초록 ▼

·CDK 저해 항암제에 대한 표적 환자군을 정의할 수 있는 바이오마커 개발을 위한 model 구축과 AGM-130의 임상시험에 적용 가능한 바이오마커 발굴
① proteomics 기반 바이오마커 개발
- in vitro sensitive 세포주(MDA-MB-231, TAMR-MCF-7, NCI-H522)에서 AGM-130 투여에 따른 단백질 발현량 비교 분석을 통한 바이오마커 후보 단백질을 발굴함 (Pin1, Rad21)
② xenograft 모델 PK/PD marker 개발
- 삼중음성 유방암 세포주(MDA-

·CDK 저해 항암제에 대한 표적 환자군을 정의할 수 있는 바이오마커 개발을 위한 model 구축과 AGM-130의 임상시험에 적용 가능한 바이오마커 발굴
① proteomics 기반 바이오마커 개발
- in vitro sensitive 세포주(MDA-MB-231, TAMR-MCF-7, NCI-H522)에서 AGM-130 투여에 따른 단백질 발현량 비교 분석을 통한 바이오마커 후보 단백질을 발굴함 (Pin1, Rad21)
② xenograft 모델 PK/PD marker 개발
- 삼중음성 유방암 세포주(MDA-MB-231), 타목시펜 저항성 유방암 세포주 (TAMR-MCF-7), 폐암 세포주(NCI-H522) 및 이들 세포주를 이종이식한 xenograft 모델에서 AGM-130에 대한 항암 효과와 암세포 증식 억제 효과를 확인하고, 생화학적 분석 방법을 통해 표적 바이오마커로의 검증을 완료함
③ 임상 적용 가능 바이오마커 가능성 검토
- in vitro, in vivo 결과를 바탕으로 관련 문헌 조사를 통해 밝혀진 자료 비교 분석을 통해 CDK저해 항암제에 대한 임상 적용 가능한 암 바이오마커로서의 가능성을 검토함

·AGM-130의 PKPD 모델링/시뮬레이션과 임상에서의 약물상호 작용 (Drug-Drug Interaction, DDI)예측
① 고감도 4-beta-hydroxycholesterol 정량법 개발 및 AGM-130의 약물상호작용 예측
- LC-ESI-TOF/MS를 이용하여 개발한 고감도의 4-beta-hydroxycholesterol 정량법과 GastroPlus를 이용한 simulation을 통해 AGM-130을 투여시 인간에서의 약물상호작용을 예측한 결과 임상에서 CYP3A4에 대한 약물상호작용 가능성을 확인함
② Humanized mouse(PXR, CAR 및 CYP3A4 transgenic mouse)를 이용한 in vivo human 약물대사 및 상호작용 예측과 UGT isozyme phenotyping 연구 및 약물상호작용 연구
- Recombinant human UGT를 이용한 AGM-130의 reaction phenotyping 결과 주로 UGT1A9에 의해 AGM-130의 포합반응이 이뤄지며 UGT1A1에 의한 포합반응 역시 확인됨
- Humanized triple transgenic mouse (CYP3A4, PXR, CAR)를 이용한 in vivo 약물상호작용 시험에서 rifampine와 CYP3A의 대표적 억제제인 ketoconazole 전처리에 의한 AGM-130의 혈중농도 변화 확인을 통해 AGM-130이 사람에게 투여 시 CYP3A4에 의해 주로 대사될 수 있으며 또한 CYP3A4의 유도제와 억제제에 의해 약물상호작용을 확인함
- AGM-130이 UGT1A1 및 CYP3A4와 같은 약물대사효소에 대한 약물상호작용이 있음을 알 수 있으며, 반대로 약물수송체와 관련한 약물상호작용은 미미한 것으로 확인함
③ PKPD 모델링/시뮬레이션
- A549(lung), MDAMB231(breast), MCF-7(breast)model에서 AGM-130에 의한 종양 억제 효과를 정량적인 집단 약력학 모형으로 나타낸 결과 세 가지 모형 모두에서 양성대조약보다 더 강한 종양억제 효과를 보임 (최대 종양 억제 효과의 50%)
- 향후 human에서의 약동학 연구가 수행 시, mice 약동학 결과와 본 모형을 이용하여 human에서 종양 억제 모형을 예측할 수 있을 것으로 사료됨.

