초록 ▼

1. 기내배양을 통한 간엽줄기 세포 운명에서 후성유전자 조절제의 역할 규명
1. 마우스 유래 중간엽 줄기세포에 후성유전자 조절제를 처리하면 줄기세포의 자가재생산능이 향상됨.
-줄기세포 관련 유전자의 발현이 증가하는 것으로 보아 후성유전자 조절제 처리에 의한 줄기세포 관련 유전자의 발현이 증가하여 줄기세포의 자가재생산능을 향상시킨 것이라 사료됨.
2. 마우스 유래 중간엽 줄기세포에 후성유전자 조절제를 처리하면 T cells의 inhibitory가 증가됨.
-마우스 유래 중간엽 줄기세포의 면역조절능에 후성유전자 조

1. 기내배양을 통한 간엽줄기 세포 운명에서 후성유전자 조절제의 역할 규명
1. 마우스 유래 중간엽 줄기세포에 후성유전자 조절제를 처리하면 줄기세포의 자가재생산능이 향상됨.
-줄기세포 관련 유전자의 발현이 증가하는 것으로 보아 후성유전자 조절제 처리에 의한 줄기세포 관련 유전자의 발현이 증가하여 줄기세포의 자가재생산능을 향상시킨 것이라 사료됨.
2. 마우스 유래 중간엽 줄기세포에 후성유전자 조절제를 처리하면 T cells의 inhibitory가 증가됨.
-마우스 유래 중간엽 줄기세포의 면역조절능에 후성유전자 조절제가 관여함.
2. 전임상 실험을 통한 간엽줄기 세포 운명에서 후성유전자 조절제의 역할 규명
(1)다양한 후성유전자 조절제 처리에 의한 다양한 유전자 발현 양상 관측
-다양한 후성유전자 조절제를 처리하여 여러 유전자의 발현을 확인해 보았음. 그 결과 myogenesis관련 유전자의 발현이 향상됨을 확인하였고, 특히 면역관련 유전자의 발현이 향상됨을 확인할 수 있었음.
(2)다양한 후성유전자 조절제 처리에 의한 면역조절능 관측
-후성유전자 조절제의 처리에 의한 면역조절 관련유전자의 발현 증가를 토대로 MLR기 법을 이용하여 면역조절능을 확인하여 후성유전자 조절제 처리에 의해 면역조절능이 현저히 증가함을 확인할 수 있었음.
(3)전임상 실험을 통한 간엽줄기 세포 운명에서 후성유전자 조절제의 역할 규명
-C57BL6 마우스의 중간엽 줄기세포에 후성유전자 조절제를 처리한 후, BalBC 마우스에 골수와 함께 주사한 후, 생착율을 확인한 결과 5-aza를 단독으로 처리한 군과 5-aza와 TSA를 조합하여 처리한 군에서 높게 나타남을 확인하였음. 또한 생착된 골수를 수확한 후 LTC-IC기법을 이용하여 줄기세포의 개수를 수치화하여 측정하여 ex vivo에서도 5-aza와 TSA를 처리한 그룹에서 높게 나타남을 확인하였음.
-전임상실험을 통한 간엽줄기세포의 면역조절능에 후성유전자 조절제가 미치는 효과 규명하기 위해 GVHD 마우스모델을 이용하여 GVHD 정도를 수치화한 결과 후성유전자 조절제 처리한 중간엽 줄기세포가 이입된 마우스에서의 GVHD의 scoring결과 5-aza와 TSA를 조합하여 처리한 군에서 GVHD가 향상됨을 확인하였음.
3. 간엽줄기세포에 후성유전자 조절제 처리에 의한 변화하는 유전자 탐색
(1)간엽줄기 세포에 후성유전자 조절제를 처리하여 micro array한 후, 과발현하는 유전자를 탐색한 후 탐색된 유전자의 methylation 변화를 pyrosequencing으로 분석한 결과, MGP, IL-7, CDK, SPARC, DMP1에서의 hypermethylation이 관측되었음.
(2)하지만 histone deacetylation을 western blotting으로 확인한 결과, HDAC1,2의 발현에는 큰 차이를 확인할 수 없었음.