초록 ▼

OECD에서는 in vitro 시험법을 통한 내분비계 활성 검색 시 화학물질이 체내에서 생성될 수 있는 대사물질들에 대한 연구의 중요성을 강조하고 있다. 하지만, 아직까지 in vitro상에서 대사물질들에 대한 연구가 미비한 상황이기 때문에 국제 표준(OECD) 검색시험법을 통한 대사물질의 내분비계장애 활성 평가 및 체내 기전 탐색 등의 정보 확보가 필요한 상황이다. 이에 본 연구에서는 선행연구에서 수행된 농약 100종 중 인체 에스트로겐 수용체(ER) 및 안드로겐 수용체(AR) agonist/antagonist로 판정된 물질 15

OECD에서는 in vitro 시험법을 통한 내분비계 활성 검색 시 화학물질이 체내에서 생성될 수 있는 대사물질들에 대한 연구의 중요성을 강조하고 있다. 하지만, 아직까지 in vitro상에서 대사물질들에 대한 연구가 미비한 상황이기 때문에 국제 표준(OECD) 검색시험법을 통한 대사물질의 내분비계장애 활성 평가 및 체내 기전 탐색 등의 정보 확보가 필요한 상황이다. 이에 본 연구에서는 선행연구에서 수행된 농약 100종 중 인체 에스트로겐 수용체(ER) 및 안드로겐 수용체(AR) agonist/antagonist로 판정된 물질 15종, 24종을 대상으로 이들 농약성분의 대사물질에 대한 활성을 비교 평가하고, 그 작용기전을 탐색하였다. 인체자궁경부암세포주/인체유방암세포주 에스트로겐성 검색시험법(OECD PBTG455)에서는 ER agonist 4종(Metconazole, Phoxim, Profenofos, Methiocarb) 및 ER antagonist 1종(Metiram)의 대사물질 활성이 모물질에 비해 감소하였다. 햄스터난소세포주 이용 안드로겐성 검색시험법(OECD TG458) 및 인체전립선암세포주 이용 안드로겐성 검색시험법(OECD Project 4.99)에서는 AR antagonist 3종(Profenofos, Pyrimethanil, Butachlor)의 대사물질 활성이 모물질에 비해 증가하였다.
에스트로겐성/안드로겐성 작용 기전 탐색 결과, ERK pathway가 활성에 관여하는 것을 확인하였다.
또한 에스트로겐 활성을 보였던 농약성분 중 8종(Diazinon, Tolclofos-methyl, Phoxim, Profenofos, Chlorpropham, Methiocarb, Pyrimethanil, Fenhexamid)에 의한 지방 축적은 에스트로겐의 영향임을 확인하였다. 본 연구는 세포주 이용 OECD 내분비계장애물질 검색시험법과 S9 fraction을 접목시켜 농약 성분의 활성을 1차 screening하고, 에스트로겐/안드로겐 활성을 보인 농약의 대사물질의 활성을 조사한 결과로서, 보다 확실한 내분비계장애 영향평가는 향후 동물실험 등 추가실험이 필요하지만, 본 연구결과는 향후 국내 식품·의약품 및 화장품 원료물질의 내분비계 관련 안전 관리를 위한 활성예측시스템 구축 등을 위한 기초 자료로 활용할 수 있을 것으로 기대된다.

(출처 : 요약문 2p)

Abstract ▼

The OECD emphasizes the importance of study on metabolites that can be produced in the body when the endocrine system is activated through in vitro test method. However, since studies on metabolites have inadequate in vitro, it is necessary to acquire information such as activity evaluation of suspe

The OECD emphasizes the importance of study on metabolites that can be produced in the body when the endocrine system is activated through in vitro test method. However, since studies on metabolites have inadequate in vitro, it is necessary to acquire information such as activity evaluation of suspected endocrine disruptor metabolites and search of metabolic mechanism on the body through the international standardized test method. In this study, 15 and 24 kinds of substances determined to positive were selected in the estrogenic and androgenic activity test and of 100 pesticides conducted in the previous study were selected. We tried to evaluate the estrogenic of metabolites of pesticides and to investigate its mechanism of action. In the OECD PBTG 455(HeLa9903 STTA and VM7 ER TA), the estrogen receptor(ER) transcriptional activity (TA) of 4 pesticides(Metconazole, Tolclofos-methyl, Phoxim, Profenofos, Metiram) metabolites were decreased compared of the parent compounds. In the OECD TG 458(AR-EcoScreen AR TA) and OECD Project 4.99(22Rv1/MMTV_GRKO AR TA), the androgen receptor(AR) TA of 3 pesticides(Profenofos, Pyrimethanil, Butachlor) metabolites were increased compared of the parent compounds. In the results of the estrogenic/androgenic mechanisms, 4 and 2 kinds of substances were confirmed to be related with activation of ERK. Fat accumulation by 8 estrogenic pesticides (Diazinon, Tolclofos-methyl, Phoxim, Profenofos, Chlorpropham, Methiocarb, Pyrimethanil, Fenhexamid) were confirmed to be the effect of estrogen. This study results obtain information about disturbance of estrogenic action on pesticides and their metabolites approved for domestic use. Based on this, it is expected that it can be used as basic data for establishing an activity prediction system for the safety management of the endocrine system of food, drug and cosmetic ingredients in the future.

(출처 : Summary 3p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 국문 요약문 ... 2
• Summary ... 3
• 목차 ... 4
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 5
• 제1절 연구개발과제의 목표 ... 5
• 제2절 연구개발과제의 필요성 ... 5
• 제2장 연구개발과제의 국내·외 연구개발 현황 ... 9
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 11
• 1. 연구 추진 전략 및 체계 ... 11
• 2. 연구내용 및 방법 ... 12
• 3. 연구결과 ... 65
• 가. Human/Rat liver S9 fraction 처리를 통한 농약 성분 대사체 확보 및 분석 ... 65
• 나. 세포주 이용 OECD 내분비계장애물질 검색시험법을 통한 농약성분 및 대사체, 농약성분의 대사 이후에 대한 에스트로겐 수용체 교란 활성 비교평가 ... 84
• 다. 세포주 이용 OECD 검색시험법을 통한 활성 농약성분 및 그 대사체, 농약성분의 대사 이후에 대한 안드로겐 수용체 교란 활성 비교평가 ... 103
• 라. 주요 활성 확인 농약 성분에 대한 에스트로겐성 작용 기전 탐색 ... 130
• 마. 주요 활성 확인 농약 성분에 대한 안드로겐성 작용 기전 탐색 ... 135
• 바. ER agonist 기반 세포주내 지방 축적 등 지방대사 방해 작용 여부 탐색 ... 137
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 139
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 158
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 159
• 제1절 연구성과 및 활용계획 ... 159
• 제7장 참고문헌 ... 161
• 제8장 첨부서류 ... 164
• 끝페이지 ... 169