초록 ▼

○ 연구결과
1. 황토국화 추출물의 생물학적 활성규명
연구에 사용된 국화를 명확히 하기위하여 국화 ITS 부위의 염기서열분석 결과를 바이오스템으로부터 수령하여 alignment를 수행한 결과 Chrysanthemum vestitum (100%),Chrysanthemum lavandulifolium (100%), Chrysanthemum x morifolium (99%)로 나타났다. 따라서, 시험에 사용된 황토국화는 Chrysanthemum vestitum 으로 식품 및 화장품 원료로의 사용에 적합하였다.
(1) 항산

○ 연구결과
1. 황토국화 추출물의 생물학적 활성규명
연구에 사용된 국화를 명확히 하기위하여 국화 ITS 부위의 염기서열분석 결과를 바이오스템으로부터 수령하여 alignment를 수행한 결과 Chrysanthemum vestitum (100%),Chrysanthemum lavandulifolium (100%), Chrysanthemum x morifolium (99%)로 나타났다. 따라서, 시험에 사용된 황토국화는 Chrysanthemum vestitum 으로 식품 및 화장품 원료로의 사용에 적합하였다.
(1) 항산화 작용 및 면역세포 탈과립화 억제
황토국화의 생물학적 활성 및 유효성분을 규명하기 위하여 면역세포 탈과립화 억제 평가 결과 hexane층에서 매우 우수하였고, ORAC측정법을 통하여 항산화 활성을 평가한 결고 EA층에서 가장 우수한 활성이 나타났다.
(2) 면역세포 탈과립화 억제를 통한 항알러지 효과
hexane층에서 면역세포 탈과립화 억제 및 systemic anaphylaxis 시험결과 매우 우수한 효과가 나타났다. 그러나, hexane층에서 유효성성분 분리시 유효성분의 활성이 나타나지 않아, 항산화가 우수한 EA층으로부터 지표성분을 분리하였다.
(3) EA층으로부터 소분획을 실시하여 이 중 가장 우수한 활성이 나타난 E1 소분획으로부터 amyrin성분을 분리하였다. 또한 luteolin의 항산화 활성이 우수하여 alpha-amyrin, beta-amyrin과 함께 지표성분으로 설정하여 표준추출공정을 개발하였다.
(4) IgE 억제를 통한 피부 알러지 보호
IgE 생성억제를 측정하기 위하여 비만세포 (RBL2HB)에 황토국화 추출물을 첨가한 결과 세포탈과립화가 억제됨을 확인하였다. 국화 꽃 추출물 EA층, 125ug/ml에서 약 61% 억제, 줄기 추출물Hexane층 125ug/ml에서 약 93% 억제 효과를 타냄. 따라서 hexane층이 면역세포 탈과립화억제효과, EA 층에서 항산화효과가 있었다. 따라서 황토국화 추출물에 함유되어 있는 성분은 비극성 방향성 화합물일 것으로 추정되며 약 93%의 탈과립화 억제효과가 나타났다.
(5) Systemic anaphylaxis 억제 효과
Mouse model에서 anaphylaxis를 유발한 쥐에 황토국화 추출물을 복강주사하였을 때 anaphylaxis가 억제됨을 확인하였으며, 혈청에서도 histamine 분비가 억제됨을 확인하였다.
2. 황토국화 추출물의 생산공정 연구
(1) 황토국화 추출물 생산공정 연구
황토국화의 활성 연구 결과로부터 아토피의 유효성을 확인하여 이를 근거로 황토국화로부터 아토피에 효과가 있는 유효 추출물을 최대한 추출하였다. 그 방법으로 황토국화의 건조전생줄기를 스팀으로 증류하여 1차적으로 오일을 추출분리하고 또한 오일과 함께 증류된 에센셜오일이 함유된 증류수 및 잔사를 추출한 추출물을 생산하는 공정을 설정하였다. 또한 황토국화를 건조와 생초로 나누어 증류 추출공정을 적용하여 에센셜오일, 에센셜오일을 함유하는 증류수, 황토국화 추출물의 생산 수율을 비교한 결과 건초 100kg에서는 에센셜오일이 증류되지 않았으며, 증류수에서도 에센셜오일이 함유되지 않았으며, 추출물의 성상 및 추출 수율도 150kg으로 매우 차이가 있었다.
(2) 최적 생산공정
따라서 생초 황토국화 100kg으로 스팀 증류법을 이용하여 에센스 오일 200ml, 에센셜오일을 함유하는 증류수 190kg을 얻었으며, 또한 잔사를 추출한 추출물을 220kg을 추출하였다.
따라서, 본 생산을 통하여 최종적으로 에센스 오일, 황토국화 추출물, 황토국화 증류수를 생산할 수 있었으며, 이를 specification을 설정하고 표준 규격화를 하였다.
3. 국화로부터 아토피 화장품 개발 및 효력/ 독성 전임상
(1) 국화추출물 및 시제품의 단회 투여 독성 평가
본 시험에서 시험물질 투여와 관련된 어떠한 독성 증상도 관찰되지 않았으며 LD50값은 50㎖/㎏을 훨씬 상회할 것으로 생각되었다. 이상의 결과에서 황토국화 추출물 및 시제품은 수컷 마우스에 의한 경구투여를 통한 단회 투여 독성시험에서 안전한 물질인 것으로 판단되었으며, 따라서 식품 및 화장품 소재로의 이용에 적합할 것으로 사료된다.
(2) 안점막 시험
안검사에 있어서는 시험물질 투여 후 1, 24, 48, 72, 96 시간 및 7일째에 관찰을 실시하였는데, 모든 동물에서 투여 후 7일째까지 각막, 홍채, 결막에서 모두 이상소견이 전혀 관찰되지 않았다.
(3) 국소독성시험
시험물질인 국화추출물을 New Zealand White계 토끼 등 피부의 찰과ㆍ비찰과부위에 경피도포한 결과, 시험물질에 기인한 일반증상의 변화는 관찰되지 않았으며 사망동물도 없었다. 또한, 시험물질 적용 후 7일째에는 홍반과 가피형성정도가 대체적으로 뚜렷한 회복 경향을 나타내었으며 찰과와 비찰과피부 모두에서 부종은 관찰되지 않았다.
(4) 면역세포 탈과립화 억제 평가결과, hexane층에서 억제효과가 뚜렷하였으나, 유효성분규명시 소분획 및 추출물에 비해 성분에서 효능이 나타나지 않아, 항산화 효과가 뚜렷한 EA층으로부터 지표성분을 분리하여 추출공정을 개발하였다. (amryn성분과 luteolin성분을 지표성분으로 설정)
(5) 개발된 추출공정으로부터 지표성분에 대한 분석으로 통하여 표준화/규격화 하였다.
(6) 표준화 원료를 이용하여 아토피 화장품 시제품을 생산하고, 이에대한 간이임상을 실시한 결과 대조군은 도포전 26.15±5.06점, 도포 4주후 23.08±4.80으로 감소하였고, 실험군인 HGA (국화추출물 함유)의 경우 도포전 27.33±4.58, 도포 4주후 20.00±5.35으로 감소하였다.
대조군과 실험군 모두 유의성 있는 감소를 나타냈으나, 실험군이 대조군에 비해 매우 유의성있게 나타났다.

