초록 ▼

1. 최종목표
- 경제적인 EPO 생산을 위해 세포배양 공정에서는 EPO 생산성을 향상시키며 분리정제 공정에서는 분리정제 수율을 향상시키는 방향으로의 공정 개선에 관한 연구를 수행하여 총 생산 수율을 향상하고자한다.

2. 개발내용 및 결과
- 세포농도가 개발목표인 2.5×10⁶ cells/ml보다 높은 수치인 4.5×10⁶ cells/ml로 개발목표보다 180 % 초과 달성하였음.
- 배양 초반에는 37 ℃로 배양하고 배양 3일차에 온도를 34 ℃로 바꾸는 temp

1. 최종목표
- 경제적인 EPO 생산을 위해 세포배양 공정에서는 EPO 생산성을 향상시키며 분리정제 공정에서는 분리정제 수율을 향상시키는 방향으로의 공정 개선에 관한 연구를 수행하여 총 생산 수율을 향상하고자한다.

2. 개발내용 및 결과
- 세포농도가 개발목표인 2.5×10⁶ cells/ml보다 높은 수치인 4.5×10⁶ cells/ml로 개발목표보다 180 % 초과 달성하였음.
- 배양 초반에는 37 ℃로 배양하고 배양 3일차에 온도를 34 ℃로 바꾸는 temperature shifting 배양법을 확립.
- 인슐린 최적농도 : 2 mg/ml
- Hydrolysate 최적농도 : 5 g/L
- NaBu 최적농도와 처리일자 : 1 mM, 배양 3일차 처리
- 배양 3일차에 NaBu 5 mM을 처리한 조건에서 EPO의 생산량이 557 ㎍/ml (총 단백질 농도 595 ㎍/ml)로 이는 개발목표인 500 mg/L를 119 % 초과 달성하였음.
- 정제 수율 23.5 %를 달성하였으며 이는 개발목표인 15 %를 156 % 초과 달성하였음.
- 1.5 L의 공정 scale-up 배양을 통해 생산된 EPO를 가지고 EPO 4,000IU 시제품을 생산하였음.
- 공정 scale-up시 배양과 정제공정에 대한 (주)한국코러스제약 내 SOP를 확립하였음.
- 배양액 정제원액과 EPO 4,000 IU 시제품의 품질시험을 진행하였음.
- 순도시험인 이량체 및 고분자량 유연물질시험을 통해 순도가 100 %인 것을 확인하였음.
- EPO isoform 분석법인 모세관 전기영동 (CE) 시험법을 추가적으로 확립하였음.

3. 사업성과
◦ 기술적 성과
- 고농도 세포배양 공정의 확립 및 최적 분리정제 공정의 확립
- 경제적인 EPO 생산으로 PGE-EPO 생산시 가격 경쟁력 증진
- PGE-EPO의 생산으로 순환기내 반감기를 증진 시킬 수 있는 신규 의약품 개발
◦ 경제적 성과
- 급속도로 성장하는 바이오의약품분야에서 주요 수출중심의 품목으로 성장할 수 있으며, 적극적인 3세계시장의 진입으로 경제적 부가가치가 확대될 것으로 기대
- (주)한국코러스제약의 춘천 GMP공장에서 대량 생산을 통한 지역 경제 활성화
- (주)한국코러스제약의 해외 수출망을 활용한 해외 pharmerging 시장 진출을 통한 국가 수출 경쟁력 강화
◦ 사회적 성과(일자리 창출 등)
- 연구개발, 산업체와의 공동 세미나에 참여함과 동시에 (주)한국코러스제약의 바이오의 약품공장에서의 현장실습을 실시함으로써, 실무훈련 위주로 현장 맞춤형 전문인력 양성
- PEG-EPO의 사업화 및 수출의 가시화를 통한 지역대학과 지역산업체의 산학협력 체제를 통한 지역혁신의 성공 모델창출

4. 기술개발결과 활용계획
1차년도
- 130 L 바이오리액터 배양/정제 공정 확립
- PEG-EPO 조제법 확립
- 완제품 Formulation 기술 확보
2차년도
- Master Cell Bank, Working Cell Bank 제조
- 세포주 자료확보
- 생산스케일 배양/정제 공정 확립
3차년도
- 공정 밸리데이션, 세척 밸리데이션 진행
- 기시법 확립
- 안정성시험, 효능 평가
4차년도
- 비임상 시험
- 임상 시험
- GMP 인증 및 품목허가 확보
5차년도
- 제품 판매

5. 기술개발자료의 보안관리
◦ 보안등급 분류기준에 따른 등급부여 및 관련 의견 기술
-보안이 필요함
◦ 연구개발의 기술임치 및 특허 출원·등록 실적: 준비 중

목차 Contents

• 표지 ... 1개 발 결 과 의 견 서 ... 2최 종 보 고 요 약 서 ... 31. 서론 (기술개발의 취지 및 필요성) ... 5 1-1. 기술개발의 취지 ... 5 1-2. 기술적 필요성 ... 6 1-3. 경제적 필요성 ... 6 1-4. 산업적 필요성 ... 7 1-5. 지역적 필요성 ... 82. 과제개발 내용 및 방법 ... 9 2-1. 기술개발 목표 ... 9 2-2. 재료 및 방법 ... 10 2-3. 생산성 향상을 위한 기초 배양조건 확립 ... 14 2-4. EPO 고생산성 세포배양 공정 전략 연구 ... 17 2-4. 분리정제 공정 수율 개선 ... 25 2-5. 공정 Scale-up ... 27 2-6. EPO 시제품 자체 생산 ... 303. 사업성과 ... 33 3-1. 기술적 성과 ... 33 3-2. 경제적 성과 ... 33 3-3. 인재양성에 미치는 기대 효과 ... 33 3-4. 향후 5년간 기술개발 결과 활용계획 ... 344. 결론 ... 35 4-1. 본 연구의 결론 및 향후 계획 ... 35 4-2. 기술 개발시 예상효과 및 활용방안 ... 36 4-3. 개발된 기술을 활용한 사업화 방안 ... 37끝페이지 ... 38