초록

○ 연구결과
- 발아대두 동충하초 성분 LC/MS/MS 분석 조건 확립 및 유용기능물질 프로파일링 및 구조분석
- 발아대두 동충하초 기원 물질 (CGNMⅠ, CGNMⅡ, CDGM, CGLM) 구조분석 및 생리활성(항산화 효과, 항염증 효과, 항암 효과, 항알러지 효과) 확인

Abstract ▼

IV. Results
1. The estabilshment of GSC mycellia master/ working cell bank
C. militaris mycellia was cultured on the PDA media for 15 days. We speculated the growth rates of C. militaris mycellia by measuring the diameters.
2. The standardization of culture condition
The stardard raw mat

IV. Results
1. The estabilshment of GSC mycellia master/ working cell bank
C. militaris mycellia was cultured on the PDA media for 15 days. We speculated the growth rates of C. militaris mycellia by measuring the diameters.
2. The standardization of culture condition
The stardard raw materials (soybeans) and C. militaris mycellia was cutured and its active components were tested on cancer cell lines for establishing the standard culture condition.
3. The standardization of manufacturing condition
The automatic program was used for manufacturing raw materials without affecting the biological activity of the active compounds by setting constant temperature and incubation time.
4. The determination of optimal ratio of active compounds of GSC according to the cultivation periods.
The contents of active compounds from GSC were most abundant between 1 and 2 weeks, but decreased as cultivation time becomes longer.
5. Identification of novel 4 isoflavonoids from GSC
We found novel isoflavonoids from GSC.
6. The anti-inflammatory activities of GSC
GSC inhibited LPS-induced MMP-9 activity in a dose-dependent manner without affecting cell viability.
7. The anti-inflammatory activities of novel isoflavonoids (CDGM, CGLM, CGNM I and CGNM II)
Novel isoflavonoids inhibited the release of TNF-a in LPS-stimulated RAW 264.7 cells without affecting its cell viability.
8. The anti-allergic activities of novel isoflavonoids (CDGM, CGLM, CGNM I and CGNM II)
The COX-2 protein expression level was determined using immunoblot analysis. CGLM inhibited COX-2 protein expression in PMA + ionomycin stimulated RBL 2H3 cells. Using luciferase assay, we found that the activation of IL-13 promoter was decreased by CGLM.
The IL-8 expression was decreased by CDGM and CGLM in NCI-H292 cells.
9. The assessment of immunmodulatory activities of GSC on respiratory systems The estabilshment of immunmodulatory activities of GSC through evaluating the expression of chemokines and cytokines
10. Screening target molecules of active compounds from GSC
GSC inhibited the activation of ERK, JNK, AP-1 and NF-IL6.
11. The investigation of the regulatory mechanism on immunmodulatory activities of GSC on respiratory systems.
GSC induced the expression of HBD-4, SP-A, MCP-1, Muc 5A and ICAM-1. We investigated the signalling pathway that affects the SP-A expression
12. The investigation of the receptor and lipid raft that affects the cellular activity.
