초록 ▼

○ 1차년도에는 코카인에 의한 정신적, 신체적 의존성에 대해 정신행동학적인 접근을 통해 TRPA1 channel의 역할을 규명하기 위해 코카인에 의해 유도된 조건장소선호도법 및 행동민감화법에서 selective TRPA1 antagonist인 HC-030031과 A-967079를 뇌실 내 주입하여 코카인 의존중독 현상이 감소하는지 관찰하고 이러한 작용을 TRPA1 agonist인 allyisothiocyannate (AITC)가 억제시키는지 연구함. 그 결과 코카인 의존중독 동물모델에서 TRPA1 길항제를 복강내 투여 및 뇌실 내주

○ 1차년도에는 코카인에 의한 정신적, 신체적 의존성에 대해 정신행동학적인 접근을 통해 TRPA1 channel의 역할을 규명하기 위해 코카인에 의해 유도된 조건장소선호도법 및 행동민감화법에서 selective TRPA1 antagonist인 HC-030031과 A-967079를 뇌실 내 주입하여 코카인 의존중독 현상이 감소하는지 관찰하고 이러한 작용을 TRPA1 agonist인 allyisothiocyannate (AITC)가 억제시키는지 연구함. 그 결과 코카인 의존중독 동물모델에서 TRPA1 길항제를 복강내 투여 및 뇌실 내주입 시 조건장소선호도와 행동민감화가 감소되는 것을 확인함. TRPA1 길항제로 감소시킨 코카인-유도 조건장소선호도는 TRPA1 효능제에 의해 억제되는 것을 확인하여 코카인-유도 조건장소선호도 증가가 TRPA1 채널을 경유함을 증명함.

○ 2차년도에는 1차년도 때 사용한 동물모델에서 뇌를 적출하여 의존중독관련 주요 부위인 cortex, striatum, nucleus accumbens (NAc), 그리고 ventral tegmental area (VTA)에서 TRPA1 channel mRNA 및 protein의 expression 변화를 RT-PCR, western blot, 그리고 immunohistochemistry 등 신경화학적인 방법을 이용하여 연구함. TRPA1 siRNA를 이용한 TRPA1 channel knockdown in vitro 모델에서 세포내 칼슘 정량법, RT-PCR, 그리고 western blot을 이용하여 코카인과 TRPA1 channel 사이의 관련 기전을 연구함. 그 결과 TRPA1 채널이 뇌내 hippocampus, prefrontal cortex, ventral tegmental area, neucleus accumbens, dorsal striatum에서 발현하는 것을 확인하였고 코카인 의존중독 동물모델의 neucleus accumbens에서 코카인에 의해 TRPA1의 발현과 CREB, CAMKII의 인산화가 증가하는 것을 확인함. TRPA1 siRNA를 이용한 TRPA1 채널 knockdown 모델은 코카인에 의한 dopamine system의 변화를 억제시키는 것을 증명함.

○ 3차년도에는 뇌 특정부위 관련 TRPA1 channel의 역할을 규명하기 위해, 2차년도 때 결과를 바탕으로 뇌의 특정부위를 정하여 입체정위 시술을 진행한 mice에 TRPA1 channel antagonist를 현미 주사한 뒤, 코카인에 의해 유도되는 조건장소선호도법과 행동민감화법이 어떻게 변화하는지 관찰함. TRPA1과 관련되어 있을 수용체들을 조사하기 위해 상기 코카인 의존중독 동물모델에서 뇌를 적출하여 D1DR, D2DR, 그리고 dopamine transporter의 receptor binding 실험을 진행함. 그 결과 본 연구진은 Nucleus accumbens에 TRPA1 shRNA를 주입하여 확립한 TRPA1 knockdown 모델에서 코카인에 의해 유도되는 조건장소선호도와 행동민감화를 감소시키는 것을 확인하였고 Nucleus accumbens TRPA1 knockdown 모델에서 코카인에 의한 dopamine 합성효소인 tyrosine hydroxylase의 인산화가 억제되는 것을 확인함.

○ 종합적으로 본 과제는 코카인에 의한 정신적, 신체적 의존성에 대해 정신행동학적, 신경화학적인 접근을 통해 TRPA1 channel의 역할 및 관련 기전을 규명하였고 TRPA1 gene을 knokdown시킨 신경세포주 모델에서 코카인과 TRPA1 channel 사이의 관련 기전을 연구하였으며, 코카인 의존중독 동물모델에서 TRPA1 channel과 도파민 수용체들의 관련성을 조사하였음.
(출처:요약문 4p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 3
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 4
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 5
• 1. 연구과제의 개요 ... 5
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 5
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 5
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 6
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 7
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 7
• Ⅲ. 연구성과 ... 8
• 끝페이지 ... 12