초록 ▼

- 안태음 및 구성약물의 착상 관련 인자인 LIF의 발현에 대한 조절 및 그 기전을 연구하였음. 그 결과, 10종의 한약재 복합처방인 안태음은 LIF의 발현을 증가시키지 않았으나, 10종의 구성 약물 중 작약, 숙지황, 자소엽, 진피, 천궁, 감초의 6종 약재가 유의하게 LIF의 발현을 증가시켰음.
- 또한 LIF의 세포막 수용체인 LIFR의 발현을 증가시키는 약물을 확인하였으나, 유의한 증가가 확인되지 않음. LIF의 발현을 증가하는 6종의 약재를 조합한 결과, 자소엽, 숙지황, 작약의 3종 한약재의 조합은 단독 사용에 비하

- 안태음 및 구성약물의 착상 관련 인자인 LIF의 발현에 대한 조절 및 그 기전을 연구하였음. 그 결과, 10종의 한약재 복합처방인 안태음은 LIF의 발현을 증가시키지 않았으나, 10종의 구성 약물 중 작약, 숙지황, 자소엽, 진피, 천궁, 감초의 6종 약재가 유의하게 LIF의 발현을 증가시켰음.
- 또한 LIF의 세포막 수용체인 LIFR의 발현을 증가시키는 약물을 확인하였으나, 유의한 증가가 확인되지 않음. LIF의 발현을 증가하는 6종의 약재를 조합한 결과, 자소엽, 숙지황, 작약의 3종 한약재의 조합은 단독 사용에 비하여 복합 사용에서 추가적인 LIF 발현이 확인되었으나, 진피와 감초는 배합하여도 추가적인 발현 증가가 나타나지 않았으며, 천궁의 경우에는 배합시 LIF 발현의 유의한 감소가 나타남.
- 따라서 LIF의 발현을 증가시키는 6종의 약물 중 자소엽, 숙지황, 작약이 가장 효과적인 배합임을 확인함.
- 또한 작약과 자소엽의 LIF 발현 증가와 관련된 분자적 기전을 확인하고, 착상과 관련된 첩착분자의 발현을 확인한 결과 integrin의 발현이 작약과 자소엽에 의하여 증가하는 것을 확인하였으며, 이러한 분자의 발현에 LIF가 관련되어 있는지를 shRNA와 LIFR의 antagonist를 이용하여 확인함.
- 그 결과 integrin beta3, beta5의 경우에는 LIF에 의존적인 발현을 확인하였으며, integrin av의 경우에는 LIF와 무관하게 약물에 의하여 발현이 조절되는 것을 확인함.
- 추가적으로 프로게스테론 수용체인 PR의 antagonist인 RU486을 이용한 착상부전 모델을 확립한 후, 작약 추출물을 투여하여 in vivo에서의 착상증가 효능을 확인하였음.
- 그 결과 정상군에 비하여 RU486을 처리한 군은 착상 효율이 현저히 감소하였으며, RU486과 작약을 함께 처리한 군에서는 착상이 유의하게 증가하였음.
- 이상에서 안태음의 구성 약물에서 효과적인 착상증진 한약재를 발굴하였으며, 최적의 조합을 확립하였음.

Abstract ▼

Ⅰ. Aim and necessity of study
The aim of this study is examination of LIF and LIFR regulation, a key cytokine system in embryo development, by antae-eum and its ingredient medicinal herbs. In addition, this study will be continued to develop safe and effective embryo implantation enhancing herbal

Ⅰ. Aim and necessity of study
The aim of this study is examination of LIF and LIFR regulation, a key cytokine system in embryo development, by antae-eum and its ingredient medicinal herbs. In addition, this study will be continued to develop safe and effective embryo implantation enhancing herbal medicine.

Ⅱ. Contents of study
1st year: In vitro examination of implantation factors regulation by antae-eum and its ingredient medicinal herbs
- The expression of LIF and LIFR were examined by RT-PCR, western blot, and ELISA using human endometrial cell line
- The mechanism underlying induction of LIF and LIFR were confirmed by inhibitors to signal molecules and promoter assay
2nd year: In vivo study on the implantation factor regulation by antae-eum and its ingredient medicinal herbs
- Establish the implantation depletion model
- In vivo examination of implantation regulation using established animal model

Ⅲ. Results
- Antae-eum, a herbal prescription composed of 10 ingredients, did not increased the expression of LIF. Among the ingredients, roots of Paonia lactiflora (PL), processed roots of Rehmannia glutinosa (RG), leaves and stems of Perilla frutescens (PF), peel of Citrus unshiu (CU), roots of Cnidium officinale (CO), roots of Glycyrrhiza uralensis (GU) significantly increased the expression of LIF.
- The expression of LIFR, membrane receptor for LIF, was not increased by treatment of antae-eum and its ingredients.
- Among the 6 ingredients inducing the LIF expression, the combination of PF, GR, and PL showed most potent activity.
- Integrins, adhesive molecules involved in embryo implantation, were significantly increased by treatment of PL and PF.
- Implantation depletion mice model was established using RU486, a antagonist for progesterone receptor.
- PL effectively increased the numbers of implanted embryos in RU486-induced implantation depletion model.
- From these results, we developed effective medicinal herbs and its optimal combination.

Ⅳ. Plan for practical use
- We plan to apply new research grant that develops effective and safe Korean medicinal prescription to increase embryo implantation rate.
- The medicinal herbs will be contribute to decrease implantation failure, burden of infertile females, and economic load of medical insurance budget.