초록 ▼

본 연구의 목표는 다빈도 사용 및 오남용 우려가 있는 생약 중 방풍을 이용하여 방풍에 대한 유효성분 조사 및 분석법 확립, 유효성분의 안정성을 확인하여 방풍의 규격화된 추출법 및 유효성분을 확립하며, 13주 반복투여독성시험을 수행을 통한 신뢰성 있는 자료를 생산하여 안전성 평가에 필요한 과학적인 근거자료를 확보하는데 있다.

본 연구에서는 한약재 방풍 (Saposhnikoviae Radix) 및 이의 유사종에 대하여 추출공정을 확립하고 이에 대한 유효성분 조사 및 분석법을 확립하였다. 또한 이 분석법에 의하여 nodaki

본 연구의 목표는 다빈도 사용 및 오남용 우려가 있는 생약 중 방풍을 이용하여 방풍에 대한 유효성분 조사 및 분석법 확립, 유효성분의 안정성을 확인하여 방풍의 규격화된 추출법 및 유효성분을 확립하며, 13주 반복투여독성시험을 수행을 통한 신뢰성 있는 자료를 생산하여 안전성 평가에 필요한 과학적인 근거자료를 확보하는데 있다.

본 연구에서는 한약재 방풍 (Saposhnikoviae Radix) 및 이의 유사종에 대하여 추출공정을 확립하고 이에 대한 유효성분 조사 및 분석법을 확립하였다. 또한 이 분석법에 의하여 nodakienin의 분석을 통하여 안정성을 확립하고 이시료를 제공하여 유전독성 및 경구독성시험이 실시될 수 있도록 하였다. 국내 유통되는 식방풍, 방풍, 해방풍을 구입하여 ITS 염기서열 분석결과 각각의 한약재임이 확인되었으며, 이들에 대한 오염물질 분석결과 안전성이 확인되었다. 이들을 이용하여 전통적으로 사용되는 방법에 가장 근접하다고 판단되는 열수추출을 이용하여 추출하였으며, 열수추출물에 대한 용매분획시험 결과 nodakenin은 EtOAc층에서 가장 많이 함유되어 있음을 확인할 수 있었다. 본 연구에서는 추가적으로 nodakenin를 함유한 방풍의 열수추출물이 통풍에 대한 치료효과가 있는지를 확인하기 위하여 통풍유도 동물모델에서 방풍을 투여하였을 때 요산배출이 증가되어 통풍에 대한 치료효과 있음을 확인할 수 있었다.

선정된 방풍 열수추출물을 이용하여 비병원체 부재 Sprague-Dawley(SD) 랫드에 단회투여경구독성시험 및 4주 반복투여 용량결정시험(경구)을 진행하였으며, SD 랫드를 이용하여 90일간 반복투여 경구독성시험을 실시하였다.
또한, 방풍, 식방풍 및 해방풍에 대하여 미생물복귀돌연변이시험, 포유류 배양세포를 이용한 염색체이상시험 및 ICR 마우스 골수세포를 이용한 소핵시험을 실시하였다. 경구독성시험을 통하여 방풍 열수추출물의 반수치사량(Lethal Dose 50; LD50)은 >5,000 mg/kg b.w이며, 무독성량(NOAEL)은 5,000 mg/kg/day로 판단되며, 표적장기(target organ)는 관찰되지 않았다. 유전독성시험 결과, 방풍, 해방풍 및 식방풍에 대한 유전독성은 없는 것으로 확인되었다.

본 연구의 결과물은 소비자에게 방풍에 대한 정확한 정보를 제공할 수 있는 근거로 사용될 수 있으며, 방풍 시험분석의 가이드라인 제정을 위한 과학적인 근거 확보를 위한 자료로 활용될 수 있다. 또한 방풍의 분석법, 전처리법, 독성시험자료 확보를 통한 방풍의 안전성평가에 활용될 수 있으며, 기준규격 설정 및 안전관리에 활용될수 있다.

