초록 ▼

매독 검사는 병원급 규모의 진단검사의학 검사실을 갖춘 의료기관뿐 만 아니라 의원, 보건환경연구원, 보건소 등 다양한 규모의 기관에서 이루어지고 있다. 매독검사 시행기관의 검사 능력 향상을 위한 숙련도 평가, 매독 감염 진단의 표준화와 질 향상을 도모하기 위해서는 정도관리 표준물질 패널을 이용하는 것이 필수적이다. 본 과제에서는 이에 필요한 표준물질을 생산하고 그 적합성을 평가하고자 하였다.
표준물질은 양성 물질 3개와 (RPR 반응성 1:1, 1:4, 1:16), 음성 2개를 1 set로 구성하여 총 190 set를 제조하였다

매독 검사는 병원급 규모의 진단검사의학 검사실을 갖춘 의료기관뿐 만 아니라 의원, 보건환경연구원, 보건소 등 다양한 규모의 기관에서 이루어지고 있다. 매독검사 시행기관의 검사 능력 향상을 위한 숙련도 평가, 매독 감염 진단의 표준화와 질 향상을 도모하기 위해서는 정도관리 표준물질 패널을 이용하는 것이 필수적이다. 본 과제에서는 이에 필요한 표준물질을 생산하고 그 적합성을 평가하고자 하였다.
표준물질은 양성 물질 3개와 (RPR 반응성 1:1, 1:4, 1:16), 음성 2개를 1 set로 구성하여 총 190 set를 제조하였다.

- 표준물질의 평가
가. 원료물질의 적합성
헌혈혈액에 대해 필수적으로 시행하는 감염성 질환 검사 중 매독 검사만 양성인 검체를 선택하였다. 즉, HBsAg, HBV 핵산증폭검사, Anti-HCV, HCV 핵산증폭검사, Anti-HIV, HIV 핵산증폭검사 결과에서 음성이며 ALT 검사 결과 참고범위 이내이면서 매독의 혈청학적 검사만 양성인 혈액을 적십자혈액원에서 공급받아 제조하였다.

나. 병간 균질성
국가 매독 감염 진단의 표준화를 위한 숙련도프로그램에 사용될 수 있도록 병간 균질성 검사를 확인하였다. 각 set의 각 분주된 물질 시료의 매독 검사를 3회 반복측정한 결과가 80% 이상 일치하는지 병간 균질성을 확인하였다.

다. 시료의 안정성
제조된 표준물질이 숙련도프로그램에 사용될 경우 온도와 시간 경과에 따라 결과의 차이를 보여서는 안 되므로 4 ℃와 25 ℃의 보관조건에서 4주간 안정성 검사를 실시하였다. 매 1주 간격으로 매독 혈청검사를 시행하여 결과가 안정적으로 유지되는 기간을 평가하며 였으며, 4 ℃와 25 ℃의 보관조건에서 4주간의 기간 동안 검체를 보관하는 것은 매독 혈청검사 결과에 유의한 영향을 주지 않는 것으로 판단되었다.

라. 시료의 비트레포네마 검사 결과
전국 보건소와 보건환경연구원에서 사용하는 매독검사용 RPR 키트를 대상으로 선정하여 BD Macro-Vue RPR Card Test (BD; Beckton, Dickinson and Company, Sparks, USA), RPR Card Test For Syphilis (ASI; Arlington Scientifiec INC., Springville, USA), ASAN RPR Card Test (ASAN; ASAN PHARM. CO., LTD, Hwaseong-si, Korea)를 검사 실시하였다. 음성 표준 물질은 RPR 검사의 반응성이 명확하게 음성임을 확인하였다. 양성 표준물질은 RPR 검사의 반응성이 명확하게 양성임을 판정할 수 있는 반응역가로 각각 1:1, 1:4, 1:16의 결과로 판정하였다.

