초록 ▼

○ HCS/HTS 시스템 구축 및 건성황반변성 억제 식품소재 발굴
-세포 사멸 관련된 지표를 검출하기 위해 형광 표지자를 이용한 고속대량스크리닝 시스템 (HTS)을 구축함
-형광 단백질 (GFP & mCherry)과 세포사멸 지표 2종(HMGB1 & RIPK3)를 유전자재조합을 실시하고 안정세포주를 제작한 후, 검출할 수 있도록 하이컨텐츠 스크리닝 시스템(HCS)을 구축함
-식품소재 307종을 스크리닝한 결과, 총 21종 (식품시료 5종, 자생시료 9종, 생약시료 7종)이 산화스트레스 유발 망막색소 상피세포 사멸 억

○ HCS/HTS 시스템 구축 및 건성황반변성 억제 식품소재 발굴
-세포 사멸 관련된 지표를 검출하기 위해 형광 표지자를 이용한 고속대량스크리닝 시스템 (HTS)을 구축함
-형광 단백질 (GFP & mCherry)과 세포사멸 지표 2종(HMGB1 & RIPK3)를 유전자재조합을 실시하고 안정세포주를 제작한 후, 검출할 수 있도록 하이컨텐츠 스크리닝 시스템(HCS)을 구축함
-식품소재 307종을 스크리닝한 결과, 총 21종 (식품시료 5종, 자생시료 9종, 생약시료 7종)이 산화스트레스 유발 망막색소 상피세포 사멸 억제 효능이 있음을 밝힘

○ 건성황반변성 억제 단일물질 2종 발굴 및 분자표적 규명
-21종의 식품소재 중에서 효능이 보다 우수한 4종을 선정하였고, 4종의 소재가 함유하고 있는 단일물질을 조사한 뒤 18종을 선정하여 망막색소상피세포 사멸 억제효능을 살펴본 결과 2종의 단일물질이 효능이 있음을 밝힘
-2종의 단일물질이 산화 스트레스 유발 망막색소상피세포 사멸을 일으키는 non-apoptotic cell death pathway 중에서 necroptosis, pyroptosis, 그리고 ferroptosis를 표적으로 하여 억제하는 것으로 나타났음을 밝힘

Abstract ▼

○ Results
■ Construction of HCS/HTS system
-HTS system was developed to detect cell death-related biomarker (apoptosis and necrosis) using fluorescent indicators
-Recombinant plasmids (RIPK3-GFP & HMGB1-mCherry) were manufactured and were used for construction of RIPK3 and HMGB1-stably expr

○ Results
■ Construction of HCS/HTS system
-HTS system was developed to detect cell death-related biomarker (apoptosis and necrosis) using fluorescent indicators
-Recombinant plasmids (RIPK3-GFP & HMGB1-mCherry) were manufactured and were used for construction of RIPK3 and HMGB1-stably expressing ARPE-19 cell. This was used for HCS system construction.

■ Discovery of dry AMD-inhibiting food materials and single compounds
-A total of 307 food materials were screened and 21 species including 5 food samples, 9 nataive plants and 7 herbal medicines showed inhibitory effects on oxidative stress-induced cell death.
-Effective food materials were applied for a patent.
-Eighteen single compounds in four highly effective materials were investigated and two single compounds had inhibitory effects on oxidative stress-induced cell death.
-Both compounds also had antioxidant effects.
-Two single compounds were prepared for a patent application.

■ Identification of the mechanism of retinal pigment epithelial cell death
-We identified that two single compounds suppressed oxidative stress-induced cell death via three non-apoptotic cell death pathways including necroptosis, pyroptosis, and ferroptosis.

목차 Contents

• 표지 ... 1제 출 문 ... 3보고서 요약서 ... 4요 약 문 ... 5SUMMARY ... 6CONTENTS ... 7목차 ... 8제 1 장. 연구개발과제의 개요 ... 9제 2 장. 국내외 기술개발 현황 ... 12제 3 장. 연구개발수행 내용 및 결과 ... 13 1. 스크리닝 시스템 개발 ... 13 2. 망막색소상피세포 사멸 억제 소재 및 single compound 스크리닝 ... 21 3. Single compounds의 사멸 억제 기전 규명 ... 40제 4 장. 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 44제 5 장. 연구개발 성과 및 성과활용 계획 ... 46제 6 장. 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 47제 7 장. 연구개발 성과의 보안 등급 ... 48제 8 장. 연구시설·장비 현황 ... 49제 9 장. 연구개발과제의 대표적 연구 실적 ... 50제 10 장. 기타 사항 ... 51제 11 장. 참고문헌 ... 52끝페이지 ... 53