초록 ▼

미국, 일본 및 유럽연합 등 OECD 회원국을 중심으로 1998년부터 내분비계장애물질 검색시험법 개발 및 확립을 위한 국제협력 연구를 추진해 오고 있다. 그러나 이러한 검색시험법은 동일 물질에 대한 시험ㆍ연구결과가 동일 시험계에서도 정반대로 나오는 등 충분한 검증시험을 통한 국제적으로 표준화된 시험법 확립이 요구되고 있으나 아직까지 국제적으로 표준화된 검색시험법이 거의 없는 실정이다. 2009년도 9월에 OECD에서 에스트로겐 수용체의 전사활성 시험법(에스트로겐성 평가)이 내분비계장애물질 in vitro 검색시험법으로서는 최초로 테

미국, 일본 및 유럽연합 등 OECD 회원국을 중심으로 1998년부터 내분비계장애물질 검색시험법 개발 및 확립을 위한 국제협력 연구를 추진해 오고 있다. 그러나 이러한 검색시험법은 동일 물질에 대한 시험ㆍ연구결과가 동일 시험계에서도 정반대로 나오는 등 충분한 검증시험을 통한 국제적으로 표준화된 시험법 확립이 요구되고 있으나 아직까지 국제적으로 표준화된 검색시험법이 거의 없는 실정이다. 2009년도 9월에 OECD에서 에스트로겐 수용체의 전사활성 시험법(에스트로겐성 평가)이 내분비계장애물질 in vitro 검색시험법으로서는 최초로 테스트 가이드라인으로 제정·공표되었으며, 또한 우리청은 2007년부터 스테로이드 호르몬합성 시험법 국제검증연구를 수행하여 2011년 7월 OECD 시험법 가이드라인(TG456)으로 채택되는데 기여한 바 있다. 보다 효과적으로 많은 물질을 단시간 안에 검색할 수 있는 in vitro 시험법은 아직 검증연구 또는 검증 후 체택 전 논의 과정에 있다. 본 연구에서는 일 미국 CertiChem에서 개발한 인체유방암세포 증식시험법(MCF-7 cell proliferation assay) 국제검증연구에 참여하여 국내외 관련 기술의 국제적 표준화 및 선진화를 유도하고자 하였으며, 현재 미국, 일본, 우리 나라 국가간 검증연구는 완료되어 보고서 초안을 검토 중에 있다. 미국 국립보건원(NIH)와 함께 인체 유방암세포 증식시험법 검증을 수행한 결과 26개 암호물질 중 13개의 에스트로겐 양성 암호물질을 판정하였으며, 4개의 항에스트로겐 양성 암호물질을 판정하였다. 본 연구 결과는 미국 NIH에 최종보고서 형태로 송부하여 평가단으로부터 기준적합 판정을 받았다. OECD에서 권고한 에스트로겐 수용체의 전사활성시험법(TG455), 인체유방암세포주의 증식시험법 및 에스트로겐 수용체 결합반응 시험법을 수행한 결과 butyl paraben, propyl paraben, isobuyl paraben이 에스트로겐 전사활성, 인체유방암 세포증식 및 에스트로겐 수용체 α 및 β 결합활성이 나타났으나, methyl paraben 및 triclosan은 어떠한 활성이 보이지 않았다. 이러한 국제검증연구는 국제적으로 표준화된 가이드라인 제정에 기여할 뿐만 아니라 국가적 위상을 높이는 계기가 될 수 있을 것으로 사료된다.
내분비계장애물질 검색시험법 기술 보급을 통한여 전문인력을 양성하였으며, 올바른 정보제공을 홈페이지 및 보도자료등을 통해 유해물질 안전관리 지원을 하였다.

Abstract ▼

There is few test and screening methods about endocrine disruptors which is one of the world wide social problems like environmental pollution, global warming. OECD first published the OECD guideline for the testing of chemicals screening test guideline. However, in vitro screening test guidelines w

There is few test and screening methods about endocrine disruptors which is one of the world wide social problems like environmental pollution, global warming. OECD first published the OECD guideline for the testing of chemicals screening test guideline. However, in vitro screening test guidelines which are effective in a large quantity screening for chemicals are still in process of the validation or the official discussion before adoption. Thus, to be beforehand with the international cooperative standardization of in vitro screening test method recommended by OECD, we participate in the international cooperative validation study of MCF-7 cell proliferation assay developed by USA CertiChem. Besides contributing to the international validation study of the endocrine disuptors test and screening method, it will be helpful for acquiring the advanced international standardization of domestic related research field as well as for being ready for the global standardization of test methods. This cell proliferation assay use MCF-7 cell line which is given human estrogen receptor α and a estrogen receptor β. By measuring the DNA contents by a ELISA reader, estrogenic or anti-estrogenic activity of test chemicals are easily detected. So far, we passed the Phase 1, 2, 3 results of international validation study and sent the Phase 1, 2, 3 results to the lead lab, NIH, ICCVAM. It is meaningful for us to participate in this OECD international validation study not only for contributing to the global standardization of testing and screening methods of endocrine disruptor but also for raising the national research standard in this field.
The in vitro androgen receptor (AR) binding assay for screening chemicals possessing endocrine disrupting potency is placed in level 2 in the OECD framework and can provide mechanistic information. The AR binding assay can be used to determine the ability of probable endocrine disruptors (EDs) to compete with synthetic androgen methyltrienolone (R1881) for binding to recombinant rat AR (rrAR). In this study, we assessed AR binding of various 14 chemicals using Lexius Freyberger's method. It is meaningful for us to participate in this OECD international validation study not only for contributing to the global standardization of testing and screening methods of endocrine disruptor but also for raising the national research standard in this field.

목차 Contents

• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 1
• 표지 ... 2
• 요약문 ... 4
• Summary ... 5
• 목차 ... 6
• I. 연구개발과제 연구결과 ... 7
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 7
• 제1절 연구개발과제의 목표 ... 7
• 제2절 연구개발과제의 필요성 ... 7
• 제2장 연구개발과제의 국내ㆍ외 연구개발 현황 ... 14
• 1. 내분비계장애물질 검색시험법 ... 14
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 18
• 1. 시험물질 ... 18
• 2. 시험방법 ... 19
• 3. 시험결과 ... 43
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 116
• 1. 동물대체시험법 국제협력 ... 116
• 2. 유해물질질의 (항)에스트로겐성 및 (항)안드로겐성 확인 ... 117
• 3. 내분비계장애물질 안전관리 지원 등 ... 118
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 120
• 1. 동물대체시험법 국제협력 ... 120
• 2. 유해물질질의 (항)에스트로겐성 및 (항)안드로겐성 확인 ... 120
• 3. 내분비계장애물질 평가사업 운영 ... 121
• 제6장 연구개발과제 연구개발 결과 활용계획 ... 122
• 제1절 활용성과 ... 122
• 제2절 활용계획 ... 122
• 제7장 참고문헌 ... 124
• 제8장 첨부서류 ... 128
• CertiChem Inc. MCF-7 Cell Proliferation Assay Agonist Protocol ... 129