초록 ▼

□ 연구의 목적 및 내용
- 목적: HCV 감염에 의한 microRNA들의 발현 양상의 변화가 간섬유화(liver fibrosis)와 같은 간질환 유발과 HCV 복제에 관계되는 기작들을 규명하고 궁극적으로 그러한 기전을 바탕으로 항 HCV 제제 개발의 초석을 다지고자 함.

- 내용: HCV 감염에 의해 간섬유화에 관여하여 발현 변화가 유도되는 microRNA들을 규명하고, 바이러스 감염에 의해 이러한 microRNA의 발현을 조절하는 기전을 밝혀내며 그러한 microRNA가 간섬유화 유도 및 HCV 복제에 어떠한

□ 연구의 목적 및 내용
- 목적: HCV 감염에 의한 microRNA들의 발현 양상의 변화가 간섬유화(liver fibrosis)와 같은 간질환 유발과 HCV 복제에 관계되는 기작들을 규명하고 궁극적으로 그러한 기전을 바탕으로 항 HCV 제제 개발의 초석을 다지고자 함.

- 내용: HCV 감염에 의해 간섬유화에 관여하여 발현 변화가 유도되는 microRNA들을 규명하고, 바이러스 감염에 의해 이러한 microRNA의 발현을 조절하는 기전을 밝혀내며 그러한 microRNA가 간섬유화 유도 및 HCV 복제에 어떠한 역할을 하는지 규명하고자 함.
이를 바탕으로 간섬유화에 관여하는 microRNA을 특이적으로 표적으로 한 allosteric ribozyme 기반 항 HCV 제재 개발의 기초연구를 수행함.

□ 연구결과
(1) Liver에서 HCV infection은 miR-192와 TGF-β1 발현을 증가시킴

(2) HCV infection에 의한 miR-192의 증가 원인은
① HCV core protein에 의한 pri-miR-192의 transcription의 증가와
② TGF-β1에 의한 smad3 pathway를 통한 pri-miR-192의 processing의 증가 떄문임.

(3) HCV infection에 의한 TGF-β1의 증가 원인은
① HCV core protein에 의한 TGF-β1 transcription의 증가와
② miR-192의 증가로 인한 TGF-β1의 negative regulator인 ZEB1의 감소에 따른 증가 때문임.

(4) HCV infection에 의한 hepatocyte에서의 miR-192와 TGF-β1의 증가는
① HSCs(간 성상세포)에서 miR-192와 TGF-β1 발현을 증가시키며
② a-SMA와 col1A1 발현의 증가 등 HSCs를 activation시켜 liver fibrosis를 유도할 것 으로 예상됨.

(5) HCV 감염시 HSCs에서 miR-192 발현의 증가 기전은
① HCV에 의한 hepatocyte의 miR-192 증가에 따른 miR-192의 extracellular secretion 증가와
② exosome을 통한 miR-192의 HSCs로의 전달에 의한 것으로 예상됨.

(6) HCV 감염 특이적 allosteric ribozyme 개발
① HCV NS5B aptamer + communication module 서열 + miR-192에 대한 antisense 서열 등으로 구성됨.
② ribozyme은 HCV가 감염된 세포 특이적으로 anti-miR-192를 release하여 miR-192 기능을 억제함.

□ 연구결과의 활용계획
- HCV 증식 기전과 HCV 감염에 의한 간질환의 기전 규명 및 항 HCV 치료제 개발에 활용
- HCV 감염질환에 대한 진단 및 새로운 신약 탐색 도구로서 활용
- 바이러스 질환에서의 microRNA의 기능 이해 및 항 바이러스 표적으로서 활용
- RNA의 구조 및 기능 연구, 생명공학으로의 응용연구 등 RNA 학문 분야 발전

( 출처 : 요약문 4p )

Abstract ▼

□ Purpose&contents
- Purpose: The final goal of this project is to elucidate the mechanism of microRNAmediated liver fibrosis and virus replication caused by HCV infection and to develop anti-HCV genetic agents.

- Contents: We figure out which microRNAs are changed in their expression and

□ Purpose&contents
- Purpose: The final goal of this project is to elucidate the mechanism of microRNAmediated liver fibrosis and virus replication caused by HCV infection and to develop anti-HCV genetic agents.

- Contents: We figure out which microRNAs are changed in their expression and are involved in liver fibrosis when infected by HCV. Moreover, we elucidate the roles and mechanisms of the microRNAs with regard to the generation of HCV-related liver fibrosis and HCV replication. Finally, we develop anti-HCV agents based on allosteric ribozyme which can control the microRNA expression specifically and effectively in HCV-infected cells.

□ Result
(1) HCV infection stimulates expression of miR-192 and TGF-β1 in liver cells.

(2) The mechanisms by which HCV infection can increase the expression of miR-192 are;
① through increase in the transcription level of pri-miR-192 by HCV core protein
② through increase in the processing efficacy of pri-miR-192 by TGF-β1 signalmediated smad3 pathway

(3) The mechanisms by which HCV infection can induce the expression of TGF-β1 are;
① through increase in the transcription level of TGF-β1 by HCV core protein
② through inhibition of expression of ZEB1, which is a negative regulator of TGF-β1, by HCV-induced miR-192

(4) Increase in the level of miR-192 and TGF-β1 in hepatocytes by HCV infection can cause
① increase in the expression level of miR-192 and TGF-β1 in HSCs
② induction of liver fibrosis through activation of HSCs including induction of the level of a-SMA and col1A1 in the cells

(5) The mechanisms of increase in the expression level of miR-192 in HSCs when infected by HCV are;
① through increase in the extracellular secretion of miR-192 which level is induced in hepatocytes by HCV infection
② through increase in the transfer of exosome-mediated miR-192 into HSCs

(6) We developed allosteric ribozyme which is selectively active in HCV-infected cells.
① Component of the ribozyme; HCV NS5B aptamer + communication module sequence+ antisense sequence against miR-192
② The ribozyme can suppress the miR-192 function selectively in HCV-infected cells through release of anti-miR-192 only in the viral-infected cells.

□ Expected Contribution
- For elucidation of HCV replication mechanism and HCV-caused liver diseases and for application to the development of anti-HCV therapeutic agents
- For application to the development of diagnostic systems and tools for the screening of new drugs against HCV-related liver disease
- For understanding of microRNA function with respect to virus-related diseases and for the application of microRNAs as the therapeutic targets against virus
- For fostering of RNA academic fields including RNA structure and function and application of RNAs to biotechnology and biomedicine

( 출처 : SUMMARY 5p )

목차 Contents

• 표지 ... 1목차 ... 2연구계획 요약문 ... 3연구결과 요약문 ... 4 한글요약문 ... 4 SUMMARY ... 5연구내용 및 결과 ... 6 1. 연구개발과제의 개요 ... 6 2. 국내외 기술개발 현황 ... 7 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 19 4. 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 50 5. 연구결과의 활용계획 ... 52 6. 연구과정에서 수집한 해외 과학기술정보 ... 53 7. 주관연구책임자 대표적 연구실적 ... 53 8. 참고문헌 ... 54 9. 연구성과 ... 55 10. 국가과학기술지식정보서비스에 등록한 연구시설‧장비 현황 ... 58 11. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행실적 ... 59 12. 기타사항 ... 60[별첨1] 대표연구성과 ... 61끝페이지 ... 72