초록 ▼

본 연구에서는 패류 및 피낭류 중 주요 마비성패독인 삭시톡신과 고니오톡신 4종에 대한 LC-MS/MS 시험법을 확립하였다. 추출용매, 정제 방법, 이동상, pH, 질량분석 조건 등의 최적화를 통해 시험법을 확립하고 유효성 검증을 수행하였다. 0.1 N 염산으로 시료를 추출하고, C18 SPE 카트리지를 사용하여 정제하였으며, TSK-gel Amide-80 컬럼(250 mm × 2.0 mm, 5 μm)을 사용하여 LC-MS/MS로 분석하였다. 유효성 검증은 EU의 SANCO 12571/2013 가이드라인 등에 따라 수행하였다. 검량선

본 연구에서는 패류 및 피낭류 중 주요 마비성패독인 삭시톡신과 고니오톡신 4종에 대한 LC-MS/MS 시험법을 확립하였다. 추출용매, 정제 방법, 이동상, pH, 질량분석 조건 등의 최적화를 통해 시험법을 확립하고 유효성 검증을 수행하였다. 0.1 N 염산으로 시료를 추출하고, C18 SPE 카트리지를 사용하여 정제하였으며, TSK-gel Amide-80 컬럼(250 mm × 2.0 mm, 5 μm)을 사용하여 LC-MS/MS로 분석하였다. 유효성 검증은 EU의 SANCO 12571/2013 가이드라인 등에 따라 수행하였다. 검량선은 매트릭스(matrix-matched) 검량선을 사용하였으며, 상관계수(R²)가 0.99 이상으로 나타나 직선성이 양호한 것으로 확인되었다. 회수율은 전체적으로는 82.7∼110.7%로 나타났고, STX의 경우 회수율이 82.7∼108.4%, 상대표준편차가 1.1∼10.9%로 나타났으며, GTX1의 경우 회수율이 86.8∼103.0%, 상대표준 편차가 0.3∼5.2%로 나타났으며, GTX2의 경우 회수율이 87.0∼109.0%, 상대표준편차가 0.5∼5.5%로 나타났으며, GTX3의 경우 회수율이 90.8∼109.2%, 상대표준편차가 0.8∼6.1%로 나타났으며, GTX4의 경우 회수율이 90.8∼110.7%, 상대표준편차가 0.8∼4.6%로 나타났다. 일간 정밀도 실험결과, STX의 경우 상대표준편차가 0.8∼8.6%로 나타났으며, GTX1의 경우 상대표준편차가 2.0∼9.8%로 나타났으며, GTX2의 경우 상대표준편차가 0.8∼9.9%로 나타났으며, GTX3의 경우 상대표준편차가 0.8∼7.7%로 나타났으며, GTX4의 경우 상대표준편차가 0.8∼8.3%로 나타났다. 시료 중 STX의 검출한계와 정량한계는 각각 7.5 및 25 μg/kg이고, GTX1의 검출한계와 정량한계는 각각 15 및 60 μg/kg이고, GTX2의 검출한계와 정량한계는 각각 15 및 25 μg/kg이고, GTX3의 검출한계와 정량한계는 각각 15 및 55 μg/kg이고, GTX4의 검출한계와 정량한계는 각각 30 및 100 μg/kg이었다. 결과적으로 본 연구에서 개발한 시험법이 수산물 중 5종의 마비성패독 분석에 적합함을 확인할 수 있었다.

확립된 시험법을 사용하여 총 196건의 국내 유통 수산물(패류 124건, 피낭류 72건)를 수거하여 분석하였으며, 이 중 9건에서 검출이 되어 4.6%의 검출률을 보였고, 검출범위는 개별 독소가 25.3∼107.0 μg/kg로 나타났으며, 삭시톡신으로 환산했을 때 21.6∼78.2 μg/kg으로 나타났다.

(출처:국문 요약문 p.4)

Abstract ▼

An analytical method using liquid chromatography-tandem mass spectrometry has been developed for the determination of 5 paralytic shellfish poisoning (PSP) toxins (saxitoxin, gonyautoxin1-4) in shellfish and tunicate samples. The tested parameters included extraction solvent, clean-up method, mobile

An analytical method using liquid chromatography-tandem mass spectrometry has been developed for the determination of 5 paralytic shellfish poisoning (PSP) toxins (saxitoxin, gonyautoxin1-4) in shellfish and tunicate samples. The tested parameters included extraction solvent, clean-up method, mobile phase, pH and mass spectrometric detection parameters including multiple reaction monitoring (MRM) conditions. The toxins were extracted with 0.1 N hydrochloric acid and cleaned up using C18 SPE cartridges. Chromatographic separation of 5 PSP toxins was carried out on a TSK-gel Amide-80 column (250 mm × 2.0 mm, 5 μm) with gradient elution. The developed method was validated according to the requirements of SANCO 12571/2013. In this study, matrix-matched calibration curves were used for the accurate analysis of the PSP toxins in shellfish and tunicate. The average recoveries of the PSP toxins ranged from 82.7% to 110.7%, the intra-day precisions were in the range of 0.3-10.9%, the inter-day precisions were in the range of 0.8-10.0% and the limits of quantification (LOQs) were in the range of 25-100 μg/kg, depending on the analytes and matrices. The validated method was successfully applied for the determination of 5 PSP toxins in real shellfish and tunicate samples, including mussel, oyster, ark shell, sea squirt and styela clava.

(출처:Summary p.5)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 2
• 국문 요약문 ... 4
• Summary ... 5
• 목차 ... 6
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 8
• 제1절 연구개발과제의 목표 ... 8
• 제2절 연구개발과제의 필요성 ... 9
• 제2장 연구개발과제의 국내·외 연구개발 현황 ... 10
• 제1절 연구현황 ... 10
• 1. 해양생물독소의 종류와 특성 ... 10
• 2. 마비성패독 개요 ... 11
• 3. 마비성패독의 원인생물 ... 17
• 4. 마비성패독의 독화 매커니즘 ... 19
• 5. 마비성패독 분석법 및 모니터링 현황 ... 20
• 제2절 국내·외 마비성패독 관리 동향 ... 33
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 35
• 제1절 연구수행 내용 ... 35
• 1. 대표 품목 선정 ... 35
• 2. 수산물 중 마비성패독 시험법 검토 및 확립 ... 36
• 3. 수산물 중 마비성패독 시험법 검증 ... 45
• 4. 유통 수산물 중 마비성패독 실태조사 ... 47
• 5. 간이 검사 키트를 이용한 스크리닝법 검토 ... 50
• 제2절 연구수행 결과 ... 55
• 1. 수산물 중 마비성 패독 시험법 검토 및 확립 ... 55
• 2. 수산물 중 마비성 패독 시험법 검증 ... 70
• 3. 유통 수산물 중 마비성 패독 실태조사 ... 97
• 4. 간이 검사 키트를 이용한 스크리닝법 검토 ... 106
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 109
• 제1절 LC-MS/MS를 이용한 마비성패독 시험법 확립 및 검증 ... 109
• 제2절 유통 수산물 중 마비성패독 실태조사 ... 110
• 제3절 간이검사키트를 이용한 스크리닝법 검토 ... 110
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 111
• 제1절 목표 달성도 ... 111
• 제2절 관련분야에의 기여도 ... 112
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 113
• 제1절 활용성과 ... 113
• 제2절 활용계획 ... 113
• 제7장 참고문헌 ... 115
• 제8장 첨부서류 ... 124
• 끝페이지 ... 212