초록 ▼

최근 생물다양성협약과 이에 따른 나고야의정서 채택으로 미생물자원에 대한 국제적 관심이 높아졌다. 중증급성호흡기증후군 (SARS)나 중동호흡기증후군 (MERS) 환자의 발견 등으로 신종, 변종감염 원인체에 대한 연구 필요성이 증가하는 추세이다.

Rickettsiaceae, Chlamydiaceae 과에 속한 균들의 절대 세포내 기생체로서 세포내 배양을 통해서만 증식이 가능하며, Borreliae, Leptospirae 속에 속한 병원체 역시 영양요구성이 매우 까다로워 일반적인 방법 및 배지로 균주분리 및 배양이 불가능하며

최근 생물다양성협약과 이에 따른 나고야의정서 채택으로 미생물자원에 대한 국제적 관심이 높아졌다. 중증급성호흡기증후군 (SARS)나 중동호흡기증후군 (MERS) 환자의 발견 등으로 신종, 변종감염 원인체에 대한 연구 필요성이 증가하는 추세이다.

Rickettsiaceae, Chlamydiaceae 과에 속한 균들의 절대 세포내 기생체로서 세포내 배양을 통해서만 증식이 가능하며, Borreliae, Leptospirae 속에 속한 병원체 역시 영양요구성이 매우 까다로워 일반적인 방법 및 배지로 균주분리 및 배양이 불가능하며, 동정 및 분류에 VITEK system과 같은 대량 분석기기의 사용 불가능하다. 이로 인해 이들의 자원확보 및 연구에는 많은 제약을 받는다. 이들 병원체중 일부는 최근에 국내에서 그 환자의 보고가 된 신종감염병의 원인체이다. 본 연구에서는 위와 같은 배양이 어려운 병원체를 대상으로, 환경 및 인체 검체에서 균주를 분리하고, 그 특성을 분석하여 자원화에 필요한 제반 정보를 제공하고자 다음과 같은 연구를 수행하였다.

1. 협력병원 및 진단검사기관에서 인체유래 검체를 확보하여 검체로부터 병원체를 분리하였음, 2. 환경에서 병원체의 숙주역할을 하는 야생들쥐와 매개체인 진드기를 포획 및 수집하여 그로부터 병원체를 분리하였음, 3. 연구대상 난배양성 병원체의 배양법과 검체로부터의 분리법을 확립하여 자원화의 기반을 확립하였음, 4. 분자생물학적인 타겟을 결정하여 병원체를 검체에서 검출하거나 분리된 균을 동정할 수 있는 마커를 개발하였음, 5. 분리균주의 분자생물학적인 특성을 분석하여 동정을 하였으며, 염기서열분석을 통해 자원의 실효성을 높였음, 6. 연구대상 병원체는 배양이 어려울 뿐만 아니라 균주의 지속적인 보관도 어려움, 본 연구를 통해 각 균주에 적합한 보관조건을 확립하였음, 7. Chlamydia는 혈청학적특성 분석이 매우 중요함. 본 연구에서 단세포군 항체를 개발하여 Chlamydia를 검출하고, 특성을 분석할 수 있는 도구로 자원화하였음.

본 연구를 통해 얻은 정보와 자원화한 균주, 단세포군 항체들은 대상 병원체의 진단, 역학, 백신개발 등의 다양한 연구의 자원으로 사용될 수 있을 것으로 사료된다.

(출처 : 최종결과보고서 요약문)

Abstract ▼

Along with the recent signing of the Nagoya Protocol, biological resources are increasingly gaining worldwide interest. In particular, there is an increased need for research on securing emerging and reemerging infectious pathogens due to Severe Acute Respiratory Syndrome and Middle East Respiratory

Along with the recent signing of the Nagoya Protocol, biological resources are increasingly gaining worldwide interest. In particular, there is an increased need for research on securing emerging and reemerging infectious pathogens due to Severe Acute Respiratory Syndrome and Middle East Respiratory Syndrome outbreak. Pathogens which belong to the Rickettsiaceae, Chlamydiaceae Families can only be proliferated through intracellular cultivation. Likewise, pathogens that belong to the Borreliae, Leptospirae Genus cannot be isolated nor cultured with usual methods due to their exceptional complication in nutritional requirements. Mass analyzers such as the VITEK system cannot be applied, either. In this regard, such pathogens are faced with significant limits in resource securing and research.

This research isolated the strains from pathogens that are hard-to-cultivate using environmental and human-derived methods. Their molecular characteristics were further analyzed to establish the basis for biological resources. Furthermore, markers that could detect pathogens from clinical specimens or categorize the detached pathogens were developed through molecular biology targets and effectiveness was enhanced through sequencing. Chlamydia was detected through the development of monoclonal antibody, and the analyzing tools were made into resources. Typically, pathogens that are hard-to-cultivate are not only difficult to culture but also to continuously store. This research helped establish the suitable storing conditions.

This research could provide a useful basis for the future research including pathogen information and diagnosis, epidemiology and vaccine development for pathogens based on the strains and monoclonal antibodies made into biological resources bank.

(출처 : Summary)

목차 Contents

• 표지 ... 1학술연구개발용역과제 최종결과보고서 ... 2목차 ... 3최종결과보고서 요약문 ... 4Summary ... 5학술연구개발용역과제 연구결과 ... 6 제1장 최종 목표 ... 6 1.1 목표 ... 6 1.2 목표달성도 및 관련분야에 대한 기여도 ... 8 제2장 국내외 기술 현황 ... 10 2.1 국내외 연구동향(연구배경) ... 10 제3장 최종 연구 내용 및 방법 ... 12 3.1 연구내용 ... 12 3.2 연구방법 ... 12 제4장 최종 연구 결과 ... 23 4.1 인체유래 검체자원화 기준 마련 (1차년도) ... 23 4.2 병원체 진단, 검출을 위한 분자생물학적 마커 개발 ... 23 4.3 환경유래 검체에서 병원체 검출 및 분리 ... 27 4.4 병원체 분리, 배양, 특성화 및 자원화 ... 52 4.5 병원체 분리, 배양, 보관, 특성화 및 자원화 ... 78 4.6 클라미디아 특이 단세포군항체 제작 ... 124 제5장 연구결과 고찰 및 결론 ... 130 제6장 연구성과 및 활용계획 ... 131 6.1 연구성과 ... 131 6.2 활용계획(과제 종료 후) ... 132 제7장 연구용역과제 진행과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 133 제8장 기타 중요변경사항 ... 133 제9장 연구비 사용 내역(당해년도) 및 연구원 분담표 ... 134 제10장 참고문헌 ... 136 제11장 첨부서류 ... 140끝페이지 ... 165