초록 ▼

연구배경: 심한 단백뇨를 유발하는 대표적인 사구체질환인 미세변화병(MCD) 및 국소분절사구체경화증(FSGS)의 병인기전에 있어서 보체계의 역할에 대해서는 알려진 바가 없었으나 본 연구자들의 예비실험에서 MCD, FSGS 생검조직에서 보체계의 중간산물인 C4d가 대조군에 비해 높게 발현함을 발견하였다. 이들 질환에서 C4d의 발현은 lectin pathway 활성화의 증거일 것으로 판단되며, 이에 대표적인 단백뇨 유발 사구체질환인 MCD, FSGS 및 당뇨병성 신증의 발병 및 진행에 있어서 lectin 경로의 역할을 규명하고자 하는

연구배경: 심한 단백뇨를 유발하는 대표적인 사구체질환인 미세변화병(MCD) 및 국소분절사구체경화증(FSGS)의 병인기전에 있어서 보체계의 역할에 대해서는 알려진 바가 없었으나 본 연구자들의 예비실험에서 MCD, FSGS 생검조직에서 보체계의 중간산물인 C4d가 대조군에 비해 높게 발현함을 발견하였다. 이들 질환에서 C4d의 발현은 lectin pathway 활성화의 증거일 것으로 판단되며, 이에 대표적인 단백뇨 유발 사구체질환인 MCD, FSGS 및 당뇨병성 신증의 발병 및 진행에 있어서 lectin 경로의 역할을 규명하고자 하는 연구를 진행하였다.
연구내용 및 결과: 연구는 크게 다음의 세가지 방법으로 이루어졌다.
첫째, 배양세포를 이용한 MCD, FSGS에서의 lectin pathway 역할 규명
-podocyte를 배양하고 인위적으로 MBL을 처리하였을 때 C4d의 발현이 증가함을 확인함으로써 podocyte에서 lectin pathway가 존재하며 인위적으로 활성화됨을 확인하였음.
-배양된 podocyte에서 인위적으로 lectin pathway를 활성화시킴에 따라 podocyte의 actin filament가 손상되고 cell viability가 감소함을 확인하였음.
-배양된 podocyte에 puromycin aminonucleoside를 처리하여 cytoskeleton의 이상을 유도할 경우 C4d 발현이 증가함을 확인하여 lectin pathway가 유도됨을 확인하였으며,
-유도된 podocyte 손상을 glucocorticoid 처리를 통해 회복시킬 경우 cytoskeletal damage가 회복되면서 C4d 발현이 감소함을 확인함으로써 lectin pathway의 활성화가 변화과정을 확인함.
둘째, 배양세포를 이용한 당뇨병성 신증에서의 lectin pathway 역할 규명
-배양된 mesnagial cell에 고농도의 glucose를 처리하였을 때 C4d가 발현에 변화가 없음을 확인하여 glucose 처리로 lectin pathway 활성화가 유도되지 않음을 확인함.
-배양된 glomerular endothelial cell에 MBL을 처리하였을 때 C4d의 발현이 증가함을 확인하여 glomerular endothelial cell에 lectin pathway가 존재하며 인위적으로 활성화됨을 확인하였음.
-배양된 glomerular endothelial cell에 고농도의 glucose를 처리하였을 때 C4d 발현이 증가함을 확인하여 당뇨병성 신증에서 C4d 발현이 glomerular endothelial cell에 의해 유도됨을 확인함.
-Gloerular endothelail cell에서 유도된 lectin pathway가 mesangial cell의 ECM 생산에 영향을 주는지 확인하기 위해 mesangial cell과 endothelial cell coculture를 시도하였으며, coculture는 성공하였으나, 두 세포의 구성비를 확인 및 조정하는데 실패함으로써 당뇨병성 신증의 ECM 축적에서 lectin pathway 의 영향을 규명하는데 실패함.
셋째, 환자의 신생검 조직에서 lectin pathway 관련 단백 발현의 임상적 의미 규명
-MCD, FSGS 환자의 신생검 조직에서 C4d의 발현이 대조군과 비교하여 유의하게 높았으며, 환자군에서 nephrotic sydrome을 보일 경우, serum albumin level이 낮을 경우, 그리고 serum cholesterol level이 높을 경우 C4d 발현이 높음을 확인함으로써 MCD, FSGS에서 C4d 발현이 질병의 severity와 관련됨을 확인하였음.
-또한 C4d 발현량은 MCD, FSGS 환자의 last serum creatinine level과 유의한 상관관계를 보였음.
-당뇨병성 신증 환자의 신생검 조직에서 C4d의 발현이 대조군에 비해 유의하게 높았으며, 환자의 생검 당시 albuminuria 정도와의 상관성은 없었음.
-당뇨병성 신증에서 C4d의 발현은 glomerular class II, III에서 증가하다가 class IV에서 감소하였음.
-이중면역조직화학 염색을 통해 C4d 발현 세포 확인하였으며, podocyte 및 glomerular endothelial cell에서 C4d가 발현함을 확인하였음.
넷째, 부수적으로 신세포암 환자의 예후와 관련하여 SWI/SNF complex의 발현에 관한 연구 진행
-투명세포 신세포암에서 PBRM1, ARID1A 발현을 조사하였으며, 이들의 발현이 투명세포 신세포암 환자의 예후와 유의하게 관련됨을 확인하였음.
고찰: 이상의 연구결과를 통해 MCD, FSGS에서 lectin pathway가 관여함을 밝혔으며, 나아가 MCD, FSGS환자의 신생검 조직에서 C4d의 발현이 질병의 severity를 반영함을 확인하였다. 당뇨병성 신증에서 C4d의 발현이 당뇨병성 신증의 진행과 관련있음을 보여 lectin pathway가 관여할 가능성을 시사하였다.
(출처:요약문 3p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 2
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 3
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 4
• 1. 연구과제의 개요 ... 4
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 4
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 4
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 6
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 6
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 6
• Ⅲ. 연구성과 ... 7
• 끝페이지 ... 8