초록 ▼

의진균의 자원화를 위해 전국 종합병원 진단검사의학과 및 피부과 등을 통해 국내 분리 임상 의진균주를 수집하였다. 수집한 균주는 총 210 여주를 수집하였고, 자체 동정 및 표준화 과정을 통해 자원화하였다. 또한 균주에 대한 임상정보를 수집하여 추후 임상학적 연구를 위한 기초 자료로 활용할 계획이다.

국내 임상에서 분리빈도가 높은 세 균속 (Aspergillus 속, Candida 속, Trichophyton 속)에 대한 형태학적 분석을 수행하였다. 형태학적 분석을 위해 다양한 배지에서의 집락 특성을 관찰하였고, 위상차

의진균의 자원화를 위해 전국 종합병원 진단검사의학과 및 피부과 등을 통해 국내 분리 임상 의진균주를 수집하였다. 수집한 균주는 총 210 여주를 수집하였고, 자체 동정 및 표준화 과정을 통해 자원화하였다. 또한 균주에 대한 임상정보를 수집하여 추후 임상학적 연구를 위한 기초 자료로 활용할 계획이다.

국내 임상에서 분리빈도가 높은 세 균속 (Aspergillus 속, Candida 속, Trichophyton 속)에 대한 형태학적 분석을 수행하였다. 형태학적 분석을 위해 다양한 배지에서의 집락 특성을 관찰하였고, 위상차 현미경과 주사 전자현미경을 이용해 분생자 및 포자 형성기관 등의 미세구조 분석을 수행하였다. 특히 Aspergillus 속은 임상에서 동정이 까다로워, 총 9종에 대한 형태학적 분석을 통해 빠르고 정확한 동정을 위한 기초 자료를 마련하였다.

Candida albicans, Aspergillus fumigatus, 그리고 Trichophyton rubrum 세 균종을 대상으로 multi locus sequence typing (MLST) 기법을 사용하여 유전학적 특성 분석을 수행하였다. 분석 결과 C. albicans는 총 22개의 다양한 sequence type을 보였으며, 상관도 분석에서 sputum과 urine에서 분리된 균주들이 모두 cluster 1에 속하였고, cluster 2는 모두 blood(central line)로부터 분리된 균주들이였다. A. fumigatus 균주의 유전적 특성 분석 결과, 7개의 유전자 중 LIP, MAT1-2, BGT1에서 추가 변이를 가진 균주를 확인하였고, 추가 allele type을 부여하였다. 상관성 분석에서 cluster 1과 2로 분류된 18균주는 모두 호흡기 유래 분리균이였으며, cluster 3과 4에 속하는 균주들은 비호흡기 유래 분리균주(skin, ear, pleural fluid 등)들이었다. 따라서 분리원에 따른 균종의 차이를 보다 정확하게 하기 위해 추가 균주를 이용한 분석이 이루여야 할 것으로 사료된다. T. rubrum의 경우는 국내뿐만 아니라 국제적으로 처음 유전적 분석을 수행하였다.
따라서 기존 database가 존재하지 않기 때문에 본 연구과제 수행 과정에서 database를 설정하고 allele type을 정의하였다. T. rubrum은 대부분이 염기의 변화가 없었으며, 베타 tubulin 유전자에서 약 3 곳의 유전자 변이가 있음을 확인하였다. 상관성 분석에서는 총 4개의 cluster로 구분되었으나, cluster간 상관성은 뚜렷이 차이가 나지는 않았다.

본 연구과제를 통해 국내분리 임상 분리 균주들의 유전적 특성을 분석한 결과, 분석대상 균주수가 30-40 여 주로 상대적으로 적어 전체적인 유전적 특성을 명확하게 알수는 없었지만, 임상 정보와의 연관성 분석 결과, 일부 균종에서 특정 분리원에서 분리된 균종이 비슷한 특성을 가짐을 확인하였다.

( 출처 : 요약문 )

Abstract ▼

The medical fungi were collected for resourcement in a domestic clinical isolates from hospitals. A total of 210 were collected, and identified through standardization process. Of these 30 strains will be deposited.

And the morphological analysis was performed with the most prevalent three ge

The medical fungi were collected for resourcement in a domestic clinical isolates from hospitals. A total of 210 were collected, and identified through standardization process. Of these 30 strains will be deposited.

And the morphological analysis was performed with the most prevalent three genus of pathogenic fungi (Candida albicans, Aspergillus fumigatus, Trichophyton rubrum) in Korea. Colony characterizations were observed on various media, and microstructure analysis of the conidia and conidial forming organ was carried out using a phase contrast microscope and a scanning electron microscope. In paticular 9 Aspergillus species were analysed, it laid the basis for fast and accurate identification.

And also the genetic characterization was performed using MLST method. Candida albicans showed a total 22 diverse sequence types and 2 clusters. Strains isolated sputum and urine were in the cluster 1, and all strains in cluster 2 were isolated from blood (central line).

A. fumigatus was differentiated to a total of four groups and five new alleles were identified with additional mutation in the LIP, MAT1-2, and BGT1 gene. All of the 18 strains were classified into cluster 1 and 2 is derived from respiratory isolate, cluster 3 and 4 are strains belonging to non-respiratory isolates. In cases of T. rubrum, the genetic analysis was performed for the first time in the world.
Thus, there were lack of database for analysing genetic study therefore we established and defined genetic databases in this study. And we confirmed that three mutation in the beta-tubulin gene. In the correlation analysis was divided into a total of four cluster, inter-cluster correlation was not significant.
Although the sample size was small (using 30 to 40 fungal strains), in conclusion,results from this study show that genetic characteristics of pathogenic fungal species which were isolated from same clinical specimens were very similar and well-correlated with clinical data.

( 출처 : SUMMARY )

목차 Contents

• 표지 ... 1학술연구개발용역과제 최종결과보고서 ... 2요약문 ... 4Summary ... 5학술연구개발용역과제 연구결과 ... 6 제1장 최종 목표 ... 6 제2장 국내외 기술 현황 ... 7 제3장 최종 연구 내용 및 방법 ... 11 제4장 최종 연구 결과 ... 23 제5장 연구결과 고찰 및 결론 ... 98 제6장 연구성과 및 활용계획 ... 99 제7장 연구용역과제 진행과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 101 제8장 기타 중요변경사항 ... 101 제9장 연구비 사용 내역(당해년도) 및 연구원 분담표 ... 102 제10장 참고문헌 ... 104끝페이지 ... 106