마. 제조한 표준물질의 다기관 평가
다기관평가를 위한 검사실로 질병관리본부 약제내성과를 포함하여 8개 기관의 검사실을 선별하였다. 코드화한 5개의 표준물질(STS-1, STS-2, STS-3, STS-4, STS-5)과 WHO 표준물질(05-132)에 대해 세 가지 검사키트를 이용한 RPR 검사(BD, ASI, ASAN)를 의뢰하였다. 일반적인 반정량 검사의 일치율 기준을 적용하여 ±1 titer 의 반응성 차이는 허용하였다. 검사 기관별로 반응성 결과의 차이가 있었지만 제조한 표준물질에 대한 각 검사기관 결과의 90% 이상은 연구기관의 결과와 오차범위 이내로 일치하는 것으로 판정할 수 있었다.

(출처 : 보고서 요약문 4p)

Abstract ▼

Diagnostic syphilis tests are widely performed in various medical institutes including private hospitals and public hospitals. To improve the syphilis test performances of each institution, external quality assessment with the same reference standard materials are essential. And thus we manufactured

Diagnostic syphilis tests are widely performed in various medical institutes including private hospitals and public hospitals. To improve the syphilis test performances of each institution, external quality assessment with the same reference standard materials are essential. And thus we manufactured the reference standard materials using syphilis positive donated blood from the Red Cross Blood Center.

Total 190 sets, which consisted of three levels of positive materials (1:1, 1:4, 1:16 titer in non-treponemal RPR reactivity) and two negative materials in each set, were manufactured as reference standard materials.

Base materials for producing reference standard materials were confirmed all other infectious agent negative, i.e., HBsAg, HBV DNA, Anti-HCV, HCV RNA, Anti-HIV, and HIV RNA all negative and ALT within reference interval, except syphilis serologic test. With the collected materials currently available commercial RPR results were compared, such as BD Macro-Vue RPR Card Test (BD; Beckton, Dickinson and Company, Sparks, USA), RPR Card Test For Syphilis (ASI; Arlington Scientifiec INC., Springville, USA), and ASAN RPR Card Test (ASAN; ASAN PHARM. CO., LTD, Hwaseong-si, Korea). These reagents were selected because they are used in nationwide in Public Health Centers and Research Institutes of Public Health & Environment.

RPR reactivity was clearly negative for negative reference materials. But for positive reference materials, RPR reactivities, as 1:1, 1:4, and 1:16 titer, were decided when clear positive reaction was shown.

Once the reference materials were collected and confirmed then it was divided into tubes/vials, and homogeneity test was performed to confirm relevance for the external quality control materials of standardized nationwide syphilis diagnostic tests. Homogeneity among tubes/vials was accepted with more than 80% accordant results by three times of syphilis testing. Results of reference materials should be stable for established storage condition and period for accurate external quality control program. So, stability was evaluated for materials in each week testing of stored materials in 4℃ and 25 ℃ condition during 4 weeks. Stable results were confirmed during 4 weeks. For evaluation manufactured reference standards through multi-laboratories, eight laboratories were selected including ordering department of The Korea Centers for Disease Control and Prevention. Five coded reference standards (STS-1, STS-2, STS-3, STS-4, STS-5) and WHO reference standard (05-132) were delivered for RPR test using three test kits (BD, ASI, ASAN). Difference of reactivity as ±1 titer was regarded as same results. Over 90% results from 8 laboratories were determined as concordant with this research institute.

(출처 : Summary 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 목차 ... 3
• 보고서 요약문 ... 4
• Summary ... 5
• 정책연구용역사업 연구결과 ... 6
• 제1장 최종 목표 ... 6
• 제2장 국내외 기술 현황 ... 8
• 제3장 최종 연구내용 및 방법 ... 9
• 제4장 최종 연구결과 ... 11
• 제5장 연구결과 고찰 및 결론 ... 23
• 제6장 연구성과 및 활용계획 ... 26
• 제7장 정책연구용역사업 진행과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 28
• 제8장 기타 중요변경사항 ... 28
• 제9장 연구비 사용 내역 및 연구원 분담표 ... 28
• 제10장 참고문헌 ... 30
• 제11장 첨부서류 ... 32
• 끝페이지 ... 35