We published Molecular immunology (2010, Vol. 127: 55-61)(12) that explains the effect of GSC on the expression of IL-8 through regulating cellular signalling pathways.
13. The effect of GSC on signalling pathway and the activation of transcription factors
CDGM affects SP-A expression through affecting the activation of ERK, JNK, p38 MAP kinase and NF-kB.
14. the immune tolerance of novel compounds from GSC
The repetitive administration of High-High concentration of CDGM decreased SP-A expression that may be due to immune tolerance.
15. The establishment of optimal condition for the biological activity.
The repetitive administration of los concentration of CDGM was effective.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 요약문 ... 3
• SUMMARY ... 9
• CONTENTS ... 14
• 목차 ... 17
• 제 1 장 연구개발과제의 개요 ... 20
• 1. 연구개발 목적 ... 20
• 2. 연구의 필요성 ... 20
• 3. 연구개발 범위 ... 23
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 24
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 26
• 제 1 절 발아대두 동충하초 균사체 Master/working cell bank 구축 ... 26
• 제 2 절 발아대두 동충하초 배양조건 최적화 ... 27
• 제 3 절 배양공정의 표준화 ... 28
• 1. 배양 기간에 따른 생리 활성 성분 최적 함량 비율 결정 ... 28
• 2. 발아 대두 동충하초의 배양 시간별 최적 항산화 효과 검정 ... 30
• 제 4 절 원료 생산공정 표준화 및 동충하초 엑세스제조 최적조건 확립 ... 31
• 1. 원료 생산공정 표준화: 건조/ 추출/ SD 및 과립화 포장 ... 31
• 2. 동충하초 엑세스제조 최적조건 확립 ... 31
• 제 5 절 품질/ 안전관리 항목 ... 32
• 제 6 절 QC 공정도에 의한 관리 ... 32
• 제 7 절 발아 조건별 생리 활성 성분 최적 함량 비율 결정 ... 33
• 제 8 절 발아 대두 동충하초의 배양 시간별 최적 항산화 효과 검정 ... 38
• 제 9 절 Bio newtraceutical 개발 ... 39
• 1. 발아대두 동충하초의 효소화공정 ... 39
• 2. 원료의 안전 및 안정성 검증 ... 40
• 제 10 절 제품개발 ... 43
• 1. 제품개발에 앞서 다음과 같은 사업화 전략을 수립한 제품 ... 43
• 2. 제품개발 ... 43
• 제 11 절 발아대두 동충하초 유래 생리활성물질의 분리 조건 확립 ... 44
• 제 12 절 발아대두 동충하초 유래 생리활성물질로 추정되는 화합물의 구조 결정 ... 46
• 1. LC/MS/MS 분석을 통해 발아대두 동충하초에서 생리활성물질로 추정되는 4개 화합물을 1D, 2D-NMR과 FAB-MS를 이용하여 구조 분석 및 결정 ... 46
• 2. 4가지 생리활성물질로 추정 되는 화합물의 구조 결정 완료 ... 47
• 3. 4가지 생리활성물질로 추정되는 화합물의 이화학적 특성 ... 47
• 제 13 절 발아대두 동충하초 추출물질의 효능 ... 49
• 1. 대식세포에서의 항염증 효과 ... 49
• 2. 항암효과 ... 51
• 3. 대사성질환 표적인자인 PPAR를 타깃으로 하는 동충하초 추출물질들의 대사조절기능후 보인자 탐색 ... 52
• 제 14 절 발아대두 동충하초에서 생리활성물질로 추정되는 4개 화합물 CGNMⅠ, CGNMⅡ, CDGM, CGLM의 효능 ... 53
• 1. 항염증효과 ... 53
• 2. 대사성질환 표적인자인 PPAR를 타깃으로 하는 동충하초 추출물질들의 대사조절기능후보 인자 탐색 ... 55
• 3. 폐암세포에서의 항암 효과 ... 55
• 4. 비만세포에서 항알러지 효과 ... 56
• 5. 호흡기상피세포에서 항알러지 효과 ... 57
• 제 15 절 발아대두 동충하초의 호흡기 점막면역강화 기능성 평가 ... 58
• 1. 발아대두 동충하초 추출물을 이용하여 호흡기 점막 기능 및 면역강화 평가를 위한 모델 구축 ... 58
• 2. 발아대두 동충하초에서 분리/정제된 유용물질을 이용한 호흡기 점막기능 및 면역강화평가와 작용기전 연구 ... 61
• 3. 발아대두 동충하초 유래 효능지표물질의 면역조절효능 극대화 및 활용최적화 연구 ... 66
• 제 16 절 아토피 피부염에 대한 발아대두 동충하초 및 발아현미 상황버섯의 치료효과 임상 시험 보고서 ... 72
• 1. 시험배경 및 목적 ... 72
• 2. 시험대상 및 방법 ... 73
• 3. 결과 ... 75
• 4. 고찰 및 결론 ... 80
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 82
• 제 1 절 목표달성도 ... 82
• 제 2 절 관련 분야에의 기여도 ... 85
• 제 5 장 연구개발 성과 및 성과활용 계획 ... 86
• 제 1 절. 연차별 연구성과 목표 및 성과 ... 86
• 제 2 절. 실용화산업화 계획 ... 98
• 제 3 절 성과 활용 계획 ... 98
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 99
• 제 7 장 참고문헌 ... 100
• 끝페이지 ... 102