보고서 정보
주관연구기관 |
강원대학교 Kangwon National University |
연구책임자 |
김명조
|
참여연구자 |
박종혁
,
윤정란
,
양금봉
,
최은영
,
김명옥
,
사여진
,
김주석
,
이예지
,
한혜민
|
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2014-03 |
과제시작연도 |
2013 |
주관부처 |
농촌진흥청 |
연구관리전문기관 |
농촌진흥청 Rural Development Administration |
등록번호 |
TRKO201400030039 |
과제고유번호 |
1395031372 |
사업명 |
농축산물부가가치향상 |
DB 구축일자 |
2015-07-25
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초록
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Ⅳ.연구개발결과
○ 리큐르의 조성과 항산화 활성검정
-10가지 약선 재료를 혼합하여 제조한 리큐르의 페놀성 및 플라보노이드 화합물 함량분석,전자공여능,환원력을 측정하여 각각의 리큐르의 항산화 활성 확인하였음.총 페놀성 화합물의 함량은 리큐르 B에서 가장 높은 7.69±0.05mg/g으로 나타났으며,리큐르 A와 C에 서도 각각 7.55와 7.53mg/g으로 나타나 큰 함량 차이를 보이지 않았음.반면,플라보노이드 함량에선 리큐르 B에서 6.66±0.12mg/g으로 리큐르 A(3.06±0.16 mg/g), C(2.31±0.07
Ⅳ.연구개발결과
○ 리큐르의 조성과 항산화 활성검정
-10가지 약선 재료를 혼합하여 제조한 리큐르의 페놀성 및 플라보노이드 화합물 함량분석,전자공여능,환원력을 측정하여 각각의 리큐르의 항산화 활성 확인하였음.총 페놀성 화합물의 함량은 리큐르 B에서 가장 높은 7.69±0.05mg/g으로 나타났으며,리큐르 A와 C에 서도 각각 7.55와 7.53mg/g으로 나타나 큰 함량 차이를 보이지 않았음.반면,플라보노이드 함량에선 리큐르 B에서 6.66±0.12mg/g으로 리큐르 A(3.06±0.16 mg/g), C(2.31±0.07mg/g)에 비하여 두 배 가량 많은 함량이 나타났음.리큐르의 전자공여능은 총페놀성 화합물 및 플라보노이드의 함량이 가장 많았던 리큐르 B(IC50=43.21μg/ml)에서 가장 높았으며,리큐르 A,C순(IC50=91.06,190.76μg/ml)으로 나타냄.리큐르 A,B,C의 환원력은 200μg/ml의 농도에서 각각 0.37±0.01,0.73±0.05,0.26±0.02로 리큐르 B의 흡광도가 가장 높게 나타남.이는 리큐르 B가 Fe3+/ferricyanide를 Fe2+로 가장 많이 전환시켜 다른 리큐르에 비해 비교적 높은 환원력을 나타냄.
○ 리큐르의 지표 성분 분석
-리큐르 3종 내 함유되어있는 유효성분들을 확인하고자 농축된 리큐르를 1.0mg/ml의 농도로 측정하여 지표성분 확인함.1차년도에 리큐르 B에서 리큐르 A와 C에서 발견되지 않은 peak가 확인되었고 2차년도 실험의 결과 대부분의 활성이 리큐르 B가 더 좋았기 때문에 확인된 peak를 가지는 물질이 활성을 나타내고 지표성분을 확인한 Glycyrrhizin,Zingerone,Kaempferol외 다른 물질이 포함되어 있을 것이라고 사료됨.또한 본 실험에 사용된 리큐르는 발효과정을 거치기 때문에 bioconversion으로인한 활성물질의 변환이 있었을 것이라 예상됨.
○ 리큐르의 항혈전 효과
-Fibrinplateassay를 실시한 결과 10mg/ml로 점적하였을 때 리큐르 B에서 4.0±1.0mm의 투명환이 관찰되어 대조군과 비교하여 혈전 용해 효능을 나타냄.
-Clotlysis assay에서 리큐르 A,B,C를 투여한 실험군의 경우,각각 26.4±6.1%, 25.4±4.7%,23.1±5.5%,21.2±4.3%의 clotlysisactivity가 관찰되어,대조군과 비교하여 clotlysisactivity가 증가된 양상을 나타냄.
