초록 ▼

○ 연구결과
본 연구진의 연구 결과로 우선 현재 농장에서 만연하고 있는 뉴캐슬 바이러스가 기존에 사용하고 있는 백신 strain과 유전적으로 변형되어가고 있음을 발견하였다. 이는 기존의 뉴캐슬 백신 strain과 현재 농장에서 질병을 일으키고 있는 wild type과에 유전자적인 차이가 있으며 이는 백신의 효율성에 문제가 있을 수 있음을 알았고, 새로운 백신 strain의 도입이 필요하다는 것을 알게 되었다. 또한 뉴캐슬 유전자 단백질의 특정부위를 발현하여 이를 이용한 진단법이 유용하게 사용될 수 있음을 알았고, 유용 미생물을

○ 연구결과
본 연구진의 연구 결과로 우선 현재 농장에서 만연하고 있는 뉴캐슬 바이러스가 기존에 사용하고 있는 백신 strain과 유전적으로 변형되어가고 있음을 발견하였다. 이는 기존의 뉴캐슬 백신 strain과 현재 농장에서 질병을 일으키고 있는 wild type과에 유전자적인 차이가 있으며 이는 백신의 효율성에 문제가 있을 수 있음을 알았고, 새로운 백신 strain의 도입이 필요하다는 것을 알게 되었다. 또한 뉴캐슬 유전자 단백질의 특정부위를 발현하여 이를 이용한 진단법이 유용하게 사용될 수 있음을 알았고, 유용 미생물을 transfer vector로 이용하여 이를 경구 투여시 뉴캐슬에 대한 항체를 형성함으로써 이를 이용한 경구 백신의 가능성을 모색하였다

Abstract ▼

Newcastle Disease Virus (NDV) causes lethal disease in poultry. Paramyxoviruses initiate infection by attaching to cell surface receptors and fusing viral and cell membranes. Viral attachment proteins, hemagglutinin-neuraminidase (HN), hemagglutinin (HA), or glycoprotein (G), bind receptors while fu

Newcastle Disease Virus (NDV) causes lethal disease in poultry. Paramyxoviruses initiate infection by attaching to cell surface receptors and fusing viral and cell membranes. Viral attachment proteins, hemagglutinin-neuraminidase (HN), hemagglutinin (HA), or glycoprotein (G), bind receptors while fusion (F) proteins direct membrane fusion.NDV infection is mediated by the hemagglutinin-neuraminidase (HN) protein which is responsible for attachment to cellular receptors.
The present study was conducted to investigate the genetic profile of two prevalent avian pathogens in Korea namely, Newcastle disease virus and Infectious bursal disease virus. Two farms located in Yeongi-gun, Chungnam were selected for this study. The two viruses were isolated from various organs (spleen, trachea, bursa of Fabricius) of deceased chickens that showed clinical symptoms of Newcastle Disease or Infectious bursal disease like swelling and congestion of the F bursa, facial edema, lacrimation, greenish yellow diarrhea as well as pathological signs like airsacculitis, haemorrhages in the intestines and so on. For analysis of NDV and IBDV, a 466 and 435 base pair fragments corresponding to the HN and VP2 regions which are highly conserved among related strains of NDV and IBDV, respectively, were amplified by RT-PCR and analyzed by sequencing. Comparison of the VP2 region showed a 99.3% homology between the Korean IBDV isolate and the BJ836-attenuated vaccine strain. In contrast, the HN region of the Korean NDV isolate only has an 83 to 84% homology with the vaccine strains.
We also developed an ELISA-based protocol using recombinant modified-NDV HN protein, composedof the HN antigenic site and conserved region. This protein was derived from pET43-1a vector containing a 453 nucleotide fragment encoding the NDV HN (NDV HN 6982 nt - 7344 nt, Genbank Accession number 3386504).Protein purification was facilitated by His-Tag affinity chromatography and confirmed by western blot using anti-HIS antibody and polyclonal IgG obtained from chicken serum vaccinated by NDV LaSota strain.Finally, we successfully detected anti-NDV antibodies in field collected sera from fowls with recent history of the disease using this new NDV ELISA protocol.
As the alternative trials of NDV vaccine development, we also used two intracellular organisms, Lactobacillus casei and Salmonella typhimurium, as the transfer vector. We expressed HN, F and N proteins of NDV and inoculated those recombinant bacteria through oral route and tested their immune responses against NDV. Birds inoculated produced antibodies against NDV.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 요약문 ... 3
• SUMMARY ... 5
• CONTENTS ... 6
• 제 1 장 연구개발과제의 개요 ... 7
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 14
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 15
• 1. 현재 우리나라에서 발병하고 있는 뉴캐슬 바이러스의 유전자적 특성 및 기존의 백신 strain과의 비교 ... 19
• 2. NDV 바이러스의 유전자를 이용한 ELISA 방법 개발 ... 31
• 3. 경구백신용 뉴캐슬 백신의 개발 연구 ... 54
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 75
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 77
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 79
• 제 7 장 참고문헌 ... 80
• 끝페이지 ... 84