초록 ▼

○ 연구결과
목장원유와 신생아 및 성인에서 분변을 채취하여 2173개의 젖산균을 분리하였고, 37℃에서 24시간 배양하여 응고된 균주가 각각 1,042개 균주이었다. 비타민 K₂ 생산 균주를 선발하기 위하여 TLC에서 비타민 K₂ 양성을 보인 167개 균주를 선발하였고, HPLC 분석을 통해 13종의 젖산균을 선발하였다. 선발된 젖산균을 현미경관찰, Gram stain, 당 발효실험 및 16S rRNA 염기서열 등의 일련의 생화학적,유전학적 실험을 통하여 균을 동정하였다. 산 생성 속도와

○ 연구결과
목장원유와 신생아 및 성인에서 분변을 채취하여 2173개의 젖산균을 분리하였고, 37℃에서 24시간 배양하여 응고된 균주가 각각 1,042개 균주이었다. 비타민 K₂ 생산 균주를 선발하기 위하여 TLC에서 비타민 K₂ 양성을 보인 167개 균주를 선발하였고, HPLC 분석을 통해 13종의 젖산균을 선발하였다. 선발된 젖산균을 현미경관찰, Gram stain, 당 발효실험 및 16S rRNA 염기서열 등의 일련의 생화학적,유전학적 실험을 통하여 균을 동정하였다. 산 생성 속도와 비타민 K₂ 함량을 감안하여 4종의 젖산균을 선발하였고 발효유의 종균으로서 적합한지의 여부를 검증하기 위하여 젖산균의 생장, 항생제 15종에 대한 내성시험, API ZYM kit를 이용한 효소활성 시험, 0.3% oxgall 첨가 배지에서의 담즙내성 시험, pH 내성 시험, 식중독균에 대한 항균력 시험을 실시하였다.
한편, 4종의 젖산균 중 담즙내성이 약한 Streptococcus macedonicus 301 균주와 비타민 K₂ 함량이 낮은 E. durans 581균주를 배제하고 L. fermentum 272 균주와 S. macedonicus 351 균주를 대상으로 탄소원, 질소원, 미량원소별로 비타민 K₂ 함량을 측정하여 최적 생산조건을 확립하였다.
Lactobacillus fermentum 272와 Streptococcus macedonicus 351 이용한 발효유의 세포증식효과는 식품 Positive control인 대두추출물보다는 세포증식 면에서 다소 떨어졌으나, 농도 전반에 걸쳐 세포증식 경향을 확인할 수 있었다. ALP 활성 역시 대두추출물보다 다소 낮은 값을 나타냈지만 비타민 1,25(OH)2D3 와는 비슷한 경향을 보였고 시판발효유보다는 다소 높은 값을 나타내었다. Lactobacillus fermentum 272와 Streptococcus macedonicus 351를 이용한 발효유 모두 온도 및 pH의 변화에서 ALP 효소 활성도를 유지하였다. 비타민 K2 함량이 높은 Lactobacilus fermentum 272 균주는 산생성이 낮음에 따라 상업혼합균주인 ABT-D 균주와 50:50으로 혼합하여 제조된 발효유와 L. fermentum 272 균주,S. macedonicus 351 균주, ABT-D 균주(35:35:30비)혼합 균주를 이용하여 제조공정을 설정하였고, 여기서 얻어진 발효유가 비타민 K₂ 함량이 높은 발효유를 생산하였다. 이화학적 특성과 동물모델을 이용한 발효유의 골 강화 효능평가 실험을 실시한 결과 Lactobacilus fermentum 272와 ABT-D 균주를 50:50으로 혼합 배양한 발효유에 vitamin D3 0.1㎍/랫트 kg 첨가한 제품이 골강화 효과가 있는 가능성이 있는 것으로 나타났다.

Abstract ▼

V. Results Achievements and Their Application Plans
Lactic acid bacteria for vitamin K₂ production obtained from this study would contribute to strengthen international competitiveness as well as import substitute effect. Also, results of this study could be industrialization through

V. Results Achievements and Their Application Plans
Lactic acid bacteria for vitamin K₂ production obtained from this study would contribute to strengthen international competitiveness as well as import substitute effect. Also, results of this study could be industrialization through a technology transfer to participated company. The result of this study has applied 2 patents and presented 2 times and in publishing 2 papers in the Korean journal of food science of animal resources. Especially this presentation received excellent prize in the 43th annual meeting of Korean Sdciety of Food Science of Animal Resources.
To commercialize obtained lactic acid bacteria, freeze dried powder type product need to be developed and also activity should be sustained. When we obtain satisfied product, company could start to manufacture the commercial product. So we are planning to cooperate with company until company can produce commercial product.