( 출처 : 요약문 6p )

Abstract ▼

There have been concerns that Saposhnikoviae Radix can be used frequently and abuse. The purpose of this research was to investigate the active ingredients, establish the analysis method, and confirm the stability of active components. We also aimed to establish the standardized extraction method an

There have been concerns that Saposhnikoviae Radix can be used frequently and abuse. The purpose of this research was to investigate the active ingredients, establish the analysis method, and confirm the stability of active components. We also aimed to establish the standardized extraction method and the active ingredients of this medicinal plant. To secure the principle scientific database for safety evaluation, we collected reliable data from 13 weeks repeated dose toxicity test.

This research established the extraction methods of Saposhnikoviae Radix as well as similar kinds of medicinal herbs, and investigated the active ingredients, and established analysis methods. Moreover, the stability was secured by nodakienin analysis. Genotoxicity test and oral toxicity test were performed using the provided sample. Base on the results of ITS sequence analysis, we distinguished Saposhnikoviae Radix from similar kinds including Sikppangpung, Haebangpung. The safety of sample was confirmed by contamination analysis. This medicinal herb was extracted with hot water because this method is most similar with traditional preparation. The solvent fraction analysis revealed that EtOAc layer contained the highest level of nodakenin. Additionally, in order to determine the effects of Saposhnikoviae Radix on gout, animals with gout were provided the hot water extract of Saposhnikoviae Radix. Animals treated with hot water extract of Saposhnikoviae Radix showed an increase in excretion of uric acid, suggesting that Saposhnikoviae Radix has therapeutic effects on gout.

Futhermore, the single-dose toxicity test and the repeated dose 4-week oral dose range finding study were conducted using Saposhnikoviae Radix water extract in the Sprague-Dawley rats by administration, and the repeated dose 90-day oral toxicity study was conducted in the Sprague-Dawley rats also. And we evaluated the genetic toxicity study of water extract of Saposhnikoviae Radix, Glehniae Radix and Peucedani Radix by using bacterial reverse mutation test, in vitro mammalian chromosome aberration test and micronucleous test using bone marrow cell of ICR mouses. The lethal dose 50 (LD50) was considered with >5,000 mg/kg b.w and the NOAEL was considered with 5,000 mg/kg/day, and the target organ and adverse effect with administration were not observed. And the genetic toxicity of the test substance was not observed in this study.

This information can be used to design a risk management strategy for Saposhnikoviae Radix. Moreover,the methods which we established for sample preparation and biological safety analysis, can be used for toxicity evaluation of herb medicine such as Saposhnikoviae Radix.

( 출처 : SUMMARY 8p )

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 용역연구개발과제 최종보고서 ... 2
• 제 출 문 ... 3
• 목차 ... 4
• Ⅰ. 총괄연구개발과제 요약문 ... 6
• 국문 요약문 ... 6
• Summary ... 8
• Ⅱ. 총괄연구개발과제 연구결과 ... 10
• 제1장 총괄연구개발과제의 목적 및 필요성 ... 10
• 제2장 총괄연구개발과제의 내용 및 방법 ... 26
• 제3장 총괄연구개발과제의 최종결과 및 고찰 ... 28
• 제4장 총괄연구개발과제의 연구성과 ... 30
• Ⅲ. 제(1)세부연구개발과제 연구결과 ... 32
• 제1장 세부연구개발과제 요약문 ... 33
• 제2장 세부연구개발과제의 목적 ... 36
• 제3장 세부연구개발과제의 내용 및 방법 ... 38
• 제4장 세부연구개발과제의 결과 및 고찰 ... 62
• 제5장 세부참고문헌 ... 110
• Ⅳ. 제(2)세부연구개발과제 연구결과 ... 112
• 제1장 세부연구개발과제 요약문 ... 113
• 제2장 세부연구개발과제의 목적 ... 116
• 제3장 세부연구개발과제의 내용 및 방법 ... 117
• 제4장 세부연구개발과제의 결과 및 고찰 ... 123
• 제5장 세부참고문헌 ... 136
• 끝페이지 ... 139