-200mg/kg과 500mg/kg의 용량으로 리큐르 A,B,C의 혈전용해효과를 확인해 본 결과,500mg/kg 실험시료 C에서 생존시간이 약간 증가하기는 하였으나,통계적으로 유의적인 증가는 확인할 수 없었음.이러한 결과는 3가지 실험시료 모두 ADP에 의해 유발되는 혈전에 대해 용해 효과가 적다는 것을 의미함.
○ RAW264.7에 대한 항염증효과 및 면역력 분석
-RAW264.7세포에 리큐르 A,B,C를 처리하고 염증 반응 및 apoptosis유도를 확인하기 위해 RT-PCR을 수행하여 염증 표지인자인 iNOS,COX-2,TNF-α,IFN-β의 생성량을 확인하였음.RT-PCR을 수행한 결과 TNF-α,IFN-β의 생성량에는 변화가 없었지만 iNOS와 COX-2에서 리큐르 B가 농도가 높아짐에 따라 감소함을 확인하였음.
○ 간성상세포 활성능력평가
-LX-2cell에 대한 MTT assay한 결과 리큐르 A,B,C 모두 처리농도가 높아짐에 따라 세포 생존율이 다소 감소하는 것을 관찰할 수 있었음.염증표지인자인 COX-2, iNOS는 리큐르 A와 C의 농도에 따른 염증 표지 인자의 발현양 차이가 없었으나 리큐르 B는 100㎍/ml보다 200㎍/ml에서 COX-2와 iNOS의 발현양이 감소함.
Abstract
▼
Ⅱ.Results
○ Total Phenolic compound and Flavonoid contents
The total phenolic compound content and flavonoid content of Liqueurs A, B, and C that are made of each different components, were measured.The total phenolic compound contents were highest in Liqueur B, which was 7.69±0.05mg/g, then
Ⅱ.Results
○ Total Phenolic compound and Flavonoid contents
The total phenolic compound content and flavonoid content of Liqueurs A, B, and C that are made of each different components, were measured.The total phenolic compound contents were highest in Liqueur B, which was 7.69±0.05mg/g, then Liqueur A and C, which were 7.55mg/g and 7.53mg/g respectively.Thus, there was not much difference in the contents.
○ Examination of Antioxidant Activity
The electron donating ability of Liqueurs exhibited the highest in Liqueur B that had the highest content of total phenol compound and flavonoid, as IC50=43.21μg/ml, then Liqueurs A andC, as IC50=91.06, 190.76 μg/ml respectively.
○ Antithrombotic Effect (Fibrin plate assay)
By using fibrin plate assay, the activities of Liqueurs A,B and C were confirmed from the formation of a clear zone.When Liqueurs A,B and C were treated by 1mg/ml, fibrinolytic activity was not shown, however, when treated by dripping 10mg/ml, a 4.0±1.0mm clear zone was detected in Liqueur B. Thus, thet hrombolytic efficacy was exhibited compared with the control group.
○ Analysis of Anti-inflammatory Effects and Immunity in RAW264.7
Liqueurs A, B and C were left in RAW264.7 cell for 24 hours for an observation. The result was that in Liqueurs A and C, as the concentration was raised higher, the survivalrate of cell went lower. In Liqueur B, different concentration rates (10,50,100,200,500㎍/ml) did not affect the cell viability.
○ Evaluation of the Activating Ability of Hepatic stellate cell (HSC)
Liqueurs A, B and C in HSC,LX-2 cell were observed for 24hours. The result was that, as the treatment concentration was raised higher, the survival rate of cell somewhat decreased in all the Liqueurs A,B and C. In Liqueur C in particular,as the concentration went up higher, the cell survival rate decreased accordingly.
목차 Contents
- 표 지 ... 1
- 제 출 문 ... 2
- 요 약 문 ... 3
- SUMMARY ... 6
- 목 차 ... 8
- 제 1장 서 론 ... 9
- 제 2장 국내외 기술개발 현황 ... 11
- 제 3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 15
- 제 1년차 연구개발수행 내용 ... 15
- 제 1년차 연구 개발 수행 결과 ... 19
- 제 2년차 연구 개발 수행 내용 ... 23
- 제 2년차 연구개발수행 결과 ... 26
- 제 4장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도 ... 35
- 제 5장 연구개발결과의 활용계획 ... 37
- 제 6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 38
- 제 7장 기타 중요 변동사항 ... 39
- 제 8장 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구장비현황 ... 40
- 제 9장 참고문헌 ... 41
- 끝페이지 ... 43
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