(GI-3), homonojirimycin(GI-4), 7-O-β-D-glucopyranosyl-α-homonojirimycin(GI-12). The isolation of GI-4 and G-12 compounds is the first report in natural herbs. Prescriptions extracted from medicinal herbs were orally administered to normal and diabetic rats. As a result, plasma blood glucose levels were reduced to normal range. Then, mixed prescriptions containing extract of mulberry bark (IDS) were prepared, orally administered to rats. IDS reduced effectively the postprandial increase in plasma blood glucose levels when compared with control. No indications of toxicities of all samples were noted. The pharmacological actions appeared unaffected.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 3
• 요약문 ... 4
• Summary ... 7
• CONTENTS ... 8
• 목 차 ... 9
• 제 1 장 서론 ... 10
• 제 2 장 국내ㆍ외 기술개발 현황 ... 12
• 제 3 장 연구 개발 수행내용 ... 14
• 제 1 절 IDF-70057균주의 α-Glucosidase Inhibitor 분리정제 ... 14
• 제 2 절 생약으로부터 α-Glucosidase Inhibitor물질 분리정제 ... 16
• 제 3 절 항당뇨 시료 조제 ... 16
• 제 4 절 항 당뇨 시료에 대한 급성 및 아급성 시험 ... 18
• 제 5 절. 항당뇨 시료의 일반 약리 시험 ... 19
• 제 6 절. 항당뇨 시료의 in vivo 효능 검색 ... 22
• 제 4 장 연구 개발 수행 결과 및 고찰 ... 23
• 제 1 절 IDF-70057균주가 생산하는 α-GI 물질 분리정제 ... 23
• 제 2 절 생약에서의 α-GI 물질 분리 정제 및 구조 분석 ... 26
• 제 3 절 항당뇨 시료 조제 ... 37
• 제 4 절 당뇨 시료에 대한 급성 및 아급성 시험 ... 39
• 제 5 절. 항당뇨 시료의 일반 약리 시험 ... 41
• 제 6 절. 항당뇨 시료의 in vivo 효능 검색 ... 47
• 제 5 장 결론 ... 59
• 제 6 장 연구 개발 목표 달성도 및 대외 기여도 ... 61
• 제 7 장 연구 개발 결과의 활용 계획 ... 63
• 최종보고서 요약(초록) ... 64
• 제 8 장 참고문헌 ... 66
• 끝페이지 ... 66