( 출처 : 요약서 )

Abstract ▼

1. Necessity of Research
- To discover the biomarker candidate using proteomic-based methodologies in AGM-130-sensitive cell lines
- To validate the biomarker panels using xenograft mouse models and evaluate the clinical utility of a novel biomarker
- To evaluate the human pharmacokinetics

1. Necessity of Research
- To discover the biomarker candidate using proteomic-based methodologies in AGM-130-sensitive cell lines
- To validate the biomarker panels using xenograft mouse models and evaluate the clinical utility of a novel biomarker
- To evaluate the human pharmacokinetics and dose based on preclinical efficacy data and biomarkers using PKPD modeling and simulation
- To evaluate the drug-drug interaction(DDI) potentials of AGM-130 in human clinical trials using humanized mouse, UGT metabolic phenotyping and highly sensitive 4-beta hydroxycholesterol assay using tripleTOF mass spectrometry

2. Research Contents
1) comparative 2D gel proteomics of for biomarker discovery
2) biomarker response and tumor growth inhibition in xenograft mouse model
3) Charactering candidate biomarkers for potential further clinical testing
4) PKPD modeling and simulation: Human PK/efficacious dose prediction using preclinical PK/efficacy data
5) Clinical DDI prediction
- Prediction of clinical DDI using humanized mouse treated with rifampin, cyclosporin and ketoconazole.
- Prediction of clinical DDI using SD rat treated with dexamethason, AGM-130 and ketoconazole by analyzing 4-beta hydroxycholesterol level in rat plasma
- Development of highly sensitive LC-MS based assay for 4 beta-hydroxycholesterol for evaluation of CYP3A4 inhibition and induction
- UGT isozyme phenotyping

3. Research Outputs
- The biomarker candidates (Pin1, Rad21) were discovered using proteomic-based methodologies in AGM-130-sensitive cell lines
- The biomarker panels were validated using xenograft models
- The clinical utility of a novel biomarker was evaluated
- An LC-ESI-TOF/MS method has been developed successfully for the evaluation of 4-beta hydroxycholestrol in rat plasma.
- Physiologically-based pharmacokinetics (PBPK) analysis of AGM-130 was also conducted for predicting human drug-drug interaction of AGM-130.
- Recombinant human UGT reaction phenotyping data suggested UGT1A9 as a major responsible UGT enzyme for AGM-130 glucuronidation. The second major responsible UGT enzyme was UGT1A1
- There is a potential of drug-drug interaction of AGM-130 by metabolic enzymes such as CYP3A4 in human.
- AGM-130 has strong anti-cancer effects compared to the control group and human efficacious dose was predicted using 50% tumor-inhibition model in three models (A549, MDA-MB-231, and MCF-7)

( 출처 : SUMMARY )

목차 Contents

• 표지 ... 1제출문 ... 2보고서 요약서 ... 3요약문 ... 5SUMMARY ... 66.1 총괄연구개발과제의 연구성과 실적 및 향후 계획 ... 77. 참여연구원 현황표 ... 11II. 총괄연구과제 연구결과 ... 12 1. 과제실적 총괄개요 ... 13 2. 배경 및 필요성 ... 14 3. 국내외 기술개발 현황 ... 18 4. 연구개발과제의 추진체계 ... 23 5. 연구개발 수행내용 및 결과 ... 24 6. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 28 7. 향후 연구 성과 추진계획 ... 29 8. 연구개발결과의 파급효과 ... 29 9. 연구개발결과의 활용계획 ... 31 10. 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 32 11. 기타 ... 35Ⅲ. 제1세부연구과제 ... 36 1. 연구개발과제의 목표 ... 38 2. 연구개발과제의 추진체계 ... 44 3. 연구개발 수행내용 및 결과 ... 45 4. 기타 ... 75 5. 참고문헌 ... 75Ⅳ. 제2세부연구과제 ... 79 1. 연구개발과제의 목표 ... 81 2. 연구개발과제의 추진체계 ... 82 3. 연구개발 수행내용 및 결과 ... 83Ⅴ. 첨 부 서 류 ... 126끝페이지 ... 143