Abstract ▼

1. Biological examination of extracts from mud chrysanthemum
(1) Anti-oxidative activity
We used ORAC method for investigating for anti-oxidative effect of mud chrysnathemum. As a result, anti-oxidative effects were increased on treatment of EtOAc and Hexane layers.
(2) Identification of mu

1. Biological examination of extracts from mud chrysanthemum
(1) Anti-oxidative activity
We used ORAC method for investigating for anti-oxidative effect of mud chrysnathemum. As a result, anti-oxidative effects were increased on treatment of EtOAc and Hexane layers.
(2) Identification of mud chrysanthemum
Sequence analysis of ITS part was carried out to 1 kind of samples, as a result, they had a homology with Chrysanthemum vestitum (100%), Chrysanthemum lavandulifolium (100%), Chrysanthemum x morifolium (99%)), respectively.
(3) Anti-allergic activation by suppression of IgE
To investigate the suppression of IgE production, extracts from Chrysanthemum lavandulifolium were treated to mast cell (RBL2H3). As a result, degranulation was suppressed by extracts from Chrysanthemum lavandulifolium
Especially, hexane layer showed the highest activitiy (93%) and these results suggested that effective ingredient in extracts from Chrysanthemum lavandulifolium might be nonpolar compound.
(5) Systemic anaphylaxis
When extracts from Chrysanthemum lavandulifolium was administered to anaphylactic shock-induced mice by IP, anaphylaxis was attenuated and histamine release in serum was also decreased.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 요약문 ... 3
• SUMMARY ... 12
• CONTENTS ... 16
• 목차 ... 17
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 18
• 제1절 개발배경 ... 19
• 제2절 기술개발(제품)의 중요성 및 전망 ... 22
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 24
• 제1절 국내연구동향분석 ... 24
• 제3장 연구개발 수행 내용 및 결과 ... 29
• 제1절 황토국화 추출물의 생물학적 활성규명 ... 29
• 제2절 황토국화 시제품의 생물학적 활성규명 ... 48
• 제3절 황토국화 추출물의 성분분석 연구 ... 55
• 제4절 황토국화 추출물의 생산공정 표준화 및 제제화 연구 ... 65
• 제5절 황토국화 추출물 및 시제품의 독성 전임상 ... 80
• 제6절 황토국화 추출물 적용 제품의 효력(간이임상) ... 104
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 130
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 131
• 1. 개발 결과 추진전략 ... 131
• 2. 연구개발 결과 활용현황 및 계획 ... 133
• 제6장 참고문헌 ... 141
• 끝페이지 ... 146